7.5.3. Частично-дегенерированные эмбрионы
В отдельных случаях происходит дегенерация части бластомеров, которые располагаются наряду с нормальными бластомерами. Деградированные клетки можно идентифицировать на стадии развития - морула. Они проявляются как отдельный клеточный материал и всегда находятся в не связи компактно расположенных бластомеров.
7.5.4. Дегенерированные эмбрионы
При полном разрушении бластомеров, при их неравномерном делении, задержке в развитии и др. эмбрион признается дегенерированным и непригодным к пересадке. Признаки присущие эмбрионам, находящимся на разных стадиях развития между 6 и 9 днем после овуляции, представлены в таблице 41.
7.5.5. Морфологическая характеристика эмбрионов после их извлечения
Морфологическая оценка состояния зародышей является одним из методов комплексной их оценки. Она служит для отбора неоплодотворенных яйцеклеток и определения стадии развития зародышей, а также выявления повреждений отдельных бластомеров или всего зародыша /17, 85/.
При этом учитывают следующие основные морфологические признаки полноценности зародышей: целостность и равномерность развития бластомеров, прозрачность перивителлинового пространства, целостность зоны пеллюцида соответствие стадий развития возрасту зародыша (табл. 41).
Таблица 41 - Признаки, определяющие стадию развития эмбриона
| Стадия развития | Сокращен ное название | n клеток | Ø, мкм | Признаки |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Начальная стадия дробления | 2-16 | 140-170 | Бластомеры круглой или овальной формы, располагаются свободно. | |
| МОРУЛЫ | Мо | Стадия компактизации: постепенное укрепление клеточных контактов. | ||
| Ранняя морула | Mo I | 16-32 | 140-170 | Начало компактизации: скопление клеток равномерное, бластомеры одинаковые по размеру, перивителлиновое пространство свободное от отдельных бластомеров, плазмы и других включений. |
| Поздняя морула | Mo II | 32-64 | 140-170 | Завершение компактизации: клеточный комплекс равномерный, крайние бластомеры одинаковой величины и наполнения, перивителлиновое пространство свободное от отдельных бластомеров, плазмы и других включений. |
| БЛАСТОЦИСТЫ | Бл | Образование эмбриобласта, трофобласта и бластополости. | ||
| Ранняя бластоциста | Бл I | 64-130 | 140-170 | Маленькая, преимущественно эксцентрическая бластополость в форме щели, различим эмбрио- и трофобласт. |
| Продолжение таблицы 41 | ||||
|---|---|---|---|---|
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| Поздняя бластоциста | Бл II | 64-130 | 140-200 | Эмбриобласт локализован, трофобласт равномерный, уменьшение перивителлинового пространства вследствие расширения бластополости. |
| Экспандированная бластоциста | Бл III | 64-130 | 140-200 | Эмбриобласт имеет четкие границы, из-за увеличения размеров бластополость расширяется и истончает зону пеллюцида. |
| Полностью | Эмбриобласт обозначен четко, расширение и | |||
| экспандированная | Бл IV | 130-200 | 180-220 | истончение зоны пеллюцида, |
| бластоциста | максимально увеличена бластополость. | |||
| Бластоциста выходящая из зоны пеллюцида | Бл IV | Более 200 | 180-220 | Происходит наклевывание и разрыв зоны пеллюцида. Эмбрио- и трофобласт начинает выходить из зоны. |
| Бластоциста вышедшая из зоны пеллюцида | Бл V | 200-800 | 200-800 | Шарообразная форма. Эмбрио- и трофобласт отчетливо различимы. Зона пеллюцида отсутствует. |
Для определения полноценности и жизнеспособности зародышей применяют следующие методы: а) визуальную морфологическую оценку, б) прижизненное окрашивание, в) культивирование вне организма в течение 24-28ч. цитологическую и цитогенетическую оценку. Наиболее распространена визуальная оценка под микроскопом в проходящем свете или через фазовый контрастный.
В таблице 42 представлены данные анализа морфологической оценки эмбрионов крупного рогатого скота после их извлечения в различные сроки после осеменения.
При извлечении эмбрионов на 6 день цикла около половины эмбрионов (49,7%) находилось на стадии ранней морулы, на седьмой день на стадии поздней морулы и ранней
