В лабораторной практике из-за отсутствия доступных методов исследований роль ЛП в обмене веществ оценивают главным образом по сумме β -липопротеидов (ЛПОНП + ЛПНП).
Принцип. В основе метода лежит реакция избирательного осаждения β -липопротеидов декстрина сульфатом или гепарином в присутствии двухвалентных катионов.
Реактивы.
-
1,025 моль/л раствор МnСl ~~2~~ .
-
1%-ный раствор гепарина (1 мл должен содержать 1000 ME; имеющийся в продаже гепарин, содержащий 25 000 ME в 5 мл, разводят дистиллированной водой 1:4).
Оборудование: ФЭК или спектрофотометр; пробирки; штатив для пробирок; стеклянные палочки; пипетки.
Ход определения. 2 мл 0,025 моль/л раствора МnСI2 вносят в пробирку и прибавляют 0,2 мл сыворотки крови, перемешивают и определяют оптическую плотность пробы ( Е 1) на ФЭКе в кювете с толщиной слоя 0,5 см при длине волны 700–720 нм (красный светофильтр) против воды. Затем в кювету добавляют 0,04 мл 1%-ного раствора гепарина. Пробы тщательно перемешивают стеклянной палочкой и строго через 10 мин повторяют фотометрирование ( Е 2). Разница Е 2– Е 1 приходится на оптическую плотность, обусловленную осадком β -липопротеидов. Умножая ее на коэффициент 1164 (определен расчетным способом), получают количество β -липопротеидов в сыворотке крови в мг%.
Примечание. Кровь берут натощак. Сыворотка сохраняется 2 сут.
Клиническое значение. Основная часть липидов сыворотки крови представлена в виде гидрофильных комплексов α- и β -липопротеидов. На долю β -липопротеидов приходится 60–70% всех липидов сыворотки крови. Печень является не только местом синтеза, но и активного катаболизма ЛП, а следовательно, и выведения из организма продуктов обмена липидов (холестерина). Поэтому определение их концентрации имеет важное клинико-физиологическое значение.
Повышение концентрации β -липопротеидов в сыворотке крови отмечается при скармливании высокожировых кормов, при острых гепатитах, диабете, ожирении, гипотериозе, желтухах; снижение — чаще всего при длительном дефиците в рационе белка (протеина) или незаменимых липотропных аминокислот, когда нарушается синтез апопротеида.
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
