за 100 и зная количество каждой фракции в относительных процентах, проводят расчет фракций в абсолютных процентах. не приемлемОписанныйдляэкспресс-методоценкн состоянияопределениябелковогобелковыхобмена фракцийв зависимостивполот различных условий кормления. ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗЕРВНОЙ ЩЕЛОЧНОСТИ КРОВИ Величина рИ крови животных поддерживается на постоянном процессеуровне, несмотряобмена всшествNa образованиеи поступлениекислыхихи сщелочныхкормами. соединенийПостоянствов РИнатной,ных кровиорганов. фосфатной,регулируетсябелковой,наличиемгемоглобнинойв ней буферныхи функциейсистем выделитель-— бикарбоВ нейтрализации кислот, образующихся в процессе обмена, большая роль принадлежит карбонатному буферу, состоящему из угольной кислоты и бикарбоната натрия. Это подтверждается тем, что изменение в составе карбонатного буфера при нарушении кислотнощелочного равновесия происходит раньше всего, а изменение его компонентов отражает состояние других буфериых систем крови. Поэтомув огранизмедляживотныхвыясненияопределяютнарушенияконцентрациюкислотно-шелочногобикарбонатовравновесиякроBH, которую считают резервной щелочностью. Последняя изменяется в зависимости от полноценности кормления, условий содержания, нормальныхсистемы животных.функций желудочно-кишечного тракта и выделительной Причинами снижения резервной щелочности крови могут быть: избыточное поступление с кормами кислых элементов (применение несбалансированного концентратного типа кормления); скармливание силоса плохого качества с большим количеством масляной кислоты (особенно при недостатке легкоферментируемых углеводов в рационе); нарушения минерального ‘и витаминного обмена, рахит, кетоз, родильный парез и некоторые другие заболевания. Имеются указания, что снижение щелочного резерва наблюдается у телят при токсической диспепсии. Отсутствие моциона часто приводит к снижению щелочного резерва крови вследствие накопления в организме животных недоокисленных продуктов обмена. Расстройство сердечной деятельности, эмфизема легких, нахождение животных в воздушной среде с высокой концентрацией углекислоты могут вызвать в организме состояние не метаболитического, а газового сдвига кислотно-щелочного равновесия в связи с замедлением процесса отдачи легкими углекислоты. ъ Определение резервной щелочности плазмы крози по Ван-Слайку
Принций метода заключается в измерении количества углекиелого газа, вытесненного серной кислотой из бикарбонатов плазмы крови в разряженном пространстве аппарата Ван-Слайка. Величина углекислого газа исчнеляется в объемных процентах (06%С0»). Реактивы. 1%-ный раствор аммиака в дистиллированной прокипяченной воде, лишенной углекислоты; октиловый или каприловый спирт; 10%-ная серная кислота (х.ч.); щавелевокислый калий (при
oe
отсутствии чистого препарата его сле у 3 | дует перекристаллизировать). eo —— | калия30%-ныйдолжен растворбыть нейтральным.щавелевокислогоДля e+ aК Г 2 этого в определенное количество раство| Uy afl —" дора прибавляют7,1—7,4, прибавляяфенолрот раствори доводятедкогорН ~*~р нЕES | калиярасчету,илинещавелевойприбавляякислоты.индикатора,Затемней-по аг | | трализуюттовленный такимостальнойобразомраствор.растворПриго-отмеу iИИ - ряют в центрифужную пробирку из рас| : 1 3четамг щавелевокислого0,01 мл на 1 млкалиякровина (не| млболеекро7. = | || ви), затем, вращая пробирку, смачивают 50 ее стенки и оставляют для высушивания р ‘Мл на воздухе (подогревать нельзя). Be all | В эти пробирки берут кровь (под i k il слой парафинового масла), закрывают id il О 2 пробкой и осторожно несколько раз пеИ и центрифугируютревертывают. Кровьи отделяюткак можноплазмускореев HЯ (| 1 12 сухую пробирку. H (| nt Металлическая ргуть массой 4—5 кг } ii должнаную HAH бытьслегкачистаязагрязненнуюи сухая. ртутьПродаж-по( itB= [о мещают в широкую чашку, заливают р 2 азотной кислотой, разведенной водой & CAD 1:1 и помешивают стеклянной палочкой 9 : (работают под тягой). Через несколько и минут кислоту сливают и обрабатывают Ie еще раз новой порцией. Затем ртуть => промывают до нейтральной реакции сливных вод. С поверхности ртути филь5 тровальной бумагой удаляют воду, а для полного высушивания 2—3 раза прои. пускают через многослойный фильтр, в Рис. 5. Аппарат Ванкотором иглой сделаны отверстия. анк: Смазка для кранов аппарата — смесь тщательно измельченного каучука (40% общей массы) с медицинским вазелином (60%) сплавляют при температуре 160—180? около 12 ч до образования однородной густой массы. EEE посуда. УТЕС пробирки; центрифуга; аппарат Ван-Слайка; пипетки на | мл с делениями, не доходящими до конца; пипетки на 5 мл; ртутный барометр; комнатный термометр; прибор для насыщения плазмы углекислотой (можно смонтировать вфоровымилаборатории).бусами,Стекляннуюплотно закрываютбанку наполняютрезиновойстекляннымипробкой, черезили фар-которую проходят две стеклянные трубки, изогнутые под прямым углом. Одна трубка доходит до дна банки, другая заканчивается под пробкой, куда при помощи резинового шланга присоединяют делительную воронку емкостью 100—300 мл, закрывающуюся притертой пробкой. Аппарат Ван-Слайка. Аппарат типа ЩР-3 (рис. 5) состоит из градуированной бюретки 1 емкостью 50 мл, верхняя часть которой 223
представлена капиллярной трубкой (емкость 1 мл), переходящей в несколько уширенный резервуар с метками до 3 мл. Далее идет широкая смесительная часть бюретки, заканчивающаяся трубкой, на которой имеется метка 50 мл. Бюретка вверху и внизу закрывается притертыми двухходовыми крапами 2.'Верхний кран через один ход сообщается с градуированиой воронкой 8, другой — с отводной трубкой 4. На отводную трубку надевают резиновый шланг, который опускают в сосуд для сбора отработанной жидкости (при недостаточном павыке в сосуд может попасть часть ртути). Нижний кран через одни ход соединяется с уширенной, другой с узкой частями У-образной трубки 12. Эта трубка переходит в короткую стеклянную трубку, на которую прочно укрепляют резиновый шланг 7 днаметром 6—8 мм и длиной 80-100 см. Шланг соединяет аппарат с Ур тельнымющей дужкусосудомдля—подвешиваниястеклянной воронкойна крючкигрушевидной5, 8. Бюреткаформыприкреп-6, имелена на деревянный щиток 11, стойка 10 ввернута нижним "оон В плиту 9. Щиток фиксируется к стойке с помощью пружинной клеммы и особого приспособления, обеспечивающего его свободное качание и взбалтываиие жидкости в бюретке. Краны должпы быть смазаны (смазку наносят тонким слоем) и укреплепы резиновыми петлями или металлическими пружинами, Для заполнения аппарата открывают краны и в подвешенную на нижнем крючке грушевидную воронку осторожно наливают ртуть. После заполнения шланга и нижней части аппарата уравнительный сосуд медленно поднимают вверх до уровня верхнего крана и выжидают, пока ртуть заполнит его ходы и окажется над краном в градуированной воронке и выходной трубке (при этом примерно '/4 часть грушевидной воронки должна быть заполнена ртутью). Аппарат должен стоять в большом кювете, так как при недостаточном навыке работы с ним ртуть может вылиться и попасть на пол. В промежутках между исследованиями грушевидную воронку подвешивают на нижний крючок, при этом ртуть будет находиться на уровне нижнего крана, который закрывают. Резервуар со ртутью плотно закрывают резиновой пробкой, а шланг укладывают в кювет. Ход определения. Подготовка аппарата к работе. Открывают краны и, медленно поднимая грушевидную воронку, наполняют аппарат ртутью так, чтобы капля ртути появилась в градуированной воронке 3 и выходной трубке 4. Верхний кран закрывают. Грушевидную воронку опускают почти на всю длину шланга, при этом ртуть опустится до конца У-образной трубки, в аппарате создастся разреженное пространство. Затем уравнительный сосуд поднимают (не быстро), ртуть заполняет аппарат, нижний кран в это время соединяют то е одной, то с другой частью У-образной трубки. Если в приборе и в резиновом шланге не осталось воздуха и оба крана хорошо притерты, ртуть, быстро поднимаясь в капилляре аппарата, ударяется о верхний крап, издает ясныи металлическии звук. При наличии в аппарате воздуха он поднимается кверху и металлического звука не получается. В этом случае поднимают грушевидную вороцку, открывают верхний кран и дают возможность воздуху выйти в воронку 3. Опуская и поднимая ртуть в аппарате, несколько раз слеудаляютэтого изможнонего весьприступитьвоздух к(приИ работеЗеЕНИЮ:и жидкость)При этом нижнийи толькокракпосоединяет аппарат с узкой частью У-образной трубки. ют кВ приборуделительнуюдля насыщенияворонку вносятее углекислотой.около 3 мл плазмы,Открываютприсоединя-пробку
224
