11.1.2. Влияние температуры среды и длительности кратковременного хранения яичников на выход и качество ранних зародышей
В задачи исследований входило определение наиболее оптимальных параметров температуры, состава среды и длительность кратковременного хранения яичников вне организма, а также влияние этих факторов на выше 7. качество ранних зародышей.
Представленные результаты исследований по изучению влияния среды для кратковременного хранения яичников на эффективность получения эмбрионов показывают, что существенных различий по данному показателю практически не было (табл. 87).
| Таблица 87 - Влияние среды хранения яичников на эффективность получения эмбрионов вне организма Количество Уровень Выход Группы Среда ооцитов, n дробления Мо-В1 | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|
| n | % | n | % | |||
| Контроль | Физ. раствор | 507 | 208 | 41,0 | 75 | 14,8 |
| Дюльбекко | 572 | 282 | 49,3 | 106 | 18,5 | |
| Опыт | Хенкса | 632 | 309 | 48,9 | 125 | 19,8 |
| ТС-199 | 538 | 241 | 44,8 | 103 | 19,1 | |
| итого | опыт | 2249 | 1040 | 46,2 | 409 | 18,2 |
Уровень дробления после оплодотворения колебался от 44,8% при использовании среды ТС-199 до 49,3% при использовании солевого раствора Дюльбекко. Аналогичные показатели получены и по выходу жизнеспособных эмбрионов. Следует отметить тот факт, что использование для кратковременного хранения физиологического раствора снизило выход полноценных эмбрионов по сравнению с остальными средами на 3,7 - 5,0%, хотя количество дробящихся зародышей находилось на уровне первых трех вред.
На эффективность кратковременного хранения яичников оказывает влияние не только состав среды, но и ее температура, а также продолжительность - - С продолжительность хранения не должна превышать 3-6 часов, а - при т С – 3часа. Невыполнение данных условий приводит к значительному снижению эффективности работы (табл. 88).
Таблица 88 - Влияние продолжительности и температуры хранения на эффективность оплодотворения ОКК в культуре in vitro
| Показатели | Температура хранения, °С | |||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 32-36 | 20-25 | 2-4 | ||||||||||
| Продолжительность хранения, ч | ||||||||||||
| ≤3 3-6 6-9 9-12 ≤3 3-6 6-9 9-12 ≤3 3-6 6-9 9-12 | ||||||||||||
| Оплодотворено ОКК, n | 273 229 186 210 209 195 182 187 139 147 165 127 | |||||||||||
| Уровень дробления, % | 55,7 38,0 30,1 27,6 50,7 50,3 50,5 49,2 48,3 52,4 57,6 46,5 | |||||||||||
| Выход Мо-Бл, % | 25,3 | 10,5 | 7,0 | 1.0 | 26,3 | 26,7 | 19,8 | 20,9 | 27,3 | 22,4 | 18,2 | 14,2 |
11.1.3. Влияние физиологического состояния доноров яичников на эффективность получения эмбрионов вне
организма
Как правило, в качестве доноров яичников используются животные и возрастов, продуктивности, на разных стадиях полового цикла и с различным функциональным состоянием яичников. Чтобы установить, каким образом физиологическое состояние доноров влияет на эффективность работы по получению эмбрионов на ранних стадиях развития вне организма нами проведены исследования по изучению влияния возраста на количество и качество эмбрионов, а также выход эмбрионов (табл. 89).
Таблица 89 - Влияние возраста доноров на количество и качество эмбриопродукции
| Показатели | Возраст доноров | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Телки случного возраста | коровы (лактация) | ||||
| 1-3 | 4-5 | 6 и более | |||
| Качество использованных доноров, n | 11 | 10 | 18 | 15 | |
| Получено ооцитов всего, n | 319 | 310 | 740 | 435 | |
| в т.ч. на донора | 29±1,4 | 31,0±2,1 | 41,1±1,1 | 29±1,8 | |
| Получено качественных ооцитов всего | n | 159 | 180 | 423 | 187 |
| % | 49,8 | 58,1** | 57,2*** | 42,9 | |
| в т.ч.на донора | 14,5±2,1 | 18,0±1,9 | 23,5+2,2 | 12,5+1,3 | |
| Оплодотворено ооцитов, n | 159 | 180 | 423 | 187 | |
| Уровень дробления | n | 101 | 107 | 278 | 102 |
| % | 63,5 | 59,4 | 65,7 | 54,5 | |
| Выход Мо-Бл | n | 31 | 51 | 90 | 28 |
| % | 19,5 | 28,3 | 21,3 | 14,9 | |
Установлено, что наибольшее количество качественных ооцитов получено от доноров 1-3 и 4-5 лактации (58,1 и 57,2% соответственно), что на 8,3 и 15.2% и на 7,4 и 14,3% выше по сравнению с телками случного возраста и коровами старше 6-й лактации. Соответственно и выход созревших ооцитов в расчете на донора оказался выше: 18,0 и 23,5% против 14,5% у телок и 12,5% у животных старше 6-й лактации.
Аналогичная зависимость наблюдалась и по уровню дробления и выходу жизнеспособных эмбрионов. Самый низкий уровень дробления оказался у доноров 6-ой и более лактации и составил 54,5%, что на 9-11,2% по сравнению с другими возрастными группами. Использование яичников от доноров старше 6-й лактации снизило выход качественных эмбрионов на 4,8% по сравнению с телками, на 13,4% по сравнению с живот-13 лактации и на 6,4% по сравнению с донорами 4-5 лактации.
