где х— содержание фосфора в исследуемом корме, мг/г (г/кг); С — количество фосфора в стандартном растворе, мг: Her — высота стояния стандартного раствора в стаканчике колориметра, установленная по шкале; Hx -— высота стояния испытуемого раствора; У — общий объем раствора золы после разведения; У; — объем раствора золы, взятой для колорниметрического’ | определения фосфора; а-— навеска . корма,рии окрашенногог; Р — разведениераствора подготовленного для колоримет-я Разводить подготовленный к колориметрин испытуемый раствор следует только в случае значительной разницы в интенсивности окрамы испытуемым: н стандартным растворами. eee. Fou объем стандартного раствора фосфора 100 ma, а объем испытуемого (окрашенного) раствора золы корма перед КОРНИ 200 мл, то Р равно 2 (200 мл: 100 мл). Чаще всего равняется | (100 мл: 100 мл) Особенности определения фосфора при использовании фотоэлектроколориметра. Для построения калибровочной кривой на фосфор в мерные колбы на 100 мл берут 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12 и 15 мл Иa рабочего раствора фосфора (в 1 мл содержится 0,01 мг _flasice добавлют так же, как и при определении фосфора в кормах, растворы молибденовокислого аммония, сульфита патрия и гидрохинона (или амидол и содово-сернистый раствор). р Объем содержимого доводят до 100 мл, оставляют на 16—24 ч и колориметрируют с красным светофильтром. Используют стакан1ики с толщиной просвечивающего слоя 30 мм. sz р Для построения шкалы колориметрическое определение фосфора в стандартных растворах проводят 3—4 раза в разные дни с од: У т теми жереактивами. Затем вычерчивают график. биг о горизонтали располагают данные о концентрации фосфора : мг, или мкг), по вертикали— показатели колориметра. Нуль прибора электрофотоколориметра устанавливают по раствору с водой и реактивами (нулевой раствор без фосфора). °С каждой партией анализируемых проб корма целесообразно готовить три стандартных раствора фосфора (0,02; 0,05 и 0,10 мг) для построения переменной или контрольной шкалы на Ри для вывы ROR DE PO SHOES коэффициента К. олориметрируют раствор и записывают показания шкалы фбме По. калибровочной кривой находят количество фосont (мт), ‚соответствующее показаниям шкалы фотоколориметра asa оли’ несло фосфора в кормах при сухом озолении определяют формуле ВК
ВЫ техИаафа p 1 Via’г корма, мг; С — количество фосhg atria В Ry patraope золы, установленное по као а ‘ ‘P у и = соответствии с показателями фотокоть, 2 ZF — общий объем раствора золы после pasНИ aD: 17 GOREN раствора золы, взятый для колор рического определения фосфора, м; Р— разведение подготовленного к колориметрии окрашенного. раствора’ 40лы (по сравнению со стандартным раствором, объем которого равен 100 мл); «— масса корма, г; К — поправочный 181
коэффициент на показания ранее подготовленной стандартнойрасхожденииновыйшкалы графикна сР калибровочной(его применяюткривой,при расчетах,а не есливычерчиваютимеются Коэффициент К рассчитывают— переменнуюпошкалу).отношению суммы фактичес1 ких концентраций фосфора в приготовленных стандартных растворах к сумме концентрации фосфора, определенных по показаниям электрофотоколориметра и ранее подготовленной стапдартной шкале на фосфор Пример: д 0,170 мер (0,02 - 0,05-- 0,100 мг) 0.85 0,200 мг (0,024 -|- 0,058 4-0, 118)" Ванадо-молибдатный метод определения фосфора (из растворов золы). Метод основан на образованин в кислой среде фосфорно-ва. надо-молибдатного комплекса желтого ивета. При концентрации фосфора 1—20 мкг/мл (0,001—0,020 ми/мл) интенсивность окраски пропорциональна содержанию элемента. Реакиню слелует проводить в растворе азотной кислоты 0,5-0,9 и. (до 1,5 и.). Максимальное светопоглощение наблюдается в ультрафиолетовой области сиектра при 315 um, Определение фосфора проводят в области 460—500 нм, используя синий светофильтр. Окраска устойчива около 48 ч. Реактивы, посуда, оборудование. Реактивы. Кислота азотная концентрированная; азотная разведенная кислота (1:2)— один объем концентрированной HNO, разводят двумя объемами листиллированной воды (раствор 1); аммоний ванадиевокислый-мета (ГОСТ 9336—60); 0,25%-ный раствор ванадневокислого аммония (для приготовления берут 2,5 г соли и растворяют в кипящей дистиллированной воде, охлаждают, добавляют 20 мл концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора дистиллированной водой до 1 л) (раствор 2). Раствор молибденовокислого аммония — 5%-ный {для его приготовления берут 50 г соли, растворяют в горячей днстиллированной воде, охлаждают и доводят объем водой до | л) (раствор 3); реагирующая смесь (растворы 1, 2 и 3 смешивают в отношении 1:1:С может храниться в темном прохладном месте до 6 мес); запасной стандартный раствор форфора (4,393 г КН»РО, х.ч. растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 мл в дистиллированной . воде и доводят объем до метки; в | мл запасного раствора содержится 1 мг фосфора). Этот раствор служит исходным для приготовления шкалы стандартных растворов. Для приготовления шкалы стандартных растворов в мерные колбы на 500 мл отбирают определенные количества запасного стаидартного раствора (табл. 43). _ 1 74); Посуда.мерные Мерныепипетки колбына 5, 10,на 50,15 и100,20 500мл (ГОСТи 1000 202-92—74);мл (ГОСТ 1770—мерные цилиндры на 1000 мл (ГОСТ 1770—74). 7 той спиралью.Оборудование. Фотоэлектроколориметр, электроплитка сэйзакрыХод определения. Из стандартных растворов 3, 5н 7 m0 25откоймл тс ТЕрез вым вбаллончикомконические илиили nenaширинцем-дозаторомколбочки (приберутae + J строении градуировочного графика используют все 8 растворов); в
- Шкала стандартных растворов ОБОЕВвый ^ И Показатели ——— И0 | д | J | 5 | 1 | 5 | в | 7 | 8 Объем запаеногой 0 1 2 3 4 6 8 10 16 стандартного — рас. твора (в | мл | mr р > С‘одержацшиеat Opa) фосфо-5 0 1 2 3 4 6 8 10 у 16 ра в 500 мл стан дартноко раствора, 2a "aay Be bapa 0 0,05 0,10 0,15 0,20 0,30 0,40 0,50 0,80 Ва ра творо =f того Juin лв rakasekoro ~ aupeire: ления, мг 1 вс При очанно В каждую колбу добавляют по 5 мл 20%-ного раствора АИТ ANCTHAAMPHDANHON водой до 500 мл и перемешивают. ROTO, TMU OOO доля пнализируемых проб кормов, прилиHOOT иниюткой с баллоичиком но 5—10 (при навеске корма 5 г) или $6 мл (при навеске 1—2 г) раствора золы (при объеме раствора лм 5-10 мл добавляют по 5—7 капель 10%-noi HCl и 20—15 мл воды). Одновременно проводят холостое определение в растворе, получениом нри обработке тигля без золы корма. №} колбочки со стандартными и испытуемыми растворами 206aBoT fie о мл растаора азотной киелоты 1:2 (раствор 1); ставят их ий плитку поволят растноры AO кипення и затем охлаждают. Ко все колбы пносят по 15 мл реагнрующей смеси, взбалтывают, доподят объем ло метки дистиллированной водой (или сначала пе“ релипают из конической колбочки в мерную, обмывают 10—90 мл полы}, Растворы в мерных колбочках перемешивают и оставляют ий GO мин Фотометрируют, используя синий светофильтр с максимумом пропускания 450—500 нм и кюветы с толщиной просвечивающего слоя 20—30 мм Pac MHOPOM сравнения служит нулевой раствор шкалы, Солержание фосфора в анализируемом растворе золы корма определиют по градунровочному графику, построенному по результатам фотомстрирования стандартных растворов шкалы. На графике на оси абсцисс откладывают содержание фосфора во всем объеме (50 мл) стандартных растворов шкалы, подготовленных к фотометпроверяетсярии, на оси ординатлли каждой— оптическуюновой партииплотность.испытуемыхКалиб р овочнаяастворов. шкала Количество фосфора рассчитывают по формуле х= av или х = (СВУC—B)-V Viva У, а ы Tale ныы 5 фосфора, мг/г/ „корма;] С — количество фосфора изируемом объеме (50.мл колориметрируемого окра
183
