<
юг (одну ампулу) в 1 мл или 2 мл стерильной дистилиированной воды или физиологического раствора. С рас'порсиной сывороткой (без дополнительного разведения ce) по вышеуказанной методике ставят пробную реакиню агглютинации на стекле. Для постановки пробирочной реакции агглютинации используют групповые сальмонеллезные сыворотки (гертнера, бреслау, суипестифер и т. д.), которые разводят физиологическим раствором, начиная с 1: 10— 1: 100 и кончая предельным THTPOM, указанным на ампулах или коробке, в которой они уложены. С практической точки зрения целесообразно ставить реакцию с теми сыворотками, с которыми при пробной реакции на предметном стекле были получены положительные результаты. В каждую пробирку добавляют 2—3 капли смыва.суточной культуры с физиологическим раствором из скошенного агара и выдерживают их в течение 2 4 в термостате при температуре 37°С, а затем 16—20 ч в комнатных условиях, после чего читают реакцию по обшепринятой методике. И. В. Шур (1953) считает, что результат пробирочной агглютинации при отсутствии агглютиноскопа удобно читать в зеркале, снятом с микроскопа. И. В. Шур (1970) для ускорения диагноза рекомендуст бактериологически патологический материал исследовать по следующей схеме: микроскопия кляч-препаратов, посев на три пробирки, предварительно подогретых до 38—39°С (первая с мясо-пептонным агаром, вторая —со средой Тисса, содержащей глюкозу, третья— со средой Гисса, содержащей лактозу; во вторую ин третью пробирки помещают поплавки для улавливання газа). После 12—18-часовой инкубации при 37°C учитывают результаты посевов. Получив чистую культуру, изучают морфологические и тинкториальные свойства (окраска по Граму), подвижность, культурально-биохимические свойства, ставят реакцию агглютинации на стекле с поливалентной агглютинирующей сальмонеллезной сывороткой (В, С, О) в разведении 1:10, с монотипоспенифическими агглютинирующими сыворотками (гертнера, бреслау и суипестифер) в разведении 1:50, а также с монорецепторными сыворотками. 7 Реакция преципитации. В ветеринарной практике опа широко применяется при исследовании кожепенного сырья на сибирскую язву. Ряд авторов ис117
пользовали эту реакцию для диагностики зараженностн 7 сальмонеллами пищевых продуктов. лезеМытелятизучалии выбралиреакциюследующуюпреципитацииметодикупри сесальмонел-проведе. ния. В качестве проб берут часть печени, селезенки и лимфатические узлы (поверхностный шейный или коленной складки). Из каждой пробы 2—3 кусочка стерильно засевают в пробирку с мясо-пептонным бульоном (3—5 мл), которую ставят в термостат на 20—29 ч при температуре 37°С. Затем содержимое пробирки кипятят над спиртовкой 2—3 мин, после чего фильтруют через асбестовую вату, вложенную в воронку, до получения прозрачного фильтрата. Иногда фильтрование приходится пойторять 2—3 раза. для0,2—0,4преципитациимл фильтратаи подслаиваютналиваютк пемув узкуютакойnpobupkyже объем сыворотки или, наоборот, вначале наливают сыворотку, а затем надслаивают фильтрат. При этом должна образоваться четкая граница между сывороткой и фильтратом. Учитывают реакцию в течение 1—2 ч, лучше на темном фоне при проходящем свете. При положительной реакции в месте соприкосновения фильтрата с сывороткой образуется серовато-белое кольцо. Если такоеется кольцо в течение 2 ч не появится, реакция считаВ отрицательной.качестве контроля ставят реакции: 1) сыворотка роткапреципитирующаяненммунизированного+ физиологическийкроликараствор; 2) сывоТакая + фильтрат. можность постановка реакции преципитации дает возОднако диагностировать заболевания в течение 24 y, к бактериологическомуее пока можно применятьметоду выделениялишь как сальмонелл.дополнение чев Гисто-(1951) предложили фагоднагностика.наряду a бактериологическимИ. И. Кокури:Я патологическим7 ЕВ. П. Логиновbckauamperисследованиями(1957) олпредложилиспользоватьметод ускоренной8гистоло-С этой гистологической диагностики сальмонеллеза телят и поросят. Для этой цели берут печень павших и вынужден. но убитых животных; из нее в 2—3 местах вырезают тонкие кусочки (2—2,5 мм), помещают их в широкую пробирку с 15%-ным раствором формалина и нагревают Ha спиртовке 5 мин, не доводя до бурного кипения.
118
za вос кусочки печени резуднадзамораживающем aay кротоме и окрашивают обычным способом: гематоксиHELA Мои mip gue Money Па ант RASSge ise пании в срезах легко обнаруживаются очаги некроза О ЕЕ. Фагоднагностика и Фаготиипрование возбудителей сальмонеллезов людей в последние годы находят широкое применение в медицинской практике. Н. И. Николаенко (1946) также получил строго специфический к $. cholerae-suis бактериофаг и использопал для фагодиагностики возбудителя сальмонеллеза поросят. 3. А. Норкина (1949) получила фаги, лизирующие возбудителя сальмопеллеза телят и поросят. И. В. Лихачев (1943) установил специфичрость бактериофага $5. cholerae-suis. Автор при изучении влияния бактериофага на культуру $. cholerae-suis установил через 10—15 mun, 1, 2, 3, 4, и 5 ч выращивания полный лизие в течение 1—2 ч. Через 5 ч воздействия бактериофага на культуру сальмонеллы свиней ero свойства оказались менее активными п большинство культур дало слабый рост. Bee 118 свежевыделенных культур $. cholerae-suis были лизпрованы бактернофагом при росте в контрольных. Автор делает вывод, что бактериофаг $. сПо]егае-5щ$—надежное диагностическое средство, позволяющее быстро и точно днагностировать сальмонеллез свиней. McDonagh, Smith (1958) с помощью фаготнпироваUNS установили эпидемиологическую связь вспышек TOKсиконифекции среди людей фаготипированием $. typhimurium у убойных свиней. Bullin (1960) подвергая иагностированию 908 пы Е S. typhi a if q | 298штаммов 5. typhimurium, установил, поз ВИНО рогатого скота чаще встречается фаготип » вариант |, а у голубей— Та. Однако Р. A. Цион (1963) указывает, ито еще в 1927 г. пришлось разочароваться в практической пригодности. фагоднагиостики, а может быть, и ес Ст. МВложениое выше показывает, что фагоднатностнка и фаготыипрование возбудителей сальмонеллезов молодпяка пока остатотся неизученными. В связи с этим одной из задач исследователей является изыскание диагностических фагов типирования сальмонеллезных бактерии возоулителеи болезней молодняка.
119
