1. Какое влияние на молочную продуктивность американской популяции голштинского скота оказывает редкий генотип Pit1- StuI^АА ?

2. С помощью каких рестриктаз выявляют мутации Pit1I3H , Pit1I3N и Pit1I3NL ?

2.1.4 Ассоциация полиморфных вариантов гена bPit1 с признаками мясной и молочной продуктивности

Исследования ассоциации полиморфных вариантов гена bPit1 с признаками мясной и молочной продуктивности у крупного рогатого скота в настоящее время широко проводятся за рубежом в рамках различных селекционных программ. Такие работы в основном направлены на поиск новых мутаций и выявление их ассоциации с признаками мясной или молочной продуктивности, для какой - либо отдельной, наиболее распространенной на данной территории, породы.

Наибольший интерес с точки зрения применения в молекулярном маркировании хозяйственно полезных признаков, представляют собой мутации, приводящие либо к изменению работы гена-кандидата (возникающие в его регуляторной области), либо приводящие к изменению структуры и свойств транслируемого с этого гена белка (мутации, возникающие экзонах и приводящие к аминокислотным заменам, либо в области интронов, в случае участия их в альтернативном сплайсинге).

Основным методом их детекции является метод полиморфизма длин рестрикционных фрагментов, применяющий рестриктазы способные распознавать уникальные последовательности нуклеотидов (нормальные или мутантные). Поэтому название исследуемого полиморфного варианта обычно включает название гена и рестриктазы используемой для его распознавания с указанием участка гена, в котором данная мутация расположена.

В настоящее время выявлено значительное количество точковых мутаций гена bPit1 у представителей различных пород, как мясного, так и молочного направления.

Ассоциация полиморфизмов с мясной продуктивностью. Исследования ассоциации полиморфных вариантов гена bPit1 с признаками мясной продуктивности ведутся на различных породах.

Наиболее исследованным из них является bPit1- HinfI полиморфизм, впервые описанный Woollard J. (1994) [134] и впоследствии идентифицированный как молчащая G→A замена в области шестого экзона [156]. Несмотря на то, что данная мутация не приводит к аминокислотной замене белка и теоретически не должна влиять на его физиологические свойства, рядом авторов выявлены различные виды ассоциации этого полиморфизма, как с признаками мясной, так и молочной продуктивности у представителей разных пород. Так, в работе Renaville R. (1997) данная мутация исследована на голштино-фризской породе. Редкий аллель, характеризуемый

отсутствием сайта рестрикции для фермента HinfI обозначен как А аллель. Наиболее частый аллель, разрезаемый рестриктазой HinfI обозначен как В аллель. Было выявлено, что аллель bPit1- HinfI^А ассоциирован с повышенной продуктивностью молока, более высоким содержанием молочного белка и более высокими показателями по признакам мясной продуктивности. В то же время носители редкого аллеля характеризуются более низким содержанием молочного жира [120].

Также ассоциация данного полиморфизма с признаками мясной продуктивности исследована в следующих работах.

Renaville R. (1997) у бельгийского голубого скота определил генотип bPit1- HinfI^АА , как более редкий в исследуемой популяции. По его данным телята с генотипом bPit1- HinfI^ВВ обладали более высоким весом тела в возрасте семь месяцев по сравнению с телятами носителями генотипов bPit1- HinfI^АВ и bPit1- HinfI^АА , в то время, как в возрасте тринадцать месяцев по показателю веса тела, предпочтительным оказался генотип bPit1- HinfI^ВВ . По мнению автора, полученные данные свидетельствуют в пользу того, что аллель bPit1- HinfI^В ассоциирован с более высокой массой тела в раннем периоде постнатального развития [120].

Zwierzchowski в 2001 году при изучении мясных пород польского скота, также выявил положительную ассоциацию со скоростью роста в ранний период постнатального развития у телят носителей аллеля bPit1- HinfI^А . При исследовании bPit1- HinfI полиморфизма у Piedmontese скота он отмечает значительно меньшую частоту встречаемости аллеля bPit1- HinfI^А по сравнению с другим аллелем. Им так же были исследована ассоциация данного полиморфизма со скоростью роста животных, размером и качеством мяса [166]. Однако данные об ассоциации bPit1- HinfI^В аллеля с весом тела телят в раннем возрасте, полученные Renaville, в исследованной популяции пьемонтского скота подтверждения не получили [167].

Rogério в 2006 году, исследуя данный полиморфизм у зебу и кроссбридного скота мясных пород обнаружил, что у представителей таких пород, как симментальская, ангусская, канхимская, и неллорская гораздо выше частота аллеля bPit1- HinfI^А . Исследование ассоциации аллелей с мясными признаками у этих пород показало, что для них данный полиморфизм не является молекулярным маркером мясной продуктивности [168].

Кроме того, группой ученых университета штата Огайо США под руководством профессора Дэвиса М. проведен ряд исследований ассоциации других полиморфных вариантов гена bPit1 с признаками мясной продуктивности у представителей ангусского скота [169] . Ими было обнаружено три полиморфизма в области третьего интрона: bPit1- HinfI (AAT делеция у мутантного аллеля ) , bPit1- Nla III (G → C транзиция у редкого аллеля), и bPit1 -NciI и один полиморфизм в области четвертого интрона bPit1 - BstNI (G →T транзиция у мутантного аллеля). Однако, ни для одного из исследованных полиморфизмов не было выявлено значительной ассоциации на

со скоростью роста, ни с параметрами туши [170-172]. Так же ими был исследован ранее описанный другими авторами полиморфизм шестого экзона bPit1- HinfI. Для данной мутации была выявлена значительная взаимосвязь с темпами прироста на ранних этапах пост натального развития.

Kai Xue провел анализ между полиморфизмом bPit1 -HinfI и чертами роста крупного рогатого скота Nanyang. Частоты аллелей в популяции составили 0.465/0.535 соответственно. Kai Xue установил превосходство коров Nanyang с bPit1- HinfI^BB -генотипом по следующим признакам: масса при рождении, средний прирост, длина тела и охват груди за шесть и двенадцать месяцев (P <0,05) Также было выявлено, что вес тела в двенадцать месяцев у особей с bPit1- HinfI^BB -генотипом (р <0,05) был значительно больше, чем у животных с другими генотипами. Эти результаты показывают, что аллель bPit1- HinfI^B гена bPit1 положительно коррелирует с характером роста крупного рогатого скота [173].

Zwierchowski и Dybus не выявили ассоциаций вариантов гена bPit-1 с мясной продуктивностью КРС [166, 174]. Zhao в группе мясного скота ангусской породы не выявил никаких существенных ассоциаций вариантов bPit-1 со скоростью роста животных [154].

Ассоциация полиморфизмов с признаками молочной продуктивности. Исследования ассоциации полиморфных вариантов гена bPit-1 с признаками молочной продуктивности проводятся так же на различных породах, однако сводятся в основном к исследованию bPit1- HinfI полиморфизма.

Renaville R. (1997) в исследованиях на итальянской голштино-фризской породе показал, что коровы носители аллеля bPit1- HinfI^А обладали более высокими показателями общей молочной продуктивности и более низким содержанием жира в молоке [120]. Такие же данные получены Parmentier et al. (1999) [175].

Zwierzchowski L. в 2002 году также подтвердил наличие положительной ассоциации bPit1- HinfI^А аллеля с ежедневной продуктивностью молока и содержанием молочного жира при исследовании польского черно-пестрого скота [176].

В 2004 году K. De Mattos обнаружил, что гетерозиготные bPit1- HinfI^АВ Gyr быки более предпочтительны по сравнению с bPit1- HinfI^ВВ быками по молочной продуктивности их дочерей [118].

Таким образом, можно отметить, что, во-первых, не всегда совпадают данные, полученные на разных породах, во-вторых, один и тот же аллель в пределах одной породы по-разному влияет на признаки мясной и молочной продуктивности. Эти отличия в эффекте аллеля у представителей мясных и молочных пород подтверждают нефункциональную роль данного полиморфизма. Возможно в данное явление вовлечен сцепленный с bPit1 функциональный локус, который собственно и влияет на молочную продуктивность и который может быть расположен ближе или дальше от

40