Определение гигроскопической воды
содержитИсследусмыйнекотороекорм,количествоприведенныйводы, вназываемойвоздушио-сухоегнгроскопическойсостояние, влагой. Олределяют ee, высущивая навеску корма в термостате при температуре 100—105°С до постоянного веса. При высушиванни происходят в основном следующие процессы: Удаляются гигроскопическая вода, летучие вещества эфирных масел, углекислота, летучие кислоты, аммиак и др., вследствие окисления поглощается кислород, Потеря летучих веществ, поглощение кислорода и другие процессы могут быть причиной неточностей получающихся данных. БоЛес точные релультаты можно получить, высушивая исследуемый корм в струе нидифферентного газа или в вакуум-аппарате. Приборы и посуда. Аналитические весы с разновесами; TePMOCTAT нли сушильный шкаф; бюксы— сушильные стаканчики © притортыми крынками (они должны быть пронумерованы); ложка ge rtd кормов; эксикатор._ Ao определения. Блюксы высушивают в термостате в теклалутчение 30-—40па реброmauв пристаканчик.температуреЗатем бюксы100—105°закрываютС. При этоми ставяткрышкудля aa а a Е олени бокс взвешивают на крыванani крышкой их,и павошивают.weenie 2—iПо ра areоздушио-сухсв И аома, зананеску, изятую для анализа. о НЫ c HABCERGH (крышки положить на ребро) помещают в р и ат ил 2,5—3 ч при температуре 100—105°С. Затем их за1 Е крырков, вынимают и старят в эксикатор,. охлаждают, пзвешивают и снова помещают Ha | ч в термостат, после охлажмы hie ИИ, Гак поступают до тех пор; пока разЕн я м «лующих друг за лругом высушиваний не будет npe" Maori У и HOGG, F тЫ и Ribs ослелующих извешиваниях отмечается увеличение ут те ply nes ean HEE he прекращают и для расчетов беи aoe Td eee ВА нспарившейся воды находят по разneil ОВ b zy Spates с кормом до высушивания и наименьа сле высушивания. os роцент гигроскопнческой воды (x, %) находят по формуле: м.100 х, ==, My
Me и масса нспаришшейся воды из навески, г; м, — масса корма в позлушно-сухом состояини, г; 100 — коэффициент для пересчета в проценты.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ СЫРОГО ПРОТЕИНА В КОРМАХ Определение азота по Кьельдалю
Содержание сырого протеина в кормах с учегом его о лотного состава— очевь важный показатель оценки питательной иепности кормов. Сырой протеин состонт из белковых и небелковых азотистых сосдинений. Небелковые объединены под названием амидов. К ним
: 153
относятся нитраты, аммиачные соли, свободные аминокислоты и их соли, амиды аминокислот, содержащие азот, глюкозиды, оргайические основания. _ Приборы, реактивы, оборудование. Колбы Кьельдаля на 250 и 500—700 мл; колбы конические или обычные; установки в шкафу для сжигания ло Кьельдалю; прибор для отгона азота по Кьельдалю; колбонагреватели или другой источник натрева; каплеуловители; конические колбы на 300—400 мл; бюретки на 50—25 мл; пилиндры на 25 и 100 мл; склянки для коицентрироваипых кислоты ин щелочи; концентрированная серная кислота (удельный вес 1,81 1,82); катализаторы (сернокислая медь и серпускаетсяпокиелый калийтехническая)пли смесь33—40%;этих солейпемзас селеном);порошкообразнаяедкая щелочьили гра-(донулировапная (стеклянные или фарфоровые трубочки); лакмусовая бумага (красная); дистиллированная вода; 2%-пый раствор борной кислоты; 0,1 н, раствор соляной кислоты; смешанный индикатор (индикатор Ташира). Принцип метода. Определение сырого протеина основано на определении азота как характерного элемента для бедка, Для получения азота органическое вещество сжнгается при воздействии концентрированной серной кислоты (удельный вес 1,84), Серная кислота при подогревании разрушает углеводы и жиры до углекислого, газа и воды, которые улетучиваются, а белки распадаются до аммнака, образующего с серной кислотой нелетучую соль (сернокислый аммоний) по следующему: ‘уравнению: р 2NHg-Е 2Н,5$0, _= (Ny)ant SOq-в : Затем Ha соль серпокиелого аммония действуют 33%-ной щелочью (NaOH), при этом снова выделяется аммнак по уравнению: (МН)),501 -- 2NaOH = Ма,30, + 2NH,OH. Выделяющийся аммиак поглощается 0,1 н. Нз5 Ох. Избыток серной кислоты титруют 0,1 н, NaOH, По количеству связанной серной кислоты определяют колнчество азота, бывшего в корме, зная, что образует1 мл 0,1 н.6,25Н.50О.г белкасоответствуетили сырого0,0014протеина.г азота, На1 г основанииазотав среднемэтих данных находим процентное содержание сырого протеина в корме. Вместо 0,1 и. HySO, используют также 2%-ный раствор борной кислоты (в приемпик набирают 20—25 мл). После отгона аммиака содержимое приемной колбы титруют 0,1 н. соляной кислотой в присутствии 6—8 капель смешанного ипдикатора. Соляная кислота Bbly тесняет борную кислоту из солей н соединяется с нонами аммония, образуя хлористый аммоний. Конец реакции характеризуется рез“ ким сдвигом рН в кислую сторону (5,5). Протеин, определяемый по методу Кьельдаля, называется сырым потому, что определяется He только белковый азот, но и азот амннокислот и их амидов, азот солей азотной и азотистой кислот. Ход определения. Озоление органического вещест“ ва Насыпав в цилиндр 0,3—0,5 г исследуемого корма, взвешивают его и записывают вес. Содержимое цилнидрика аккуратно высыпаот в колбу Кьельдаля, опустив его глубоко в горло колбы. По разности веса цилиндрика с кормом и пустого цилиндрика определяют хавеску корма. й a В колбу Кьельдаля осторожно наливают 10—15 мл кониентрированной серной кислоты, аккуратно перемешивают содержимое 154
(при этом происходит обугливание вещества), добавляют катализаторы: 0,5—1 г Си5Ох- 5Н2О и 3—5 г К„50. или специальную смесь из этихСжиганиесолей с селеорга н ическогоом (0,2—0,5веществаг). проводится до получения светлого раствора (во избежание потерь азота сжигают на слабом огне). Во время сжигания следует часто помешивать содержимое колбы, чтобы на ее стенках не оставалось несгоревших частиц. После просветления жидкости колбу охлаждают, а затем осторожно приливают 100—150 мл дистиллированной воды. Жидкость становится зеленовато-голубоватой (медный купорос поглощает воду и восстанавливает голубой цвет). nanaПолученныйемкостью 500—700| a мл.целикомЕе несколькопереносятразв другуюсмываютколбуводой,Кьель-сливая волу п большую колбу Кьельдаля. ' Колбу с раствором ставят на колбонагреватель отгоночного аипарата Кьельдаля, предварительно подобрав хорошую пробку. Отгон аммиака в серную кислоту. В коническую колбу берут из бюретки 20—50 мл 0,1 н. Н›5О; н 1—3 капли индикатора коигорот. Колбу затем ставят в аппарат Кьельдаля, опустив стеклянi трубку в Н2$О4. Отмернвают осторожно 60—70 мл 33% -ного вОН в цилиндр, а затем аккуратно переносят в колбу Кьельдаля. На кончике ложки добавляют в колбу кусочки пемзы, фарфора или фарфоровые трубочки (это необходимо для спокойного равномерного кипения). Плотно закрывают колбу пробкой с каплеуловиTone и ен, размешивают ее содержимое. ром (выделяющийсяключают кол эонагревательаммнак поглощаетсяи отгоняют0,1аммиакн. сернойс водянымОИ),паКонец отгона аммиака определяют по красной лакмусовой бумажке, подставленной под стекающую каплю отгона. Если лакмус не cHя аммиака окончен. Отгон при хорошем кипении длится По окончании перегона трубочки промывают дважды дистиллироваинон водой, сливая ее в приемную колбу. Затем оттитровывают содержимое колбы (избыток взятой 0,1 и. HySO4) 0,1 н. NaOH. Процент азота вычисляют по формуле:aie ри x=——, b
: |
в где х — искомый процент азота; @ — количество азота в навеске, г; b напеска вещества, г. J Для Вычисления процента сырого протенна полученный процент ed умиожают Wa 6,25. р о тгон аммиака в борную кислоту. Макрометод. Вместо рас^ TEARS 0,1 n. Н50; можно пользоваться 2%-ным раствором борной кислоты (в приемник набирают 20—25 мл). После отгона аммиака содержимое приемной колбы титруют 0,1 н. HCI в присутствии 6— 8 капель смешанного индикатора (0,02 г метилового красного растворяют в 60 мл этилового спирта, затем добавляют 40 мл воды). pose этого 0,1 г метнлового синего растворяют в 100 мл воды. ь SPS работой смешивают 25 мл метилового красного и 3 мл меeee синего. Изумрудно-зеленый цвет содержимого колбы при. а соляной кислотой в присутствии смешанного индикатора Hee дит в красно-фполетовый при pH 5,5; 1 мл Он. раствора ‚ пошедшей на титрование, соответствует 0,0014 г азота.
