Справочник по контролю кормления и содержания животных

бирки помещают в центрифугу и центрифугнруют 10—15 mu. На | дне пробирки остается белый осадок щавелевокислого кальция. Раствор над осадком сливают, опрокидывая пробирку, следят, магой.чтобы осадок ие сливался. Ее края вытирают фильтровальной бу| Затем в пробирку приливают 4 мл 2%-ного раствора аммнака, смывая стенки пробирки и взмучивая верхний слой осадка ee вращением между ладонями. Снова центрифугируют 10—15 мии. Далее жидкость сливают, вытирая фильтровальной бумагой края пробирки, снова приливают 4 мл 2%-ного аммиака н центрифугируют. (Цель промывания — удаление оставшейся над осадком жидкости, содержащей щавелезокислые соединения, которые могут завысить результат). Надосадочную жидкость сливают, как описано выше. После удаления аммнака к осадку приливают 2 мл 50%-ного раствора серной кислоты. Осадок размешивают стеклянной палочкой, пробирку (вместес палочкой) ставят в кипящую водяную баню на 2—3 мин, Горячий раствор титруют из микробюретки 0,01 н. раствором марганцовокислого калия до появления слабо-розового окрашивания, ие исчезающего в течение 1 мин. Одновременно ставят слепой ФИ (определяют количество кальция в реактивах и дистиллированной воде). Для этого в центрифужную пробирку вносят 3 мл дистиллированной воды и 0,5 мл щавелевокислого аммония, перемешивают, а далее поступают, как с исследуемой сывороткой. Расчет. Так как известно, что 1 мл 0,01 н. раствора KMnO,. соответствует 0,2 мг кальция, TO x, мг% = (т— п).К-0,2.100, где из — количество 0,01 н. раствора KMnO,, израсходованного на титрование испытуемой пробы, мл; п — количество 0,01 н. раствора KMnO,, израсходованного ка титрование слепого опыта, мл; К — поправка к титру КМпО‹; 100 — пересчет в мг%.

Комплексометрический метод определения кальция

вАенвородкокрове

Принцип метода. Мурексид в щелочной среде (рН 10—13) образует с ионами кальция комплексное соединеиие розового цвета. При титровании трилоном Б кальций образует с ним более стойкое комплексное соединение, освобождая индикатор, вследствие чего цвет раствора изменяется. Реактивы и посуда. 9 н. раствор едкого натрия (36 г едкого натрия растворяют в дистнллированной воде и после охлаждения доводят объем до 100 мл); индикатор мурексид— пурпурат аммония (его тщательно растирают с нитратом калия в отношении 1: 800); 0,005 н. раствор ЭДТА (двунатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, трилон Б, комплексон III). В мерной колбе na | л растворяют 0,9305 г вещества в 200 мл дистиллированной воды, затем подщелачивают 10%-ным едким натрием, лока раствор не станет вполне прозрачным и доводят дистиллированной водой до метки. Раствор при хранении в полиэтиленовой посуде устойчив в течение двух месяцев (1 мл точного 0,005 H. рас229

твора ЭДТА содержит 0,1 мг кальция); стандартный раствор углекислого кальция (2,497 г предварительно высушенного при 105—120°С СаСО; х.ч. берут в колбочку на 200 мл, добавляют 25—30 мл дистиллированной воды и порциями по 1—9 мл 1 н. НС до полного растворения вещества (идет около 50—55 мл HCl). 3aтем смесь нагревают до кипения, переносят в мерную колбу на 1 л и после охлаждения доводят водой до метки (1 мл стандартного раствора содержнт | мг кальция); этиловый спирт; аммиачный буферный раствор (2 г хлористого аммония х.ч. растворяют в дистиллированной воде, добавляют 10 мл 25%-ного раствора аммиака и доводят до 100 мл дистиллированной водой); индикатор кислый хром темно-синий (0,5 г индикатора растворяют в 50 мл аммиачного буферного раствора и доводят до 100 мл 96%-ным этнловым спиртом); химическне стаканы на 150— 200 мл; пипетки на 2 и 5 мл; бюретка на 100 мл; мик робюретка на 5 мл; мерные колбы емкостью 100, 1000 мл; ступка. Определение поправки к титру ЭДТА. Из основного стандартного раствора CaCO; готовят рабочий раствор путем разведения в 10 раз, при этом Е мл рабочего раствора содержит 0,1 мг кальция, что титОGyиспользуют1K Нимл раствора НОиндикаторЭДТА.делением— Длякислыйопределения1хромНИ ЭДТАтемно-синий.поправкина количе-к ствоСаСО:.ваннойХодмл определения.ЭДТА, пошедшееВ химическийна титрованиестакан берут| мл 48рабочегомл дистиллиро-раствора 0,4 мл 9водын. раствораи добавляютедкого2 натра.мл сывороткиДобавляюткрови.на Затемкончикеприливаютшпателя несколько сантиграммов индикатора мурекснда. ния Изизменениямикробюреткиокраскититруютраствора0,005OT розовогон. растворомдо фиолетовогоЭДТА до получе-цвета. Переход не очень яркий, поэтому для сравнения цвета ставят перетитрованную пробу или образец (контроль) со всеми реактивамн, но без сыворотки крови. Через несколько определений ставят новый контроль, так как его окраска изменяется. Расчет проводят по формуле ==—_ п.К.0,1.100 а ,

где х — содержаниево 0,005 н. кальцияраствора о.TA, пошедшеекрови, мгф;на титрование,п — количест-мл; К-— поправка к титру ЭДТА; 0,1—1 мл 0,005 н. раствора ЭДТА эквивалентен 0,1 мг кальция; а — количество сыворотки крови, взятой на анализ, мл; 100 перевод в мг%.

ОПРЕДЕЛЕНИЕ НЕОРГАНИЧЕСКОГО ФОСФОРА В СЫВОРОТКЕ КРОВИ (ПО Р. Я. ЮДЕЛЕВИЧУ)

Принцип метода. Фосфаты безбелкового фильтрата крови nan сыворотки крови при взаимодействии с молибденовокислым аммониeM образуют комплексное соединение, которое в результате восстамолибденовую синь. Интенсивность образующейся при этом окраски 230

пропорциональна количеству неорганического фосфора в растворе. Определяя в колориметре интейсивность окраски испытуемого и стандартного раствора фосфора, находят количество миллиграммов неорганического фосфора. Реактивы. 20%-ный раствор трихлоруксусной кислоты; 5% -ный раствор молибденовокислого аммония (25 г молибденовокислого аммония растворяют в 300 мл ди стиллированной воды ин фильтруют в мерную колбу Ha 500 мл, куда осторожно добавляют 75 мл концентрированной серной кислоты и после охлаждения доводят дистиллированной водой до метки); содово-сернистый раствор (100 мл 20%-ного раствора углекислого натрия соединяют с 25 мл 15%-ного раствора сернистокислого натрия и фильтругот). Раствор нестоек, и его готовят только перед употреблением. Растворы углекислого и сернистокислого натрия готовят раздельно из сухих безводных солей; 1ф-ный раствор гидрохинона (к 100 мл раствора гидрохинона прибавляют одну каплю коицентрированной серной кислоты); раствор должен быть почти бесцветным; при хранении может приобрести желто-коричневый цвет, и тогда его использовать нельзя; хранится в темной склянке; основной стандартный 57. Использование реактивов при постановке цветной реакции