Анализ данных патоморфологического и гистологического исследований показывает, что заболевания телят с респираторным синдромом протекают однотипно, и дифференциация их практически невозможна вследствие смешанной этиологии. При гистологическом исследовании отмечали поражение легких в виде катаральной бронхопневмонии с разрастанием соединительной ткани вокруг сосудов и бронхов.
11. Диагностика
Диагностика респираторных и желудочно-кишечных инфекций животных является весьма трудоемким и требующим больших затрат времени мероприятием. Существуют две фазы в постановке диагноза на пневмонию: 1) наличие пневмонии; 2) ее природа. При определении типа пневмонии требуется установление как топического, так и этиологического диагноза. В случае долевой пневмонии топический диагноз может быть установлен при физикальном обследовании грудной клетки, но в общем уточнить его можно с помощью боковой рентгенограммы грудной клетки. Полное обследование включает как бактериоскопическое, так и бактериологическое исследование мокроты и мазков из глотки и гортани на бактерии (в том числе на микобактерии туберкулеза), вирусы, микоплазмы и риккетсии. Производится посев крови на вторичную микрофлору, проводятся серологические исследования и определяется лейкоцитоз.
Во многих ветеринарных учреждениях такой объем исследований невозможен. Посев крови дает положительный результат в 20 – 30 % тяжелых случаев пневмококковой пневмонии, а иногда и при других инфекционных агентах.
В то время как стрепто- и стафилококки высеваются относительно легко, другие микробы требуют особых условий. После любой предшествующей химиотерапии стрептококк может не дать роста, хотя и обнаруживается при микроскопии. Культивирование в атмосфере с добавлением 10% углекислоты повышает процент роста как стрептококка, так и других микробов.
12. Вакцинопрофилактика
Для профилактики парагриппа-3 применяют живые или убитые моно- и поливалентные вакцины. Живые вакцины создают иммунитет на 6 месяцев, убитые – на 2 – 4. В нашей стране созданы
живые моновакцины против ПГ-3 «Паравак» и ИРТ «ТК-А-ВИЭВ», однако специфическая профилактика с их помощью не привела к убедительным результатам (Buitcamp et al., 1978).
С учетом смешанной этиологии созданы бивалентные вакцины. В России используют вакцину против парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота «Бивак». В США применяют вакцину «Назалген», состоящую из антигенов вирусов парагриппа-3 и инфекционного ринотрахеита.
Полученные Martin (1983) результаты испытания этого препарата указывают на малую вероятность того, что иммунизация их значительно снизит общий уровень заболеваемости. Иммунизация телят бивалентной вакциной, состоящей из смеси живых аттенуированных вирусов парагриппа-3 и аденовирусов I серотипа, по сообщению Х. Хараламбиева (1977), привела к незначительному сокращению заболеваемости.
С учетом сложной этиологии респираторных болезней используются ассоциированные поливалентные вакцины, сочетающие 3, 4, 5 и 6 штаммов наиболее распространенных вирусов и бактерий. В Англии используется вакцина «Пневмовак+», содержащая ослабленные возбудители парагриппа-3, диареи, аденовирусной инфекции, инфекционного ринотрахеита, кроме того, две 3-валентные вакцины, имеющие в составе аденовирус 3-го типа и вирус парагриппа-3. В одну из них включен дополнительно реовирус, в другую – антиген хламидии. Польская вакцина “Серовитулифор” содержит 4 антигена наиболее встречающихся агентов. Применение ее сократило заболеваемость на 75%, а падеж – на 67% (Садиков, 1979).
Аналогичные поливалентные препараты созданы во всех странах с развитым интенсивным скотоводством. Почти все вакцины состоят из антигенов вируса парагриппа-3, диареи, инфекционного ринотрахеита. В состав их входят антигены бактерий, выделяемые при респираторных болезнях, особенно широко используются при этом штаммы возбудителя пастереллеза. Однако наблюдения Dodds (1983) показали отсутствие разницы в количестве заболевших и павших между привитыми поливакциной против парагриппа-3, инфекционного ринотрахеита, пастереллеза и Hemophylus somnus и невакцинированными телятами.
В Австрии для активной иммунизации откормочных телят успешно применяется инактивированная вакцина из антигенов возбудителей парагриппа-3, диареи, аденовирусов, реовирусов (Baumgartner et
al., 1979). Wunner (1976) отмечает, что после прививки 800 телят поливалентной вакциной против парагриппа-3, аденовирусной инфекции, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, реовируса типа I смертность снизилась на 0,25%, а заболевание у привитых животных протекало менее тяжело, чем у непривитых.
Иммуномодулирующая профилактика. С целью изучения влияния иммуномодулятора Т-активина на формирование иммунитета на модели парагриппозной инфекции был проведен опыт на 64 телятах симментальской породы 25–30-дневного возраста. В опытах использовали Т-активин – препарат, полученный из тимуса крупного рогатого скота, представляющий собой смесь полипептидов с молекулярной массой от 1500 до 6000 дальтон производства Покровской биофабрики.
Животные были разделены на 4 равные группы. Телятам первой группы вводили Т-активин 1 раз в день и 3 дня подряд в дозе 1 мл подкожно в область шеи. Животным второй группы вводили только вакцину против парагриппа-3 «Паравак» в дозе 2 мл интраназально, двукратно. Третьей группе телят – вакцину «Паравак» в комплексе с Т-активином, четвертая группа была интактной (контроль). За телятами вели клиническое наблюдение с ежедневным измерением температуры тела в течение 10 дней. Оценку влияния препаратов проводили по количеству заболевших животных, тяжести течения болезни. Учитывали динамику иммуноглобулинов, гематологических показателей и титров антител к вирусу парагриппа-3. Для гематологического и иммунобиохимического исследований у животных отбирали пробы крови до введения и через 10, 20, 40, 60 и 180 дней после введения препаратов (табл. 16).
Таблица 16
Изменение гематологических показателей организма телят при введении Т-активина и вакцины «Паравак», n =42
| Группа телят | Дни после введения | Показатели | ||
|---|---|---|---|---|
| Гемоглобин, г/л | Эритроциты, млн. | Лейкоциты, тысяч | ||
| 1. Т-активин | Исходные | 90,3±3,1 | 5,41±0,2 | 7,12±0,4 |
| 10 дней | 95,5±2,6 | 5,74±0,2 | 7,16±0,5 | |
| 2. Паравак | Исходные | 89,2±3,1 | 6,02±1,0 | 8,42±1,6 |
| 10 дней | 93,4±8,2 | 6,04±0,7 | 8,84±2,1 | |
| 3.Т-активин+Паравак | Исходные | 90,3±6,5 | 5,57±1,1 | 7,48±1,8 |
| 10 дней | 94,5±3,7 | 6,04±0,9 | 7,62±0,8 | |
| 4. Контроль | Исходные | 88,9±4,3 | 5,45±0,7 | 7,95±1,3 |
| 10 дней | 90,3±6,5 | 5,59±0,7 | 8,20±1,4 | |
Применение Т-активина и вакцины как раздельно, так и сочетанно не вызвало осложнений. Клиническое наблюдение за подопытными животными показало, что у отдельных телят обеих групп было отмечено кратковременное повышение температуры тела на 0,3 – 0,7° и серозные выделения из носовой полости. Разница между гематологическими показателями характеризовалась низкой достоверностью.
Интенсивность прироста массы тела в различных группах телят была разной. Как видно из данных таблицы, в течение опыта прирост составил в первой группе – 0,69±0,08 кг, во второй – 0,61±0,07 кг, в третьей – 0,89±0,08 кг, в контроле – 0,37±0,05 кг. Наибольший прирост массы отмечался в группе телят при сочетанном применении вакцины и иммуномодулятора. Результаты взвешивания представлены в таблице 17.
Таблица 17
Прирост массы телят в зависимости от иммуномодуляции
| № группы | Препарат | Среднесут. прирост, кг |
|---|---|---|
| 1 | Т-активин | 0,69±0,03 |
| 2 | Вакцина Паравак | 0,61±0,07 |
| 3 | Т-активин+Паравак | 0,89±0,08 |
| 4 | Контроль | 0,37±0,05 |
| Р < 0,001 |
При изучении влияния Т-активина и вакцины на специфический иммунитет к возбудителю парагриппа-3 животные были разделены на группы в зависимости от исходного уровня антител: более и менее 3,0 lg. Это было необходимо в связи с персистентным наличием антител к вирусу ПГ-3 как у здоровых, так и у клинически больных животных (табл. 18).
При этом у телят с начальным уровнем антигемагглютининов, превышающим 3,0 lg, при раздельном введении Т-активина титры антител через 10 дней после введения составили 2,8, через 20 дней – 5,0 и через 40 дней – 5,8 lg. В другой группе телят с исходным показателем менее 3,0 lg титры изменялись соответственно от 2,3 до 1,0; 4,8 и 5,2 lg. У вакцинированных телят с высокими исходными титрами уровень антител увеличился с 4,6 до 5,0 lg на 20-й день после введения. При исходных данных менее 3,0 lg вакцинация вызывала резкий подъем уровня антител до 5,6 lg на 20-й день после введения и дальнейшее снижение.
Таблица 18
Уровень антител к вирусу ПГ-3
в зависимости от исходного иммунного статуса, log2
| Препарат | Уровень антител | Ср. исход. титр | Дни после введения | ||
|---|---|---|---|---|---|
| 10 | 20 | 40 | |||
| Т-активин | >3,0 | 3,5±0,7 | 2,8±0,4 | 5,0±0,9 | 5,8±0,8 |
| <3,0 | 2,3±0,3 | 1,0±0,2 | 4,8±0,6 | 5,2±0,7 | |
| общий | 2,6±0,4 | 1,6±0,1 | 4,9±0,4 | 5,5±0,3 | |
| Паравак | >3,0 | 4,6±0,4 | 4,2±0,2 | 5,0±0,2 | 3,6±0,3 |
| <3,0 | 1,0±0,1 | 1,4±0,2 | 5,6±0,4 | 4,0±0,5 | |
| общий | 2,2±0,6 | 2,4±0,5 | 5,4±0,2 | 3,8±0,6 | |
| Т-активин+ Паравак | >3,0 | 3,6±0,4 | 1,2±0,3 | 6,0±0,8 | 3,0±0,2 |
| <3,0 | 1,6±0,1 | 0,9±0,1 | 5,6±0,7 | 2,5±0,3 | |
| общий | 2,1±0,3 | 1,0±0,2 | 5,8±0,6 | 2,7±0,2 | |
| Контроль | >3,0 | 3,2±0,5 | 1,3±0,4 | 2,8±0,3 | 3,0±0,7 |
| <3,0 | 2,0±0,3 | 0,8±0,1 | 2,6±0,1 | 1,2±0,1 | |
| общий | 2,2±0,3 | 1,0±0,1 | 2,4±0,5 | 2,0±0,2 | |
При совместном применении препаратов происходило повышение титров антител в обеих группах до 6,0 и 5,6 lg через 20 дней после введения. У контрольных телят отмечали постепенное понижение содержания антител в сыворотке крови, изменения были менее выраженными по сравнению с телятами опытных групп. Общий уровень антител при 3-кратном введении Т-активина значительно снизился и составил через 10 дней 1,6, через следующие 10 дней резко возрос до 4,9 lg.
В дальнейшем уровень их продолжал увеличиваться и равнялся 5,5 lg на 40-й день после введения. У всех привитых вакциной «Паравак» животных титры антител в РТГА незначительно поднялись (от 2,2 до 2,4 lg). Затем рост антител был более интенсивным и на 20-й день после введения составил 5,4 lg, а через 40 дней отмечалось снижение количества их до 3,8 lg. В 3-й группе при сочетанном применении Т-активина и вакцины общий уровень парагриппозных антител через 10 дней снизился с 2,1 до 1,0, а затем повысился до 5,8 и к концу уменьшился до 2,7 lg. В контрольной группе телят отмечались аналогичные изменения в общем иммунном ответе, однако колебания уровня антител у них были менее выраженными. Различия между 1, 2, 3-й и контрольной группами статистически достоверны (Р<0,001).
Изучение динамики белковых фракций сыворотки крови при введении животным иммуномодуляторов и вакцины представляет определенный интерес. При электрофорезе сыворотки крови телят,
обработанных Т-активином и вакциной, получены результаты, представленные в таблице 19.
Таблица 19
Влияние Т-активина и вакцины «Паравак» на белковый состав сыворотки крови телят, г/л
| Препарат | Показатель | Сроки исследования, дней | |||
|---|---|---|---|---|---|
| Исходные | 10 | 20 | 40 | ||
| Т-активин | Альбумины | 21,9±0,9 | 20,5±1,5 | 16,7+2,8 | 20,3±0,3 |
| α -глобулины | 14,3±2,5 | 14,4±2,5 | 19,9±0,7 | 19,0±0,8 | |
| β -глобулины | 12,3±0,7 | 7,7±0,4 | 9,8±2,5 | 14,7 ±0,5 | |
| γ -глобулины | 17,0±1,0 | 16,7±1,0 | 16,6±1,8 | 18,8±1,1 | |
| Паравак | Альбумины | 22,3±1,3 | 22,4±0,7 | 21,3±1,5 | 22,5±1,2 |
| α-глобулины | 12,3±0,7 | 14,3±0,8 | 14,5±0,7 | 19,0±0,8 | |
| β-глобулины | 8,2±1,0 | 10,3±0,9 | 9,9±0,7 | 15,2±1,0 | |
| γ-глобулины | 16,3±1,1 | 16,7±1,0 | 18,6±2,2 | 19,0±1,0 | |
| Т-активин+ паравак | Альбумины | 21,0±5,6 | 21,5±2,3 | 20,8±2,1 | 19,2±3,6 |
| α-глобулины | 12,4±3,7 | 11,2±1,3 | 16,4±2,9 | 12,5±1,7 | |
| β-глобулины | 8,2±1,8 | 9,8±2,1 | 9,2±1,9 | 10,9±2,5 | |
| γ- глобулины | 16,2±2,4 | 16,4±1,4 | 19,6±1,5 | 20,6±1,4 | |
| Контроль | Альбумины | 20,2±1,3 | 19,7±2,6 | 22,2±4,2 | 18,3±1,1 |
| α-глобулины | 12,0±0,9 | 13,7±1,8 | 11,6±1,6 | 11,2±1,2 | |
| β-глобулины | 9,6±0,1 | 7,7±0,4 | 10,7±1,2 | 11,6±1,3 | |
| γ-глобулины | 18,0±0,6 | 17,0±2,0 | 16,8±1,8 | 17,1±4,5 | |
Из таблицы видно, что при введении одной вакцины отмечается незначительное повышение альбуминов, тогда как содержание - и α b- глобулинов резко возрастало. При этом уровень β -глобулинов поднялся с 16,3±1,1 до 19,0±1,0 г/л. При совместном введении вакцины «Паравак» и Т-активина наблюдали снижение уровня альбуминов, возрастание α - глобулинов на 20-й день, -глобулинов и - β γ глобулинов на 40-й день.
Альбумины сыворотки крови поддерживают постоянство объема плазмы благодаря созданию осмотического эффекта. Транспортная функция их заключается в обратимом соединении с молекулами многих веществ и лекарств. Особенно прочно они связывают молекулы, содержащие катионную или анионную группу с неполярным остатком.
Гамма-глобулины являются большей частью специфическими антителами к различным возбудителям. Образование агрегатов «антиген – антитело» обычно сопровождается последовательным осаждением на них альфа- и бетаглобулинов, которые все вместе образу-
