и Ю. А. Перчихиным, устаповлено, что разовое введецие микрод03 супермутагенов может повысить плодовитость самок па 1,5— 2 щенка по сравиению с коитролем, активизируется и фуикциоиирование половых желез. Следует отметить, что широкому использованню супермутагенов как биологических стимуляторов развития должна предшествовать тщательная проверка их действия на организм животного.
Как в пашей стране, так и за рубежом усиешио разрабатываютея бнотехиологические методы управления оптогенезом. Речь идет о методах генной ииженерни, позволяющей копструпровать повые организмы путем переноса пужных гепов, обусловливающих развитие ценных свойств, из одного оргапизма в другой. Паука сейчас владеет методами клонирования генов н коиструнрования па их оспове плазмид, обеспечивающих встраивание генов в гениом оргапизме реципиеита. Сейчас уже клонировано значительное число генов высших организмов, таких как гормон роста — соматотропии, гормон инсулина, лейкоцитарного иитерферона, миозипа и др. Работы по гепной иижеперии плодотворно ведутся в инетитутах АН СССР, ВАСХНИЛ, ВИЖ, ВНИИРГЖ, MBA имепи К. И. Скрябина. Наряду ¢ методами генной инженерии важное научно-практическое значение прнобрели сейчас методы клеточной п хромосомной инженерии, позволяющие ускорить селекционный процесс и подпять его эффективность. К клеточной пнженерин относитея трапсплантация зародышей и эмбрионов, мнкрохирургическое разделение их с целью получения генетических копий, однояйцовых близнецов-двоеп и четвереи (у крупного рогатого скота, овец, свиней), химер, более полное использование запасов ооцитов коров-рекордисток путем дозревания их и оплодотворения in vitro в течение 3—4 дней.
Разделение ранпих эмбрионов па стадии морулы микрохнрургическим путем с целью получения мопозиготных близнецов впервые было проведено в 1981 г. в США в университете ФортКоллииз (штат Калифорциия). Аналогичные исследования успешно ведутся сейчас в СССР (ВИЖ). Создание методики пересадки половины эмбриопов в оба рога матки дает возможность повысить двойпевость при отелах коров. Одним из направлений мнкрохирургических манипуляций па эмбрионах является получение химер, т. е. приплода, родившегося в результате перссадки зародыша, состоящего из клеточной массы двух или нескольких 5 —6-дневного возраста эмбрнонов и объединенных в одно целое. Разрабатываются методы клонирования животных путем иересадки ядер соматических клеток в эпуклеипированиые яйцеклет ки, что позволяет размножать генетически ценных особей с практически идентичным тепотипом. Трансплантация эмбрио-
123
нов — ускоренный метод воспроизводства высокоценных в генесическом отношении животных, прежде весго выдающихся быков-производителей улучшающих пород от коров-рекордисток и отцов с высоким генетическим потенциалом. Преимущества этого метода заключаются в том, что теленок-трансплантант наследует голько генетические свойства отца и матери-донора, реципиент пе оказывает влияния па наследственность приплода. Идет процесс непрерывного усоверщенствования эмбриопересадок и методов длительного хранения эмбрионов. С 1973 г. стало широко применяться глубокое замораживание эмбрионов. Замораживание эмбрионов— ценный метод сохранения генетического матернала для селекционного использования в будущем. On позволяет получать чистопородных животных без потери генов в ходе хранения, а также дает возможность транспортировать живой материал в различные регионы земного шара. В последние годы станции по искусственному осеменению США, Канады, ФРГ, Франции, Великобритании па 70—75% комплектуются быками, полученными с помощью трансплантации эмбрионов от выдающихся по молочной продуктивности коров с удоем He менее 8000-—10 000 кг молока за год. Во многих странах созданы снециальпые фермы по эмбриопересадкам. Успешно ведутся эти работы иу нас в стране.
Копирование генотипа выдающихся животных— очень сложная проблема. Известно, что пересадка эмбрионов осуществляется с помощью различных методов: хирургического и нехирургического. Нехирургический метод трансплантации зародышей . состоит из следующих этапов: вызывания суперовуляции яйцеклеток у коров-доноров с помощью фолликулостимулирующего гормона (ФСГ), введения яйцеклеток реципиентам. Коров-доноров отбирают не ранее чем через 60 дней после отела. Им имплантируют под кожу уха препарат синхромат. Через 9 дней препарат удаляют и внутримышечно вводят 3 мл простагландина. На вторые сутки у таких животных наблюдают течку и охоту. На 10-й день после появления охоты начинают обработку донора на суперовуляцию путем инъекции ФСГ и простагландипа (по определенной схеме). Первое искусственное осеменение доноров при паличии эструса проводят на 5-й день, второе на 6-й день. Вымывание эмбрионов осуществляют на 7-й день после осеменения донора. Для этого используют трехгодовой металлический катетер с телескопическим пластмассовым зондом и канюлей. Закрытая система вымывания исключает контакт со средой. Оценка качества эмбрионов проводится путем сравнения их с точной бластографией. :
Отбор реципиентов проводят с учетом физиологического состояния, живой массы, возраста (18 мес), нормального полового иикаа, здоровья.
vod
[0 Телкам-реципиентамдней его удаляют и внутримышечноимплантируют вводятбинхромат500 МЕВ. СЖК*.Через Выявляют телок в охоте по рефлексу пеподвижностн. Охота у допоров н реципиептов должна быть одповременно. Вводят эмбрионы реципиентам специальным катетером через шейку матки. Важнейшими проблемами трансплантации являются: отбор высокопродуктивных (не менее 8000 кг за лактацию) полиоценлых в генетическом плане коров-доноров, получение от пих больщого количества зародышей, повышение приживляемости эмбрионов при пересадках, разработка новых научных методов созревания ооцитов вне организма, подбор реципиентов для каждого эмбриона. Первые телята из оплодотворенных ооцитов были получены Браккетом в 1982 г. В опытах созревание ооцитов проходило в яичнике коровы, а оплодотворение проводилось вне организма, В СССРв 1983 г. (Эрнст, Голубев) получили теленка из ооцита не только оплодотворенного, HO и созревшего вне организма. В этом эксперименте пересаживали очень ранних эмбрионов (2—4-клеточных) в яйцевод реципиента, что усложняло методику эмбриопересадок. Для получения от коров-допоров эмбрионов на более поздней стадии развития Л. К. Эрист и М. И. Прокофьев (1985) использовали промежуточных реципиентов (крольчих), В яйцевод ложноберемепной крольчихи на 3—5 суток пересаживали ооциты, которые там дозревали до стадии морулы H затем были оплодотворэны in vitro. Приживляемость эмбрионов, полученных в результате оплодотворения ооцитов в яйцеводе крольчихи была в 5—7 раз больше, чем оплодотворенных in vitro. Подобные эксперименты при эмбриопересадках с промежуточным реципиентом (крольчихами) успешно провел на овцах Ф. М. Мухамедгалиев (1985). Эмбриогепетика— важный раздел биотехнологии. В ближайшее время будут решаться более сложные проблемы генной и клеточной ипженерни. Выделение генов, их сиитез, интеграция чужого гена с клеткой-реципиентом станут элементами работы по молекулярной реконструкции организма.
УПРАВЛЕНИЕ ИНДИВИДУАЛЬНЫМ РАЗВИТИЕМ ЖИВОТНЫХ В ПОСТЭМБРИОНАЛЬНЫЙ ПЕРИОД
В постэмбриональный ‘период организм животного попадает в новые, отличные от прежних, условия внешней среды. На организм новорожденного воздействует ряд внешних факторов, оказывающих огромное влияние на формирование хозяйственно полезных признаков.
- Сыворотка жеребых кобыл,
