монелл. Однако пеобходимо учитывать, что при таком хранении возможно некоторое изменение свойств бактерий.И. сылки И. Архангельский (1951) рекомендует для пере1—1,5 брать пробы органов длнной 2—2,5 см, шириной дывать см,междутолщипойними несколькогигроскопическуюмиллиметровбумагу.и прокла-Подготовленные таким образом сухне кусочки растирают в лаборатории раствором илив бульономступке со истерильнымиз суспензиифизнологическимделают дробные высевы на бактериологические чашки или одной петлей на 3—5 пробирок косого агара. стикеВ методическомрекомендуется указаниииз трупа попавшеголабораторнойживотногодиагио-производить посевы на одну из сред накопления (желчнугю, Кауфмана н др.) и на одну из элективных сред (Эндо, Дригальского, Подлевского н др.). Как мы уже указывали, эффективность различных сред накоплепия неодинакова и пельзя в один ряд ставить желчь и среду Кауфмана. Вместе с тем нам представляется спорной целесообразпость использования при исследовании органов на сальмонеллезные бактерии сред накопления. Еще раз отметим, что, по нашему мнению, при наличии элективных сред использование сред накопления нецелесообразно. При прямом посеве на элективную среду необходимо брать кусочки органов величиной 1—1,5 см и делать истощающий посев. Какая же элективная среда лучше? И. И. Архангельский (1951) рекомендует элективную среду Смирнова. Методическое указание по лабораторной днагностике рекомендует среду Дригальского и др. Но эта среда хорошо работает с патентованными немецкими ингредиентами и плохо с.нашими отечественными. Кроме того, для нее необходимо каждый раз готовить ex temроге разведение кристаллвиолета, а на приготовление лакмусовой настойки расходуется большое количество спирта. Для выбора панлучшей оэлективной среды А. М. Ахмедов исследовал 115 проб, полученных от экспериментально зараженных и естественно больных сальмонеллезом животных и получил высеваемость бактерий на среде Левина из 52,7% проб, на среде Эндо — стовойиз 41,2,— наЗайденглянцасреде бактоагар— из 41,2, а на среде ШуОдно из важнейших— свойствиз 13%.элективных сред — по-
папление роста посторонней микрофлоры < (Е. со, В. proleus и др.). На рост кишечной палочки наиболее сильное действие оказывает среда Шустовой— Зайденглянца, которая подавляет рост в 93,5% проб, затем следуют бактоагар Плоскирева (в 63%), среда Эндо (в 33,8%), среда Левина (в 27,6%) и среда Дригальского (в 15,3% проб). Одновременно мы установили, что среда Шустовой — Зайденглянца подавляет также рост сальмонеллезных бактерий. При исследовании 40 проб сильно обсемененного материала сальмонеллы на бактоагаре Плоскирева и агаре Эндо в первом случае были выявлены из 35 проб (87,5%), во втором— из 20 (50%). Другой особенностью бактоагара является то, что некоторые сапрофитные микробы (Вас. пезещейсиз, Вас. subtilis) на нем вовсе не растут, а В. proteus образуют О-форму. Таким образом, для практического применения паилучшими по простоте приготовления, подавлению роста посторонней микрофлоры и четкости дифференциальной окраски являются среда Левина и бактоагар Плоскирева. К этим элективиым средам рекомендуется добавлять 1% сахарозы. После выдержки посева в течение 16—18 ч в термостате при наличии подозрительных колоний из них гоTOBAT мазок и окрашивают по Граму, ставят реакцию агглютинации на предметном стекле со смесью из равпых объемов сывороток гертнера, бреслау и суипести(ep в разведении 1:50 в физиологическом растворе. Если такая реакция окажется положительной, то ее ставят с каждой сывороткой в отдельности и определяют таким способом, к какой именно группе относится выделенная культура. Если она дает положительную реакцию агглютинации с двумя сыворотками одновреMCHHO, TO на предметном стекле ставят реакцию с разведением сывороток 1:100 и 1:1000 и следят, с какой сывороткой быстрее наступит реакция агглютинации и произойдет более полное просветление сыворотки. Эта реакция свидетельствует о наличии сальмонелл. Миогда для полной типизации можно провести более углубленное изучение биохимического и серологическоro, а также патогсиного действия выделенной культуры Иа лабораторных животных (обычно на мышах). Такой типизацией преимущественно приходится заниматься 7 115
тогда, когда в организме больного животного изменяются те или иные свойства бактерий вследствие предварительной вакцинации, применения антибиотиков ит. д. и более простые методы исследования не дают возможности днагностировать возбудителя болезни. Для биохимической типизации используют или короткий ряд питательных сред, состоящий из лактозы, сахарозы, глюкозы, маннита и МПБ (для определения индола и сероводорода), или широкий ряд, содержащий, кроме перечисленных веществ, арабинозу, ксилозу, дульцит, глицериновый бульон по Штерну, среду с рамнозой по Биттеру. Результаты посева биохимического ряда проверяют через 16—24 ч после его проведения. Для ускорения учета результатов биохимической типизации на биохимическом ряду можно использовать микропробирки с объемом среды 1 мл, приготовленной на 0,2% -ном полужидком агаре или семенниковом бульоне. Перед засевом питательные среды целесообразно выдержать в термостате 2 ч при температуре 37°С. В таком случае посев даст результаты через 6—8 ч. Для анализа монорецепторного аппарата ставят пробную атглютинацию на предметном стекле с применением агглютинирующих O- и Н-монорецепторных сывороток в Неразведенном виде. на-Методикапредметноеидентификациистекло наносятмикроорганизмовкаплю сыворотки,такова:в которой эмульгируется небольшое количество микробных клеток из скошенного на пробирке агара суточного роста. Для определения О-антигена микробные клетки слёдуетния Н-антигенабрать с верхней части пробирки, а для установлегруппа изучаемой— изкультурыконденсационнойуже определенажидкости.обычнымиЕсли агглютннирующими сыворотками (гертнера, бреслау, суипестифер), то типизацию начинают с помощью О-сывороток этой же группы и в последующем переходят к анализу Н-антигена. Таким путем удается точно определить, к какому типу сальмонелл относится выделенная культура. Однако при определении необходимо учитывать возможность изменчивости монорецепторного аппарата идентифицируемых микробов. Специфические О-сыворотки выявляют групповую принадлежность сальмонелл, а специфические Н-сыворотки устанавливают тип и вид микроба. Сухие адсорбированные сыворотки перед употреблением растворя-
116
