твора: 25 г молибденовокислого аммония растворяют в 300 мл дистиллированной воды и фильтруют; в другой колбе к 125 мл диетиллированной воды приливают 75 мл концентрированной серной кислоты; оба раствора смешивают, охлаждают и доводят объем до 500 мл дистиллированной водой). 20%-ный раствор сульфита натрия (готовят из сухой безводной соли на 7—10 дней, хранят в хорошо закрытой склянке). ной серной14-ныйкислоты).раствор гидрохнюона (водный+1 капля кондентрированСодово-серниетый раствор (для ero приготовления берут 20 мл 20%-ного раствора сульфита иатрия ин соединяют со 100 мл 20%мого раствора углекислого патрия, перед употреблением фильтруют; так как раствор ие стоек, его готовят в небольшом количестве). Сернистокислый натрий и углекислый натрий готовят из сухих безводных солей раздельно. Смешивают перед работой в нужном ко: личестве. 0,50%-ный амидол (на 5%-ном растпоре сульфита натрия). Посуда: мерные колбы na 100 мл; мерные пипетки на 1, 2, 5 и 10 мл; бюретки па 25 и 50 мл. Оборудование. Фотоэлектроколориметры или визуальный колор иметр.x д определения. Берут мерные колбы na 100 мл. В колбочки, предназначенные для стандартных растворов фосфора, из пипетки’ наливают по 2 мл, Би 10 мл рабочего раствора фосфора (0,02, 0,05, 0,10 мг фосфора); Для приготовления «нулевого раствора» в две колбочки берут по 50 мл дистиллированной воды. В колбочки для испытуемых проб кормов приливают раствор золы (табл. 42). Во все колбы до половины объема добавляют дистиллированную воду и по 2,5 мл раствора молибденовокиелого аммония; раствор в колбах перемешивают. Через 5 мин вносят по 2,5 мл раствора сульфита натрия. Растворы смешивают и через 10 мин добавляют по 2 мл раствора гндрохинона. Снова тщательно перемешивают. Доводят объем в колбах до 100 мл, тщательно перемеоставляют На оч, Проводят колориметрию растворов, окрашенных в синий (голу бой) цвет, Сравнение интенсивности окраски испытуемого и стандартного растворов проводят в колориметре типа Дюбоска или в фотоколориметрах марок ФЭК-М, ФЭК-Ни др. Вместо раствора сульфита натрия можио использовать содовосернистый раствор, который осторожно по стенке приливают в колбочки (по 5 мл) после раствора тидрохинона. Содержимое колбочек перемешивают осторожно несколько раз до прекращения вспенивания раствора. изре и0,5%-ногоВместо сульфитаираствора(понатрияамидола,2,5 мл)и гидрохинонаrataприготовленногиспользоваиинисп о льзуютпа содово-сернисто-5%-помтакжера с месьтвого раствора или амидола колориметрию окрашенных растворов можно проводить через 60 мин). Содержание фосфора в корме при сжигании методом сухого озоления и использовании колориметра тина Дюбоска рассчитывают по формуле С.Ни-У-Р 3 =, Нх.Уга
где х— содержание фосфора в исследуемом корме, мг/г (г/кг); С — количество фосфора в стандартном растворе, мг: Her — высота стояния стандартного раствора в стаканчике колориметра, установленная по шкале; Hx -— высота стояния испытуемого раствора; У — общий объем раствора золы после разведения; У; — объем раствора золы, взятой для колорниметрического’ | определения фосфора; а-— навеска . корма,рии окрашенногог; Р — разведениераствора подготовленного для колоримет-я Разводить подготовленный к колориметрин испытуемый раствор следует только в случае значительной разницы в интенсивности окрамы испытуемым: н стандартным растворами. eee. Fou объем стандартного раствора фосфора 100 ma, а объем испытуемого (окрашенного) раствора золы корма перед КОРНИ 200 мл, то Р равно 2 (200 мл: 100 мл). Чаще всего равняется | (100 мл: 100 мл) Особенности определения фосфора при использовании фотоэлектроколориметра. Для построения калибровочной кривой на фосфор в мерные колбы на 100 мл берут 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 12 и 15 мл Иa рабочего раствора фосфора (в 1 мл содержится 0,01 мг _flasice добавлют так же, как и при определении фосфора в кормах, растворы молибденовокислого аммония, сульфита патрия и гидрохинона (или амидол и содово-сернистый раствор). р Объем содержимого доводят до 100 мл, оставляют на 16—24 ч и колориметрируют с красным светофильтром. Используют стакан1ики с толщиной просвечивающего слоя 30 мм. sz р Для построения шкалы колориметрическое определение фосфора в стандартных растворах проводят 3—4 раза в разные дни с од: У т теми жереактивами. Затем вычерчивают график. биг о горизонтали располагают данные о концентрации фосфора : мг, или мкг), по вертикали— показатели колориметра. Нуль прибора электрофотоколориметра устанавливают по раствору с водой и реактивами (нулевой раствор без фосфора). °С каждой партией анализируемых проб корма целесообразно готовить три стандартных раствора фосфора (0,02; 0,05 и 0,10 мг) для построения переменной или контрольной шкалы на Ри для вывы ROR DE PO SHOES коэффициента К. олориметрируют раствор и записывают показания шкалы фбме По. калибровочной кривой находят количество фосont (мт), ‚соответствующее показаниям шкалы фотоколориметра asa оли’ несло фосфора в кормах при сухом озолении определяют формуле ВК
ВЫ техИаафа p 1 Via’г корма, мг; С — количество фосhg atria В Ry patraope золы, установленное по као а ‘ ‘P у и = соответствии с показателями фотокоть, 2 ZF — общий объем раствора золы после pasНИ aD: 17 GOREN раствора золы, взятый для колор рического определения фосфора, м; Р— разведение подготовленного к колориметрии окрашенного. раствора’ 40лы (по сравнению со стандартным раствором, объем которого равен 100 мл); «— масса корма, г; К — поправочный 181
коэффициент на показания ранее подготовленной стандартнойрасхожденииновыйшкалы графикна сР калибровочной(его применяюткривой,при расчетах,а не есливычерчиваютимеются Коэффициент К рассчитывают— переменнуюпошкалу).отношению суммы фактичес1 ких концентраций фосфора в приготовленных стандартных растворах к сумме концентрации фосфора, определенных по показаниям электрофотоколориметра и ранее подготовленной стапдартной шкале на фосфор Пример: д 0,170 мер (0,02 - 0,05-- 0,100 мг) 0.85 0,200 мг (0,024 -|- 0,058 4-0, 118)" Ванадо-молибдатный метод определения фосфора (из растворов золы). Метод основан на образованин в кислой среде фосфорно-ва. надо-молибдатного комплекса желтого ивета. При концентрации фосфора 1—20 мкг/мл (0,001—0,020 ми/мл) интенсивность окраски пропорциональна содержанию элемента. Реакиню слелует проводить в растворе азотной кислоты 0,5-0,9 и. (до 1,5 и.). Максимальное светопоглощение наблюдается в ультрафиолетовой области сиектра при 315 um, Определение фосфора проводят в области 460—500 нм, используя синий светофильтр. Окраска устойчива около 48 ч. Реактивы, посуда, оборудование. Реактивы. Кислота азотная концентрированная; азотная разведенная кислота (1:2)— один объем концентрированной HNO, разводят двумя объемами листиллированной воды (раствор 1); аммоний ванадиевокислый-мета (ГОСТ 9336—60); 0,25%-ный раствор ванадневокислого аммония (для приготовления берут 2,5 г соли и растворяют в кипящей дистиллированной воде, охлаждают, добавляют 20 мл концентрированной азотной кислоты, доводят объем раствора дистиллированной водой до 1 л) (раствор 2). Раствор молибденовокислого аммония — 5%-ный {для его приготовления берут 50 г соли, растворяют в горячей днстиллированной воде, охлаждают и доводят объем водой до | л) (раствор 3); реагирующая смесь (растворы 1, 2 и 3 смешивают в отношении 1:1:С может храниться в темном прохладном месте до 6 мес); запасной стандартный раствор форфора (4,393 г КН»РО, х.ч. растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 мл в дистиллированной . воде и доводят объем до метки; в | мл запасного раствора содержится 1 мг фосфора). Этот раствор служит исходным для приготовления шкалы стандартных растворов. Для приготовления шкалы стандартных растворов в мерные колбы на 500 мл отбирают определенные количества запасного стаидартного раствора (табл. 43). _ 1 74); Посуда.мерные Мерныепипетки колбына 5, 10,на 50,15 и100,20 500мл (ГОСТи 1000 202-92—74);мл (ГОСТ 1770—мерные цилиндры на 1000 мл (ГОСТ 1770—74). 7 той спиралью.Оборудование. Фотоэлектроколориметр, электроплитка сэйзакрыХод определения. Из стандартных растворов 3, 5н 7 m0 25откоймл тс ТЕрез вым вбаллончикомконические илиили nenaширинцем-дозаторомколбочки (приберутae + J строении градуировочного графика используют все 8 растворов); в
