Проба Росса. Реактивы и посула. Реактив Pocca: ЕЁ ни тропруссида натрия растирают в ступке, затем добавляют 99 г uMMONKS сернокислого и тщательно растирают в очень мелкий норошок; реактив нестоек и гигроскопичен, его хранят в темной бирки;склянкепияцет.с притертой пробкой в сухом месте; едкий натрий х.ч.; проХод определения. В пробирку вносят [р реактива Росса, наливают 5 мл свежей мочи и пинцетом добавляют 1—2 крнеталликл едкого натрия. Пробирку встряхивают до растворения реактивов, Реакцию читают через 5 мин. При постановке пробы температура должна быть не ниже 18° С. Слабая розовая окраска— сомнительная реакция; розовое окрашивание— слабо положительная; пурпурный цвет, раствор пропрачный на свету — положительная реакция; темно-пурпурное окрашивание,реакция. раствор не прозрачен на светур — резко положительная
Определение белка в моче
Практически нормальную мочу животных примято сунтать свободной от белка, так как обычными лабораторными методами он не определяется. В ничтожных количествах белок в моче обнаруживают у новорожденных животных. Белок в моче животных может быть обнаружен при сильном мышечном напряжении н обильном содержании протеина в кормах Причиной такой альбуминурии следует считать накопление в Kpoин значительного количества молочной и фосфорной кислот, которые, повышая проницаемость клубочковых капилляров, ‘действуют ии них токсически. У крупного рогатого скота и овец после чрезмёрного поедания концентрированных кормов часто наблюдают появление белка и моче алиментарного пронсхождения. Альбуминурия может наблюдаться при заболевании пнщеварительного ‘тракта печени, отравлении минеральными ядамн, скармливании заплеснёвелых кормов, ядовнтых растений. Иногда альбуминурия отмечается у беременных животных. ue На белок исследуют свежую н совершенно прозрачную мочу, а фильтр).os Sho прозрачную профильтровывают (иногда через двойной Для качественного определения белка в моче на практике ‘наиболее часто применяют пробы, описываемые ниже. Г Проба с сульфосалициловой кислотой. Достоннство пробы заключается в том, что данная кислота образует муть только в прнсутствии белков, альбумоз и бальзамических веществ. Помутнение, вызванное присутствием альбумоз, прн нагревании мочи исчезает, а при охлаждении появляется вновь. Белковый осадок при нагревании не растворяется, Присутствие бальзамических вешеств тоже. образует помутненне, которое исчезает при добавлении нескольких капель спирта РН Реактивы и оборудование. 20%-ный раствор сульфосалициловой кислоты (хранят во флаконе из темного стекла) “hee ронки; фильтры; пробирки; штативы. а Ход определения. К 4—5 мл профильтрованной мочи прибзвляют по каплям раствор сульфосалициловой кислоты. В one ствии белка в моче каждая капля образует облачко мути, быстро оседающее на дно пробирки. В зависимости от содержания белка
темномможет бытьфоне,легкаяили помутнениеопалесценцияи выпадениежидкости,хлопьевидногозаметная толькоосадка.на Проба с сульфосалициловой кислотой обладает большой чувет. вительностью, давая положительные результаты при содержании 0,015% белка. Проба с азотной кислотой. Азотная кислота, взятая в избытке, осаждает белок без нагревания. Реактивы и оборудование. 50%-ная азотная кислота (удельный вес 1,25); пробирки; штатив для пробирок; пипетки на млХод определения. На дно пробирки, не смачивая ее стенок, наливают 2—3 мл раствора азотной кислоты и осторожно по стенке насланвают равный объем профильтрованной мочи. Наличие белка определяют ио появлению Ha границе жидкостей белого кольца (пленки) из свернувшегося белка. Если в моче содержится незначительноечерез 2—3 мин: количествоПоявление белка,тонкого,пленкано отчетливогопоявляетсякольцане сразу,к концуа третьен минуты соответствует количеству белка в моче, равному 0,033%Необходимо,(в 1000 млучитывать,мочи содержитсяie часть0,033другихг белка).о лик частей мочи под действием азотной кислоты, выпадая в осадок, образует кольцо, похожее на белковое, Например, нуклеоальбумины н муцин образуют кольцо выше границы жидкостей, которое растворяется при легком взбалтыванин; кольцо, связанное с наличием альбумоз, растворяется прн нагревании; при налични в моче большого количества мочекислых солей (уратов) кольцо располагается несколько выше границы жидкостей и исчезает при легком нагревании (при разведении такой мочи в 2—3 раза водой кольца не образуется); в концентрированной моче может образоваться кольцо из азотнокислой мочевины (устраняется при разведении мочи); смолистые вещества мочи нередко образуют ограниченное кольцо, растворяемое при прибавлении спирта или эфира; пигменты мочи образуют цветные кольца (буро-красные, коричневые, зеленые), отличающиеся от белковых прозрачностью и цветом; ряд цветных колец дают желчные пигменты (осадок от соединения желчных пигментов C азотной кислотой, собранный на фильтре, под действием спирта растворяется); порошкообразный тимол, применяемый при консервировании мочи, дает кольцо, трудноотличимое от белкового, поэточ му консервируют мочу кристаллическим тимолом.
` Количественное определение белка в моче
Используют пробу с азотной кислотой. Известно, что появление тонкого, но отчетливого кольца на соединении раствора азотной q кислоты и мочи к концу третьей минуты соответствует количеству белка в моче, равному 0,033% (0,0033%). Если в моче белка больше, то кольцо появляется раньше, a иногда тотчас же после наслоеHHH МОЧИ, В таком случае ee разводят водой до тех пор, пока после наслоения на азотную кнелоту в каком-лнбо разведении кольцо образуется именно к коицу третьей минуты. Количество белка (в %) будет равно произведению (0,038. на степень разведения. Ход определения. В 6—8 пробирок наливают по 2 мл дистиллированной воды, затем в первую пробирку добавляют 2 мл профильтрованной мочи и содержимое смешивают Из первой пробирки пипеткой переносят 2 мл смеси во вторую пробирку, из вто238 ,
ройя ао Же. KOAMTECTROICUES HONEY B проти ит. д. В резуль. pe aN aw Se AOS Я МОЧИ} B 2, 4, 8, 16, 32, es 128 eee Paonia ively © pees NEO: EEDA ite о ‚ при каком разведении к концу третьей минуты 6 PERCECS AON ST, XO ONO Tere i dike i ирке (моча разведена в 32 раза), тогда 0,0339» умножаем на 32 Eon cone oo Reon белка в исследуемой моче: 0,033 X32= 1,056%. т ольцо образуется не в конце третьей минуты, а раньше или колько позже, то для определения количества белка пользуются таблицей (табл. 59), что ускоряет ход определения.
- Определение количества белка в моче (в +)
| Время обра ния С. коль- —————————— | Vem моча | | --_1 7 a | SS =a 4 ee | ОСЬ ) ee | i. ани 18 . | CL WOM 2 | 8 | 128 |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 60—75 | 0,045 | 0,091 | 0,183 | 0,37 | 0,73 | 1,47 | 2,93 | 5,87 |
| 75—90 | 0,042 | 0,083 | 0,166 | 0,33 | 0,67 | 1,33 | 2,67 | 5,33 |
| pn 85 | 0,040 | 0,079 | 0,158 | 0,32 | 0,63 | 1,27 | 2,53 | 5,07 |
| 105-120 | 0,037 | 0,075 | 0,150 | 0,30 | 0,60 | 1,20 | 2,40 | 4,80 |
| —150 | 0,035 | 0,070 | 0,142 | 0,28 | 0,56 | 1,13 | 2,26 | 4,53 |
| 150—180 | 0,033 | 0,066 | 0,133 | 0,27 | 0,53 | 1,06 | 2,11 | 4,27 |
| 180—210. | 0,031 | 0,062 | 0,125 | 0,25 | 0,50 | 1,00 | 2,00 | 4,00 |
| 210—240 | 0,029 | 0,058 | 0,117 | 0,23 | 0,47 | 0,93 | 1,87 | 3,73 |
Например, если моча разведена в 32 раза и при наслоении ее па азотную кислоту кольцо появляется между 90 и 105 с, то в такой моче содержится 1,27% белка. Время наслоения мочи условно берется за 15 с. Если в моче одновременно содержатся белок и альбумозы, данный метод определения количества белка неприменим,
