Белок, избежавший микробной деградации или НРБ, является вторым наиболее важным источником аминокислот для жвачных животных. Поэтому важно знать вклад нерасщепляемого белка в формировании истинно обменного белка. На основе исследований установлено, что коэффициент переваримости нераспавшегося в рубце белка (НРБ) в среднем составляет 0,8 (80 %). Эта величина была принята из-за того, что это подсчитанная, приблизительно, средняя величина истинного всасывания без аммиачного азота и НРБ, полученная «in vivo» [186]. Другие стандарты по кормлению имеют попытки подсчитать различия в переваримости НРБ по различным кормовым средствам. Например, в системе обменного протеина Великобритании [220] предполагается, что кислотный детергент нерастворимого азота (КДНА) не расщепляется в рубце и не расщепляется в тонком кишечнике. Однако данные последних исследований повысили значение КДНА для прогнозирования переваримости НРБ. Другие сообщили, что КДНА частично переварим, и что плохая взаимосвязь существует между переваримостью КДНА и азотом (N) в источниках протеина нерастительного происхождения, которые подвергались тепловой обработке [189, 221]. Так или иначе, подобные наблюдения показывают, что КДНА вероятно, является полезным индикатором не используемого азота, но это не будет полезным для оценки переваримости НРБ.
Для определения кишечной переваримости НРБ используют мобильных нейлоновых мешочков на технику (in vivo) канюлированных жвачных животных. Получаемые результаты часто зависят от размещения канюль и свойств используемых в потоке Наиболее инертных маркеров химуса. широко используется метод мобильных мешочков для определения истинного переваривания НРБ (пористость от 5 до 53 мкм) [107]. Метод состоит в том, что небольшое количество промытого недораспавшегося в рубце остатка корма после переваривания in situ помещают в меньший по размеру мешочек. Затем мешочек помещают в дуоденум канюлированного жвачного животного и возвращают или через канюлю в терминальной части подвздошной кишки – илеуме, или из фекалии. Сравнение илеального и фекального возврата мобильных мешочков дает сходные показатели переваримости НРБ. Содержимое возвращенных
мешочков тщательно промывают, чтобы удалить эндогенные и другие примеси, после чего анализируют на содержание белка и аминокислот. Поэтому определение переваримости НРБ в кишечнике этим методом рассматривается как определение истинной переваримости, а не кажущейся [186].
2.1 Деградация белка в рубце
Распавшаяся в рубце фракция белка является источником азота для бактерий и различных микроорганизмов, а не распадающаяся, в смеси с микробным белком при попадании в последующие отделы желудочно–кишечного тракта, является основным источником аминокислот для жвачных, устанавливающий уровень его продуктивности [182].
Одна из наиболее используемых «отечественных» моделей, определяющая кинетику распадаемости белка в рубце делит сырой белок (СБ) на три фракции А, В и С. Каждая фракция выражается в процентах от СБ [91]. Характеристика фракций сырого белка показана в таблице 1. Похожая модель используется и в США [186], а также ряде западных стран для нормирования рационов по расщепляемому и нерасщепляемому в рубце белку (РРБ, НРБ), расчета потребности в обменной белке (ОБ) и количестве доступных аминокислот.
Таблица 1 – Характеристика фракций сырого белка
| Фракции | Состав | Рубцовая распадаемость, %/час | Кишечная переваримость, % |
|---|---|---|---|
| А | Небелковые азотсодержащие вещества, а также небольшое количество белка, быстро покидающего капроновый мешочек (при определении переваримости в рубце у канюлированных жвачных) – in situ, это, в основном, легкорастворимые альбумины | 200–300 | не достигают кишечник |
| В | Остаток сырого белка в мешочке – in situ. Этот белок потенциально распадаем, что зависит от продолжительности его нахождения в рубце и скорости убытия из рубца | 0,1–15 | 80–100 |
| С | Не распадается в рубце, остается в мешочке после длительной инкубации in situ | 0 | 0 |
Из представленной характеристики можно видеть, что фракция А – это определенный процент общего сырого белка или протеина, является небелковым азотом и который (НБN) быстро расщепляется, а также некоторое количество истинного протеина. Данная фракция представляет расщепляемый в рубце белок (РРБ). Фракция В – это остаток нераспадаемой фракции сырого белка, с потенциально расщепляемыми белками, поэтому данную фракцию следует рассматривать с точки зрений скорости ее убытия из рубца в сычуг. Количество фракции «В» расщепляемой в рубце, определяется степенью расщепления этой фракции и степенью убытия ее из рубца.
Фракция С – процент сырого белка, который полностью не расщепляется и считается, как кормовой сырой протеин (белок), оставшийся в мешочке после длительной инкубации in situ при определенной конечной точке расщепления. Эта часть белков представлена клеточными стенками кислотно–детергентного белка и нерастворимого сырого нейтрально–детергентного нерастворимого сырого белка, которая связана с лигнином, танином и практически не переваривается в кишечнике.
На количество расщепляемого сырого белка кормов в рубце воздействуют ряд факторов: а) концентрация небелкового азота (НБN) и истинного белка; б) физические и химические свойства истинных белков (чем выше количество дисульфидных связей, тем ниже распадаемость). Компоненты небелкового азота (свободные аминокислоты, пептиды, амиды) быстро распадаются в рубце, поэтому деградация НБN, как правило, принимается за 100 % [206]. Кормовые средства, которые содержат высокие концентрации небелкового азота (НБN) в сыром белке делают небольшой вклад в нерасщепляемый белок (НРБ) животного хозяина. Когда молочному скоту скармливают рационы целиком из грубых кормов, измеряемое прохождение не аммиачного, не микробного азота (т. е. НРБ-N плюс эндогенный N) часто меньше 30 % потребления. В противоположность НБN, который по предположению расщепляется полностью, степень расщепления протеинов высоко вариабельна и приводит к вариабельным количествам протеина, который расщепляется в рубце [162, 213]. Поэтому необходимо учитывать скорость деградации белков различных кормов, которые сильно различаются по скорости
