Определение ацетоновых (кетоновых) тел в моче стическийАнализ мочи на содержание кетоновых тел — хорощий диагнотоза,бенно частов условияхпоказательвстречающегосяпромышленныхдля выявленияу высокопродуктивныхкомплексов.начальных стадийживотных,развитияосо-кепод Ацетон,общим названиемацетоуксусную— ацетоновыеи В-оксимасляную(кетоновые) кислотутела. Ониобъединяютпредставляют собой промежуточные продукты обмена жиров, белков н углеводов. К кетогенным веществам относят жиры и некоторые аминокислотыновное антикетогенное(лейцин, нзолейцин,вещество.тирозин,Подобнымифенилаланин).свойствамиГлюкозаобладают— осглицерин, глюконовая, яблочная, яптариая, лимонная и другие кислоты, принимающие участие в цикле Кребса. Кроме того, антикетотеннымилин, метионинсвойствамии др.). обладают липотропные кормовые факторы (хо-
Кетоновые тела, образующиеся в организме здоровых животных, окисляются. Часть их может ресинтезироваться в высшие жирные кислоты (качественные реакции в моче их He обнаруживают). При дефиците углеводов в организме уснлнвается образование кетоновых тел в печени и тормозится HX окисление, а количество их в моче возрастает. Увеличение кетоновых тел в моче (кетонурия) у животных отмечают при несбалансированном, неполноценном кормлении, особенно при высоком его уровне (у высокопродуктивных коров), при скармливании большого количества силоса, кислого жома и других кормов, содержащих избыточное количество масляной и уксусной кислот, избыточном скармливании концентратов и недостаточном количестве в рационе легкорастворимых углеводов. Кетопурию отмечают при голодании, в пик лактации, при родильном парезе и других заболеваниях. Увеличение кетоновых тел может отмечаться при высокой концентрации в крови аммонийных солей. В этом случае аммиак тормозит окисление пировиноградной кислоты и ацетилкофермента А (прерывается цикл Кребса). Отмечено, что в моче здоровых коров содержится 9—10 мг% кетоновых тел, в моче больных животных до 200—300 mr%. Предлагаемые ниже методики определения наличия ацетоновых тел в моче иства.молоке могут быть выполнены непосредственно в условиях хозяй-
Проба Лестраде. Реактивы ин посуда. Реактив Лестраде: 1 часть нитропруссида натрия растирают в ступке, затем добавляют 20 частей аммония сернокислого и 20 частей безводного карбоната натрия и тщательно растирают, Реактив хранят в темной склянке в сухом месте. В процессе хранения он теряет свою активность, поэтому готовить его на длительный срок не следует. Кафельная белая палитра или белая фарфоровая чашечка (можно использовать обычное предметное стекло, помещенное на белый лист бумаги). Ход определения. На палитру, чашечку или стекло наноear около 0,2 г реактива и капают на него 2—3 капли мочи. Появление через 0,5—1] мин розовой и темно-фиолетовой окраски свидетельствует о наличии в моче ацетоновых тел (ацетона и ацетоуксусной кислоты). Слабое окрашивание смеси в розовый с сиреневым оттенком цвет означает наличие анетопа ие менее 10 мг %, появление темно-фиолетового цвета свидетельствует о наличии ацетона свыше 100 мг %.
Проба Росса. Реактивы и посула. Реактив Pocca: ЕЁ ни тропруссида натрия растирают в ступке, затем добавляют 99 г uMMONKS сернокислого и тщательно растирают в очень мелкий норошок; реактив нестоек и гигроскопичен, его хранят в темной бирки;склянкепияцет.с притертой пробкой в сухом месте; едкий натрий х.ч.; проХод определения. В пробирку вносят [р реактива Росса, наливают 5 мл свежей мочи и пинцетом добавляют 1—2 крнеталликл едкого натрия. Пробирку встряхивают до растворения реактивов, Реакцию читают через 5 мин. При постановке пробы температура должна быть не ниже 18° С. Слабая розовая окраска— сомнительная реакция; розовое окрашивание— слабо положительная; пурпурный цвет, раствор пропрачный на свету — положительная реакция; темно-пурпурное окрашивание,реакция. раствор не прозрачен на светур — резко положительная
Определение белка в моче
Практически нормальную мочу животных примято сунтать свободной от белка, так как обычными лабораторными методами он не определяется. В ничтожных количествах белок в моче обнаруживают у новорожденных животных. Белок в моче животных может быть обнаружен при сильном мышечном напряжении н обильном содержании протеина в кормах Причиной такой альбуминурии следует считать накопление в Kpoин значительного количества молочной и фосфорной кислот, которые, повышая проницаемость клубочковых капилляров, ‘действуют ии них токсически. У крупного рогатого скота и овец после чрезмёрного поедания концентрированных кормов часто наблюдают появление белка и моче алиментарного пронсхождения. Альбуминурия может наблюдаться при заболевании пнщеварительного ‘тракта печени, отравлении минеральными ядамн, скармливании заплеснёвелых кормов, ядовнтых растений. Иногда альбуминурия отмечается у беременных животных. ue На белок исследуют свежую н совершенно прозрачную мочу, а фильтр).os Sho прозрачную профильтровывают (иногда через двойной Для качественного определения белка в моче на практике ‘наиболее часто применяют пробы, описываемые ниже. Г Проба с сульфосалициловой кислотой. Достоннство пробы заключается в том, что данная кислота образует муть только в прнсутствии белков, альбумоз и бальзамических веществ. Помутнение, вызванное присутствием альбумоз, прн нагревании мочи исчезает, а при охлаждении появляется вновь. Белковый осадок при нагревании не растворяется, Присутствие бальзамических вешеств тоже. образует помутненне, которое исчезает при добавлении нескольких капель спирта РН Реактивы и оборудование. 20%-ный раствор сульфосалициловой кислоты (хранят во флаконе из темного стекла) “hee ронки; фильтры; пробирки; штативы. а Ход определения. К 4—5 мл профильтрованной мочи прибзвляют по каплям раствор сульфосалициловой кислоты. В one ствии белка в моче каждая капля образует облачко мути, быстро оседающее на дно пробирки. В зависимости от содержания белка
темномможет бытьфоне,легкаяили помутнениеопалесценцияи выпадениежидкости,хлопьевидногозаметная толькоосадка.на Проба с сульфосалициловой кислотой обладает большой чувет. вительностью, давая положительные результаты при содержании 0,015% белка. Проба с азотной кислотой. Азотная кислота, взятая в избытке, осаждает белок без нагревания. Реактивы и оборудование. 50%-ная азотная кислота (удельный вес 1,25); пробирки; штатив для пробирок; пипетки на млХод определения. На дно пробирки, не смачивая ее стенок, наливают 2—3 мл раствора азотной кислоты и осторожно по стенке насланвают равный объем профильтрованной мочи. Наличие белка определяют ио появлению Ha границе жидкостей белого кольца (пленки) из свернувшегося белка. Если в моче содержится незначительноечерез 2—3 мин: количествоПоявление белка,тонкого,пленкано отчетливогопоявляетсякольцане сразу,к концуа третьен минуты соответствует количеству белка в моче, равному 0,033%Необходимо,(в 1000 млучитывать,мочи содержитсяie часть0,033другихг белка).о лик частей мочи под действием азотной кислоты, выпадая в осадок, образует кольцо, похожее на белковое, Например, нуклеоальбумины н муцин образуют кольцо выше границы жидкостей, которое растворяется при легком взбалтыванин; кольцо, связанное с наличием альбумоз, растворяется прн нагревании; при налични в моче большого количества мочекислых солей (уратов) кольцо располагается несколько выше границы жидкостей и исчезает при легком нагревании (при разведении такой мочи в 2—3 раза водой кольца не образуется); в концентрированной моче может образоваться кольцо из азотнокислой мочевины (устраняется при разведении мочи); смолистые вещества мочи нередко образуют ограниченное кольцо, растворяемое при прибавлении спирта или эфира; пигменты мочи образуют цветные кольца (буро-красные, коричневые, зеленые), отличающиеся от белковых прозрачностью и цветом; ряд цветных колец дают желчные пигменты (осадок от соединения желчных пигментов C азотной кислотой, собранный на фильтре, под действием спирта растворяется); порошкообразный тимол, применяемый при консервировании мочи, дает кольцо, трудноотличимое от белкового, поэточ му консервируют мочу кристаллическим тимолом.
` Количественное определение белка в моче
Используют пробу с азотной кислотой. Известно, что появление тонкого, но отчетливого кольца на соединении раствора азотной q кислоты и мочи к концу третьей минуты соответствует количеству белка в моче, равному 0,033% (0,0033%). Если в моче белка больше, то кольцо появляется раньше, a иногда тотчас же после наслоеHHH МОЧИ, В таком случае ee разводят водой до тех пор, пока после наслоения на азотную кнелоту в каком-лнбо разведении кольцо образуется именно к коицу третьей минуты. Количество белка (в %) будет равно произведению (0,038. на степень разведения. Ход определения. В 6—8 пробирок наливают по 2 мл дистиллированной воды, затем в первую пробирку добавляют 2 мл профильтрованной мочи и содержимое смешивают Из первой пробирки пипеткой переносят 2 мл смеси во вторую пробирку, из вто238 ,
