Справочник по контролю кормления и содержания животных

Площадь всей электрофореграммы и отдельных участков опре-

деляют двумя способами: а) планиметром, с помошью которого определяют общую площадь электрофореграммы, вычерченной на миллиметровой бумаге, и площадь отдельных пиков, соответствующих отдельным фракциям белка . Величину общей площади электрофореграммы принимают за 100, а затем вычисляют, какой процент по отношению к ней составляет площадь каждого пика; 6) нарисованную на миллиметровой бумаге электрофореграмму вырезают пожницами и взвешивают; затем бумагу разрезают между пиками и взвешивают каждый пик отдельно. Общую массу электрофореграммы принимают за 100 и вычисляют, какой процент по отношению к нему составляет массу каждого пика, Последний способ более точен и при использовании торзионных или электроаналитических весов менее трудоемок. Описанные выше расчеты позволяют получить данные о величине отдельных фракций в относительных величинах. Можно вычислить абсолютное количество отдельных фракций белка. Для этого нужно определить общее содержание белка сыворотки крови по Кьельдалю или при помощи рефрактометра Пример. Найдено, что общий белок сыворотки крови равен 8%. Общее количество белка принимают за 100%, а ранее найденное количество альбумина (в относительных величинах) принимают за X: 8— 100 х— 3,82% альбумина. х- 46,75 Таким же образом рассчитывают абсолютное количество других я : 90) В. Н = фракций. Так, содержание а-глобулинов равно 1,02%, В-глобулинов 0,74%, у-глобулинов 4.18%. Коэффициент A/T— 2,424.равен Общее0,91. количество глобулинов равно При определении отдельных фракций белка пользуются денситометром, которыи» вычерчивает кривую, а затем определяют число от. a дельных фракций. Удобно пользоваться денситометром одновременно скаждойЕэлектроннымфракции.интегратором, дающим показания величины площади Определение белковых фракций сыворотки крови экспресс-методом (по Олл — Маккорду в модификации С. А. Карпюка)

Принцип метода основан на свойстве фосфатных растворов различной концентрации осаждать белки. Величину оптической плотности растворов с определенными белковымн фракциями определяют на фотоэлектроколориметре. Приборы, посуда, реактивы. Фотоэлектроколориметр; бюретка; пнпетки; пробирки с притертыми пробками; мерные колбы; однозамещенный фосфорнокислый калий; едкий натрДля получения основного раствора добавляют 226,8 г КН.РО: к 400 мл раствора, содержащего 33,5 г NaOH. Размешивают до полного растворения, охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора дистиллированной водой до 500 мл (или до массы 667,5 г). Далее готовят четыре разведенных фосфатных раствора. Раствор 1. Вносят 92,6 мл (или 123,5 г) основного фосфат-

ного раствора в мерную колбу на 100 мл и доводят дистиллироваиной водой до метки. Раствор 2. К 75,0 мл (или 100 г) основного фосфатного раствора добавляют дистиллированную воду до объема 100 мл. Раствор 3. К 58,8 мл (или 78,5 г) основного фосфатиого раствора добавляют дистиллированную воду до объема 100 мл. Раствор 4. К 48,7 мл (или 65 г) основного раствора добавляют дистиллированную воду до объема 100 мл. 5. После добавления воды растворы тщательно перемешивают. При хранении разведенных растворов добавляют ло одной капле хлороформа на 100 мл раствора (для предупреждения бактернальшого загрязнения). Ход определения. В штатив устанавливают 6 пробирок на 10— 15 мл, нумеруют их цифрами (0, 1, 2, 3, 4, 5). В пробирку «0» отмеривают 10 мл дистиллированной воды, в пробирки 1, 2, Зи 4 вносят по 5 мл разведенных фосфатных растворов (растворы 1—4). В пробирку 5 отмеривают 0,5 мл сыворотки крови, 0,75 мл дистиллированной воды и 3,75 мл основного фосфатного раствора. Содержимое пробирки 5) перемешивают, а затем из пее переносят по 0,5 мл смеси в пробирки 1—4, а в пробирку «0» добавляют 1 мл. Содержимое каждой пробирки тщательно перемешивают, избегая образования пузырьков воздуха. Через 15 мин определяют оптическую плотность растворов в пробирках 1—4 на фотоэлектроколориметре при красном светофильтре, пользуясь кюветами шириной 10 мм. В качестве контроля используют раствор в пробирке «0». После измерения оптической сти COS PKE MOR ORTDUCHDOrgsSagem ROBOng na Cuer. Из показа-, й оптической плотности раствора пробирки | вычитают этот же RUMAEROM maa ©. № G ii agp6уминов. робиркиДалее из 2.оптическойРазность плотностибудет равнасодержимогооптической плотностпробирк и т тотже показатель пробирки 3. Разность составит оптисти уюпообиркиплотность3 вычитаюта-глобулинов.таковуюАналогичнопробирки 4.изРазностьоптическойбудетплотно-птий И aaностью В-глобулинов.yy А робироптическаяi плотностьн удесодержиказателимого пробиркир разностир 4 будетудетоптическойравна плотноститаковойa у-глобулинов.ТОбУЛиНОВ,пробирок 1—4GarcMmEcellonЗатехсуммируют,0: принимая сумму оптических плотностей за 160, вычисляют содержаниеЕ oat проще тах. Для этого содержание общего de определяют ЕЕ рическим способом (табл. 55). Принимая количество общего белка

за 100 и зная количество каждой фракции в относительных процентах, проводят расчет фракций в абсолютных процентах. не приемлемОписанныйдляэкспресс-методоценкн состоянияопределениябелковогобелковыхобмена фракцийв зависимостивполот различных условий кормления. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗЕРВНОЙ ЩЕЛОЧНОСТИ КРОВИ Величина рИ крови животных поддерживается на постоянном процессеуровне, несмотряобмена всшествNa образованиеи поступлениекислыхихи сщелочныхкормами. соединенийПостоянствов РИнатной,ных крови^{органов.} фосфатной,регулируетсябелковой,наличиемгемоглобнинойв ней буферныхи функциейсистем выделитель-— бикарбоВ нейтрализации кислот, образующихся в процессе обмена, большая роль принадлежит карбонатному буферу, состоящему из угольной кислоты и бикарбоната натрия. Это подтверждается тем, что изменение в составе карбонатного буфера при нарушении кислотнощелочного равновесия происходит раньше всего, а изменение его компонентов отражает состояние других буфериых систем крови. Поэтомув огранизмедляживотныхвыясненияопределяютнарушенияконцентрациюкислотно-шелочногобикарбонатовравновесиякроBH, которую считают резервной щелочностью. Последняя изменяется в зависимости от полноценности кормления, условий содержания, нормальныхсистемы животных.функций желудочно-кишечного тракта и выделительной Причинами снижения резервной щелочности крови могут быть: избыточное поступление с кормами кислых элементов (применение несбалансированного концентратного типа кормления); скармливание силоса плохого качества с большим количеством масляной кислоты (особенно при недостатке легкоферментируемых углеводов в рационе); нарушения минерального ‘и витаминного обмена, рахит, кетоз, родильный парез и некоторые другие заболевания. Имеются указания, что снижение щелочного резерва наблюдается у телят при токсической диспепсии. Отсутствие моциона часто приводит к снижению щелочного резерва крови вследствие накопления в организме животных недоокисленных продуктов обмена. Расстройство сердечной деятельности, эмфизема легких, нахождение животных в воздушной среде с высокой концентрацией углекислоты могут вызвать в организме состояние не метаболитического, а газового сдвига кислотно-щелочного равновесия в связи с замедлением процесса отдачи легкими углекислоты. ъ Определение резервной щелочности плазмы крози по Ван-Слайку

Принций метода заключается в измерении количества углекиелого газа, вытесненного серной кислотой из бикарбонатов плазмы крови в разряженном пространстве аппарата Ван-Слайка. Величина углекислого газа исчнеляется в объемных процентах (06%С0»). Реактивы. 1%-ный раствор аммиака в дистиллированной прокипяченной воде, лишенной углекислоты; октиловый или каприловый спирт; 10%-ная серная кислота (х.ч.); щавелевокислый калий (при

oe