клапанов. Из всех органов при иссечении захватывают и их капсулу. Из разных отделов желудочно-кишечного тракта вырезают небольшие кусочки размером 2×3 см и перед погружением в фиксирующую жидкость их растягивают на картон и прошивают белыми нитками.
При опухолях, очаговых некрозах, инфекционных гранулемах материал берут с измененного участка, причем вырезают более свежие очажки поражений с окружающей их здоровой тканью. При подборе материала необходимо учитывать особенности развития и локализации патологических процессов, свойственные исследуемому заболеванию.
Так, например, при чуме свиней следует брать кусочки из различных отделов головного мозга, где развиваются характерные для чумы периваскулярные клеточные лимфоидные скопления. При сальмонеллезе свиней важное диагностическое значение имеют очаговые некрозы и гранулемы в печени. Если материал не может быть быстро доставлен в лабораторию, тогда его посылают в консервированном или фиксированном виде.
Взятый для гистоисследований патматериал следует беречь от высыхания, его тотчас же следует опускать в заранее подготовленную фиксирующую жидкость. Выбор фиксатора зависит от целей и метода исследования материала. При этом объем фиксирующей жидкости должен в 10 раз превышать объем патологического материала. Если кусочки органа плавают на поверхности фиксирующей жидкости, то их покрывают одним слоем марли.
Самой доступной и простой фиксирующей жидкостью является 10%-ный раствор нейтрального формалина (1 часть продажного формалина на 9 частей водопроводной воды). Раствор формалина хорошо диффундирует в ткани. Через сутки с начала фиксации жидкость заменяют свежей, и в дальнейшем в ней материал может храниться годами. В холодное время года во избежание промерзания при пересылке материал, профиксированный в формалине, перекладывают в 30–50%-ный раствор глицерина (приготовленный на 10%-ном растворе формалина), в 70%-ный спирт или в насыщенный раствор натрия хлорида. При отсутствии формалина в качестве фиксирующей жидкости используют 96%-ный этиловый спирт или ацетон. При применении спирта толщина кусочков не должна превышать 0,5 см.
Для гистохимических исследований патологический материал можно фиксировать также в жидкости Карнуа (спирт абсолютный — 60 мл, хлороформ — 30 мл и ледяная уксусная кислота — 10 мл) или жидкость Буэна (концентрированная пикриновая кислота — 15 мл, формалин — 5 мл, ледяная уксусная кислота — 1 мл). Фиксирующую
жидкость меняют каждые сутки до тех пор, пока она не станет прозрачной. Оптимальная температура фиксации 37°С.
Патологический материал фиксируют в стеклянной посуде. На банку с кусочками органов и тканей наклеивают этикетку, на которой указывают номер или кличку животного, кому принадлежит, а внутрь нее опускают кусочек плотной бумаги или картона с написанным на нем простым (не химическим) карандашом номером животного. Если в одну посуду помещать несколько объектов исследования от разных животных, то каждый из них завязывают в марлю вместе с отдельной этикеткой.
При проведении судебно-ветеринарной экспертизы рекомендуется осуществлять патогистологические исследования органов пищеварения, дыхания, нейрогормональной, сердечно-сосудистой, мочеполовой, иммунной (включая тимус) систем, где в первую очередь и наиболее демонстративно развиваются изменения. Однако в каждом конкретном случае материал берут от тех органов, где обнаружены патологические изменения.
Результаты комплексных исследований, включая анамнез, клинические, патологоанатомические и лабораторные данные, используют при составлении экспертного заключения.
3.3. Взятие и пересылка патологического материала для бактериологического и вирусологического исследований
Поверхность органа (ткани), от которого будут брать патологический материал, на месте разреза обжигают над пламенем или прижигают нагретой металлической пластинкой. Патологический материал берут стерильными инструментами в стерильную посуду с резиновыми или притертыми пробками.
Патологический материал следует брать как можно раньше после смерти животного, особенно в теплое время года. При начавшемся разложении материал для исследования непригоден. В лабораторию патматериал отправляют в неконсервированном виде.
Если доставить патматериал в лабораторию в течение суток невозможно, то его консервируют в 30%-ном водном растворе химически чистого глицерина на физиологическом растворе, который предварительно стерилизуют в автоклаве при 120°С в течение 30 мин. В качестве консерванта можно применять также стерильное вазелиновое масло. Материал заливают консервирующей жидкостью в количестве, в 4–5 раз превышающем его объем.
При необходимости исследования на тельца Бабеша — Негри или другие вирусные включения необходимо использовать смесь Карнуа (спирт абсолютный — 60 мл, хлороформ — 30 мл и ледяная уксусная кислота — 10 мл), спирт-формол или ацетон. Продолжительность фиксации в смеси Карнуа и в ацетоне не должна превышать 2–3 ч, а по истечении этого срока патматериал перекладывают в абсолютный или 96°-ный этиловый спирт.
Для бактериологического исследования в лабораторию посылают отдельные органы, части органов, кости или целые трупы мелких животных с нарочным. Небольшие трупы животных (поросята, ягнята, телята), а также трупы мелких животных посылают целыми в непроницаемой таре.
В зависимости от вида заболевания материалом для лабораторных вирусологических исследований могут служить: стенки и содержимое афт, папулы (узелки), везикулы (прозрачные пузырьки), пустулы (гнойные пузырьки), кусочки головного мозга, печени, легких, селезенки, лимфатические узлы или кусочки других органов и тканей, в которых вирус предполагаемого заболевания содержится в наибольшем количестве.
Трубчатые кости направляют целыми с неповрежденными концами. Предварительно их тщательно очищают от мышц и сухожилий и завертывают в марлю или полотно, смоченные дезинфицирующей жидкостью (5%-ный раствор карболовой кислоты). Кости можно также посыпать поваренной солью и завернуть в полотно или марлю.
Кишечник освобождают от содержимого, а его концы перевязывают. На исследование посылают части кишечника с наиболее характерными патологическими изменениями. Их помещают в банки с 30–40%-ным водным раствором глицерина или насыщенным водным раствором натрия хлорида. Объем консервирующей жидкости должен в 5–7 раз превышать объем взятого материала.
Кал для исследования отправляют в стерильных пробирках, стаканах или банках, которые закрывают пергаментной бумагой. От трупов животных кал можно послать в отрезке невскрытого кишечника, завязанного с обоих концов.
При посылке для исследования участков кожи берут наиболее пораженные части ее размером 10×10 см и кладут в стерильную, герметически закрывающуюся посуду.
Кровь, гной, слизь, мочу, желчь и другой жидкий патологический материал для бактериологического и вирусологического исследований посылают в запаянных пастеровских пипетках, стерильных
