ция фосфора, определенная по калибровочной кривой в соответствии с показаниями фотоэлектроколориметра, МГ; у = объем сыворотки ‘в нентрифугате, взятом для цветной реакиии (в 1,5 мл центрифугата содержится 0,3 мл сыворотки); 100— пересчет данных в мг%.
| 58. Схема внесения реактивов в пробирки со стандартным раствором фосфора 7 Se Eee 00 К eee Пробирки Растворы, мл раст я as a el a т | |||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| : | | _ | | d | | 4 | | Al | | = | ||
| | Oe) | О | Е | |||||
| Рабочий фосфора | стандартный раствор (в 1 мл 0,01 мг) | 0,5 | 1,0 | 1,5 | 2,0 | 2,5 | 3,0 |
| Дистиллированная вода | 2,5 | 2,0 | 1,5 | 1,0 | 0,5 | — | |
| Молибденовокиелый аммоний | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | |
| Пробирки | встряхивают | ||||||
| Гидрохинон | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | 0,5 | |
| Пробирки | встряхивают | ||||||
| Содово-сернистый раствор | 1,5 | 5 | 1,5 | 15 | 15 | 15 | |
| Fat НЕЕ CETTE р | EES вода фосфора в 10 мл ра, мг | 0,005 По | робиркь 4,5 0,010 мл | осторожно в 0,015 | каждую | у встряхи- пробирку 0,0200,025 | у 0,030 |
При использовании колориметров типа КОЛ-1М или Дюбоско содержание неорганического фосфора находят по формуле: С.Н, -100 хе" Н..0,3 ? ERCте — COAGЗы DayaHHeеннеорганического> фосфора,. мг%; С — содержание а в STRAP THOM растворе, использованном при колор ни ( и CARR BRTHOLO раствора содержит 0,01 мг aeemope), мг; о слоя стандартного раствора по Е. и 2-~ толщина слоя испытуемого раса ра : 100. ore Аи СВОИ В которой определялся п И ое а паев. eae ees А Se В крови даже при отсутствии гемолит RNS EERE: = ч может нарастать органическая кислотоTPOBSADрастаоримая REY Е|6 братное заявление:счет неорганическогоорганический кислотораствфосфора. П о римыйзднее фосфор. подвергается гидролизу с образованием неорганического фара (в темолизированноя крови гидролиз совершается сразу н весьма интенсивно). Поэтому при взятии крови для определения фосфора необходимо не допускать. гемолиза, а определение проводить непосредственно после взятия крови,
Определение неорганического фосфора с ванадат-молибдатнымв безбелковом фильтратереактивомкрови
Принцип метола. В безбелковом фильтрате фосфор с ванадатмолибдатным реактивом дает лимонно-желтое окрашивание. При концентрации 1—20 мг/л интенсивность окраски пропорциональна содержанию фосфора, Интенсивность полученного окрашивания замеряется на сисктрофотометре или фотоэлектроколориметре Реактивы. 20%-ный раствор трихлоруксусной кислоты; концентTeeрировапная Saсерная кислота;100 т eeeрастворВ молибдата500 a водыаммония О(готовятдо 50°ванной С); после охлаждения осторожно приливают 100 мл концентриробу, у долнваютсернойдистиллированнойкислоты, спова охлаждают,водой до1 переносятa: растворв ванадатамерную кол-аммония (2,5< г ванадата. аммония йрастворяют} = в 500 мл кипящейoe дистиллированной воды; кипячение продолжают до тех пор, пока раствор ие окрасится в желтый цвет; после охлаждения раствор переносят в мерную колбу и доливают дистиллированной водой до 1 a; реактив стоек); реактиз na фосфор (готовят путем смешивания растворов молибдата и ванадата аммония в равных объемах; пригоден в течение двух месяцев); стандартный раствор фосфора (2,1940 г однозамещенного фосфата калия, высушенного в эксикаторе над концентрированной серной кислотой до постоянной массы, растворяют B мерной колбе на 500 мл, доводят до метки дистиллированной водой; к готовому раствору ИО 2,5 мл хлороформа). В 1 Ma раствора содержится 1 мг фосфора. Перед употреблением готовят рабочнй стандартный раствор фосфора путем разбавления в 50 awl мл раствора переносят в мерную колбочку на 50 мл и О OBARHGG водой доводят до метки) 1 мл рабочего стандарто а а содержит 20 мкг фосфора у ОР посуда Фотоэлектроколориметр; центрифуга; центрифужные пробирки; НЕО ПОНЕС нагревательный прибор; eye сикатор; термос сольдом у у Xon ны Кровь сразу после взятия осаждают равным объемом охлажденной 20% oil трихлоруксусной кислоты, перемеSTEREO ОЕНЕС К ЕР и помещают в термос со льдом Затем в лаборатории центрифугируют 20 мин при 2000 об/мин Центрифугат сливают в пробирки: он должен быть прозрачным (без: белковый фильтрат можно хранить в холодильнике в течение суток) ВУ Е центрифужные пробирки берут по 0,5 мл ненрифугата т АХ = See GEREN On Ti Fe OD cam реактива re фосфор, пе ТИ ta р стоять в течение 9 ч Центрифугируют mpi 1500. об/мни НИИ г т Фотометрию лучше проводить при длние волиы 436 им (фнолетовый светофильтр) в кювете 10 мм против контроля (2 мл диетиллированной водыды и 2 мл4 реактиваа а наKe фосфор)а В крайнем случае фотометрировать можно, используя синий светофильтр с максимумом пропускания 450—460 им ЕН PASH ROGEMAGE кривой. Берут 0.5: 10: 15 и 90 мл рабочего стандартного раствора, доводят объем до 2 мл дистиллированной водой, добавляют по 2 мл реактнва на фосфор, а далее поступают, как с испытуемыми растворами РасчетXSLpms CONSр CUE я WasSoaв ническогор irфосфорфосфора в крови! проводятoe
234
УВ ] ing Ром> 1000 ‚
где П — количество фосфора по калибровочному графику, мкг; 4 — разведение пробы крови; 100 — пересчет на 100 мл; 1000— пересчет мкг% в мг%.
МЕТОДЫ ОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ МОЧИ Исследованию мочи животных придается большое значение, тах a att) BEM ERS AIO ИЕgi ke CE OBCTE) tN SLT NOTIONS a te CTEM,ООЗУЖЫАЕОТНЫНЧЕИОжелудочно-кишечногоФУНКЦИЙтракта,мочеполовой,но и нарушенияСердечнообменаSeen)веществ,Cr $вязанныес a с‘ atнепра ныHae peneмлеBenen2М, ., 2 целью контроля Ще обменных процессов в организме fiat ie их веществ ДИН И ох тел, Села УрО т оч Zur утро i netanee 9 зуют свежесобранy On ee atten ЧИ (pH) Se ых on ut pee HHS р у В. mM Beas Bu WE сущи свои днапазоны колебания РН. мочи (у коров 7,7—8,6; телят 70 та лошадей 7,2—8,7; BOB 8—8, >; свиней 6,5 7,8). . сакция мочи у животных может быть более кислой при ацидо1, что может быть вызвано скармливанием больших количеств концентратов ни других кормов, реакция золы которых кислая. Имеются указания, что у животных с простым желудком скармливание большого количества кормов, содержащих щавелевую кислоry и ее соли (свекольная ботва, некоторые сорта свеклы и др.), способствует позиикиовению ацидоза и вызывает снижение рН мочи. У жилчных животных щавелевая кислота и ее соли под влиянием деятельности микрофлоры рубца всасываются в виде солей щелочных металлов. В результате последующего их расщепления создается избыток щелочей, выводимых с мочой, рН которой повышается. Аналогичные результаты могут быть получены при скармливании больших количеств силоса (поступление в организм большого количества кислот, особенно уксусной). Это может быть причиной ухудшения всасывания кальция. Несмотря на достаточное его количество в рационе, животным приходится давать кальциевую минеральную подкормку. При нормальной концентрации водородных ионов в моче и избытке кальция в рационе следует применять фосфорные полкормки, например фосфорно-натриевые соли. Реакцию мочи определяют сразу после взятия образца, так как при стоянии из-за образования карбоната аммония она ощелачивам р и а nat Оee ans мусовон оумагон. в J У ума , :- ной мочой, указывает на ее кислую реакцию, а посинение красной бумажкиА — изй шелочную.ь. Нейтральнаяity моча не меняет цвета ни си = ней, ии красной лакмусовой бумаги. В случае изменения цвета и красной, и синей бумажек— реакция мочи амфотерная. Лучше опто вы и, ато аа fan, ЭТОМ ун д д рную бумагу у. iC сравнивают полученную окраску с цветной шкалой, приложенной к poyвеличиие‘активнойpH.бумаге.Более Определенныйточно pH определяютцвет соответствуетс помощью рН-метра.определенной
235
