al., 1979). Wunner (1976) отмечает, что после прививки 800 телят поливалентной вакциной против парагриппа-3, аденовирусной инфекции, инфекционного ринотрахеита, вирусной диареи, реовируса типа I смертность снизилась на 0,25%, а заболевание у привитых животных протекало менее тяжело, чем у непривитых.
Иммуномодулирующая профилактика. С целью изучения влияния иммуномодулятора Т-активина на формирование иммунитета на модели парагриппозной инфекции был проведен опыт на 64 телятах симментальской породы 25–30-дневного возраста. В опытах использовали Т-активин – препарат, полученный из тимуса крупного рогатого скота, представляющий собой смесь полипептидов с молекулярной массой от 1500 до 6000 дальтон производства Покровской биофабрики.
Животные были разделены на 4 равные группы. Телятам первой группы вводили Т-активин 1 раз в день и 3 дня подряд в дозе 1 мл подкожно в область шеи. Животным второй группы вводили только вакцину против парагриппа-3 «Паравак» в дозе 2 мл интраназально, двукратно. Третьей группе телят – вакцину «Паравак» в комплексе с Т-активином, четвертая группа была интактной (контроль). За телятами вели клиническое наблюдение с ежедневным измерением температуры тела в течение 10 дней. Оценку влияния препаратов проводили по количеству заболевших животных, тяжести течения болезни. Учитывали динамику иммуноглобулинов, гематологических показателей и титров антител к вирусу парагриппа-3. Для гематологического и иммунобиохимического исследований у животных отбирали пробы крови до введения и через 10, 20, 40, 60 и 180 дней после введения препаратов (табл. 16).
Таблица 16
Изменение гематологических показателей организма телят при введении Т-активина и вакцины «Паравак», n =42
| Группа телят | Дни после введения | Показатели | ||
|---|---|---|---|---|
| Гемоглобин, г/л | Эритроциты, млн. | Лейкоциты, тысяч | ||
| 1. Т-активин | Исходные | 90,3±3,1 | 5,41±0,2 | 7,12±0,4 |
| 10 дней | 95,5±2,6 | 5,74±0,2 | 7,16±0,5 | |
| 2. Паравак | Исходные | 89,2±3,1 | 6,02±1,0 | 8,42±1,6 |
| 10 дней | 93,4±8,2 | 6,04±0,7 | 8,84±2,1 | |
| 3.Т-активин+Паравак | Исходные | 90,3±6,5 | 5,57±1,1 | 7,48±1,8 |
| 10 дней | 94,5±3,7 | 6,04±0,9 | 7,62±0,8 | |
| 4. Контроль | Исходные | 88,9±4,3 | 5,45±0,7 | 7,95±1,3 |
| 10 дней | 90,3±6,5 | 5,59±0,7 | 8,20±1,4 | |
Применение Т-активина и вакцины как раздельно, так и сочетанно не вызвало осложнений. Клиническое наблюдение за подопытными животными показало, что у отдельных телят обеих групп было отмечено кратковременное повышение температуры тела на 0,3 – 0,7° и серозные выделения из носовой полости. Разница между гематологическими показателями характеризовалась низкой достоверностью.
Интенсивность прироста массы тела в различных группах телят была разной. Как видно из данных таблицы, в течение опыта прирост составил в первой группе – 0,69±0,08 кг, во второй – 0,61±0,07 кг, в третьей – 0,89±0,08 кг, в контроле – 0,37±0,05 кг. Наибольший прирост массы отмечался в группе телят при сочетанном применении вакцины и иммуномодулятора. Результаты взвешивания представлены в таблице 17.
Таблица 17
Прирост массы телят в зависимости от иммуномодуляции
| № группы | Препарат | Среднесут. прирост, кг |
|---|---|---|
| 1 | Т-активин | 0,69±0,03 |
| 2 | Вакцина Паравак | 0,61±0,07 |
| 3 | Т-активин+Паравак | 0,89±0,08 |
| 4 | Контроль | 0,37±0,05 |
| Р < 0,001 |
При изучении влияния Т-активина и вакцины на специфический иммунитет к возбудителю парагриппа-3 животные были разделены на группы в зависимости от исходного уровня антител: более и менее 3,0 lg. Это было необходимо в связи с персистентным наличием антител к вирусу ПГ-3 как у здоровых, так и у клинически больных животных (табл. 18).
При этом у телят с начальным уровнем антигемагглютининов, превышающим 3,0 lg, при раздельном введении Т-активина титры антител через 10 дней после введения составили 2,8, через 20 дней – 5,0 и через 40 дней – 5,8 lg. В другой группе телят с исходным показателем менее 3,0 lg титры изменялись соответственно от 2,3 до 1,0; 4,8 и 5,2 lg. У вакцинированных телят с высокими исходными титрами уровень антител увеличился с 4,6 до 5,0 lg на 20-й день после введения. При исходных данных менее 3,0 lg вакцинация вызывала резкий подъем уровня антител до 5,6 lg на 20-й день после введения и дальнейшее снижение.
Таблица 18
Уровень антител к вирусу ПГ-3
в зависимости от исходного иммунного статуса, log2
| Препарат | Уровень антител | Ср. исход. титр | Дни после введения | ||
|---|---|---|---|---|---|
| 10 | 20 | 40 | |||
| Т-активин | >3,0 | 3,5±0,7 | 2,8±0,4 | 5,0±0,9 | 5,8±0,8 |
| <3,0 | 2,3±0,3 | 1,0±0,2 | 4,8±0,6 | 5,2±0,7 | |
| общий | 2,6±0,4 | 1,6±0,1 | 4,9±0,4 | 5,5±0,3 | |
| Паравак | >3,0 | 4,6±0,4 | 4,2±0,2 | 5,0±0,2 | 3,6±0,3 |
| <3,0 | 1,0±0,1 | 1,4±0,2 | 5,6±0,4 | 4,0±0,5 | |
| общий | 2,2±0,6 | 2,4±0,5 | 5,4±0,2 | 3,8±0,6 | |
| Т-активин+ Паравак | >3,0 | 3,6±0,4 | 1,2±0,3 | 6,0±0,8 | 3,0±0,2 |
| <3,0 | 1,6±0,1 | 0,9±0,1 | 5,6±0,7 | 2,5±0,3 | |
| общий | 2,1±0,3 | 1,0±0,2 | 5,8±0,6 | 2,7±0,2 | |
| Контроль | >3,0 | 3,2±0,5 | 1,3±0,4 | 2,8±0,3 | 3,0±0,7 |
| <3,0 | 2,0±0,3 | 0,8±0,1 | 2,6±0,1 | 1,2±0,1 | |
| общий | 2,2±0,3 | 1,0±0,1 | 2,4±0,5 | 2,0±0,2 | |
При совместном применении препаратов происходило повышение титров антител в обеих группах до 6,0 и 5,6 lg через 20 дней после введения. У контрольных телят отмечали постепенное понижение содержания антител в сыворотке крови, изменения были менее выраженными по сравнению с телятами опытных групп. Общий уровень антител при 3-кратном введении Т-активина значительно снизился и составил через 10 дней 1,6, через следующие 10 дней резко возрос до 4,9 lg.
В дальнейшем уровень их продолжал увеличиваться и равнялся 5,5 lg на 40-й день после введения. У всех привитых вакциной «Паравак» животных титры антител в РТГА незначительно поднялись (от 2,2 до 2,4 lg). Затем рост антител был более интенсивным и на 20-й день после введения составил 5,4 lg, а через 40 дней отмечалось снижение количества их до 3,8 lg. В 3-й группе при сочетанном применении Т-активина и вакцины общий уровень парагриппозных антител через 10 дней снизился с 2,1 до 1,0, а затем повысился до 5,8 и к концу уменьшился до 2,7 lg. В контрольной группе телят отмечались аналогичные изменения в общем иммунном ответе, однако колебания уровня антител у них были менее выраженными. Различия между 1, 2, 3-й и контрольной группами статистически достоверны (Р<0,001).
Изучение динамики белковых фракций сыворотки крови при введении животным иммуномодуляторов и вакцины представляет определенный интерес. При электрофорезе сыворотки крови телят,
обработанных Т-активином и вакциной, получены результаты, представленные в таблице 19.
Таблица 19
Влияние Т-активина и вакцины «Паравак» на белковый состав сыворотки крови телят, г/л
| Препарат | Показатель | Сроки исследования, дней | |||
|---|---|---|---|---|---|
| Исходные | 10 | 20 | 40 | ||
| Т-активин | Альбумины | 21,9±0,9 | 20,5±1,5 | 16,7+2,8 | 20,3±0,3 |
| α -глобулины | 14,3±2,5 | 14,4±2,5 | 19,9±0,7 | 19,0±0,8 | |
| β -глобулины | 12,3±0,7 | 7,7±0,4 | 9,8±2,5 | 14,7 ±0,5 | |
| γ -глобулины | 17,0±1,0 | 16,7±1,0 | 16,6±1,8 | 18,8±1,1 | |
| Паравак | Альбумины | 22,3±1,3 | 22,4±0,7 | 21,3±1,5 | 22,5±1,2 |
| α-глобулины | 12,3±0,7 | 14,3±0,8 | 14,5±0,7 | 19,0±0,8 | |
| β-глобулины | 8,2±1,0 | 10,3±0,9 | 9,9±0,7 | 15,2±1,0 | |
| γ-глобулины | 16,3±1,1 | 16,7±1,0 | 18,6±2,2 | 19,0±1,0 | |
| Т-активин+ паравак | Альбумины | 21,0±5,6 | 21,5±2,3 | 20,8±2,1 | 19,2±3,6 |
| α-глобулины | 12,4±3,7 | 11,2±1,3 | 16,4±2,9 | 12,5±1,7 | |
| β-глобулины | 8,2±1,8 | 9,8±2,1 | 9,2±1,9 | 10,9±2,5 | |
| γ- глобулины | 16,2±2,4 | 16,4±1,4 | 19,6±1,5 | 20,6±1,4 | |
| Контроль | Альбумины | 20,2±1,3 | 19,7±2,6 | 22,2±4,2 | 18,3±1,1 |
| α-глобулины | 12,0±0,9 | 13,7±1,8 | 11,6±1,6 | 11,2±1,2 | |
| β-глобулины | 9,6±0,1 | 7,7±0,4 | 10,7±1,2 | 11,6±1,3 | |
| γ-глобулины | 18,0±0,6 | 17,0±2,0 | 16,8±1,8 | 17,1±4,5 | |
Из таблицы видно, что при введении одной вакцины отмечается незначительное повышение альбуминов, тогда как содержание - и α b- глобулинов резко возрастало. При этом уровень β -глобулинов поднялся с 16,3±1,1 до 19,0±1,0 г/л. При совместном введении вакцины «Паравак» и Т-активина наблюдали снижение уровня альбуминов, возрастание α - глобулинов на 20-й день, -глобулинов и - β γ глобулинов на 40-й день.
Альбумины сыворотки крови поддерживают постоянство объема плазмы благодаря созданию осмотического эффекта. Транспортная функция их заключается в обратимом соединении с молекулами многих веществ и лекарств. Особенно прочно они связывают молекулы, содержащие катионную или анионную группу с неполярным остатком.
Гамма-глобулины являются большей частью специфическими антителами к различным возбудителям. Образование агрегатов «антиген – антитело» обычно сопровождается последовательным осаждением на них альфа- и бетаглобулинов, которые все вместе образу-
ют комплемент. Активация комплемента включает каскад защитновосстановительных процессов в организме, составляющих воспалительную реакцию организма. Поскольку комплементарная активность сыворотки крови находится в прямой зависимости от альфа- и бетаглобулинов, можно считать, что уровень неспецифической иммунологической реактивности также повышается при применении препаратов.
При электрофорезе сывороток телят в агарозном носителе фракция -глобулинов четко подразделяется на 2 подфракции, которые в γ соответствии с номенклатурой иммуноглобулинов следует считать подклассами IgG1 и IgG2, составляющими большую часть всех (90 – 95%) иммуноглобулинов сыворотки крови. Нами изучена динамика этих подклассов иммуноглобулинов у телят при введении препаратов (табл. 20).
Таблица 20
Динамика подклассов иммуноглобулина G при иммуномодуляции, г/л
| Группа | Под- класс | Исходные данные | Дни после введения | ||
|---|---|---|---|---|---|
| 10 | 20 | 40 | |||
| Т-активин | G1 | 14,6±1,50 | 14,42±1,82 | 14,32±1,43 | 17,02±0,73 |
| G2 | 2,34±0,15 | 2,28±0,61 | 2,18±0,62 | 2,78±0,21 | |
| Вакцина | G1 | 14,06±2,31 | 14,22±1,06 | 16,04±2,07 | 16,33±3,87 |
| G2 | 2,24±0,40 | 2,38±0,27 | 2,56±0,44 | 2,67±0,54 | |
| Т-активин+ вакцина | G1 | 13,97±2,34 | 14,16±1,30 | 16,90±2,67 | 17,71±3,55 |
| G2 | 2,23±0,34 | 2,24±0,55 | 2,75±0,28 | 2,89±0,48 | |
| Контроль | G1 | 15,52±1,07 | 14,68±1,10 | 14,49±2,91 | 14,70±1,51 |
| G2 | 2,48±0,45 | 2,32±0,35 | 2,31±0,85 | 2,40±0,26 | |
Как видно из таблицы, уровень иммуноглобулинов IgG1 и IgG2 у обработанных раздельно Т-активином телят постепенно снижался, а затем резко повысился и составил на 40-й день после введения 17,02 ±0,73 и 2,78±0,21 г/л соответственно. У привитых вакциной «Паравак» телят отмечали повышение уровня их с 14,06±2,31 до 16,33±3,87 г/л. При сочетанном применении препаратов повышение их было более выраженным и составило через 40 дней после введения 17,71±3,55 и 2,89±0,48 г/л соответственно. В контрольной группе отмечалось незначительное снижение иммуноглобулинов обоих подклассов.
На рисунках 3 и 4 представлена динамика подклассов иммуноглобулинов у телят в зависимости от введения препаратов. Полученные данные по определению общего белка и фракций сыворотки крови, основного и наиболее многочисленного класса иммуноглобулинов и его подклассов у телят при иммунизации их вакциной «Паравак» и иммуномодулятором Т-активином свидетельствуют о значительной иммунобиологической перестройке организма животных.
г/л
18 IgG1
Т-активин
17,5
17 вакцина
16,5 Т-активин+паравак
16 контроль
15,5
15
14,5
14
13,5
13
1 10 20 40
дни
г/л
3
2,9 Т-активин IgG2
2,8 вакцина
Т-активин±вакцина
2,7
контроль
2,6
2,5
2,4
2,3
2,2
2,1
2
1 10 20 40
дни опыта
Рис. 4. Изменение уровня иммуноглобулинов G2 в сыворотке крови телят
