На эффективность кратковременного хранения яичников оказывает влияние не только состав среды, но и ее температура, а также продолжительность - - С продолжительность хранения не должна превышать 3-6 часов, а - при т С – 3часа. Невыполнение данных условий приводит к значительному снижению эффективности работы (табл. 88).
Таблица 88 - Влияние продолжительности и температуры хранения на эффективность оплодотворения ОКК в культуре in vitro
| Показатели | Температура хранения, °С | |||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 32-36 | 20-25 | 2-4 | ||||||||||
| Продолжительность хранения, ч | ||||||||||||
| ≤3 3-6 6-9 9-12 ≤3 3-6 6-9 9-12 ≤3 3-6 6-9 9-12 | ||||||||||||
| Оплодотворено ОКК, n | 273 229 186 210 209 195 182 187 139 147 165 127 | |||||||||||
| Уровень дробления, % | 55,7 38,0 30,1 27,6 50,7 50,3 50,5 49,2 48,3 52,4 57,6 46,5 | |||||||||||
| Выход Мо-Бл, % | 25,3 | 10,5 | 7,0 | 1.0 | 26,3 | 26,7 | 19,8 | 20,9 | 27,3 | 22,4 | 18,2 | 14,2 |
11.1.3. Влияние физиологического состояния доноров яичников на эффективность получения эмбрионов вне
организма
Как правило, в качестве доноров яичников используются животные и возрастов, продуктивности, на разных стадиях полового цикла и с различным функциональным состоянием яичников. Чтобы установить, каким образом физиологическое состояние доноров влияет на эффективность работы по получению эмбрионов на ранних стадиях развития вне организма нами проведены исследования по изучению влияния возраста на количество и качество эмбрионов, а также выход эмбрионов (табл. 89).
Таблица 89 - Влияние возраста доноров на количество и качество эмбриопродукции
| Показатели | Возраст доноров | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| Телки случного возраста | коровы (лактация) | ||||
| 1-3 | 4-5 | 6 и более | |||
| Качество использованных доноров, n | 11 | 10 | 18 | 15 | |
| Получено ооцитов всего, n | 319 | 310 | 740 | 435 | |
| в т.ч. на донора | 29±1,4 | 31,0±2,1 | 41,1±1,1 | 29±1,8 | |
| Получено качественных ооцитов всего | n | 159 | 180 | 423 | 187 |
| % | 49,8 | 58,1** | 57,2*** | 42,9 | |
| в т.ч.на донора | 14,5±2,1 | 18,0±1,9 | 23,5+2,2 | 12,5+1,3 | |
| Оплодотворено ооцитов, n | 159 | 180 | 423 | 187 | |
| Уровень дробления | n | 101 | 107 | 278 | 102 |
| % | 63,5 | 59,4 | 65,7 | 54,5 | |
| Выход Мо-Бл | n | 31 | 51 | 90 | 28 |
| % | 19,5 | 28,3 | 21,3 | 14,9 | |
Установлено, что наибольшее количество качественных ооцитов получено от доноров 1-3 и 4-5 лактации (58,1 и 57,2% соответственно), что на 8,3 и 15.2% и на 7,4 и 14,3% выше по сравнению с телками случного возраста и коровами старше 6-й лактации. Соответственно и выход созревших ооцитов в расчете на донора оказался выше: 18,0 и 23,5% против 14,5% у телок и 12,5% у животных старше 6-й лактации.
Аналогичная зависимость наблюдалась и по уровню дробления и выходу жизнеспособных эмбрионов. Самый низкий уровень дробления оказался у доноров 6-ой и более лактации и составил 54,5%, что на 9-11,2% по сравнению с другими возрастными группами. Использование яичников от доноров старше 6-й лактации снизило выход качественных эмбрионов на 4,8% по сравнению с телками, на 13,4% по сравнению с живот-13 лактации и на 6,4% по сравнению с донорами 4-5 лактации.
Таким образом, оптимальным возрастом доноров для получения ооцитов являются животные 1-3 и 4-5 лактации. Их использование позволяет получить до 59,4 - 65,7% дробящихся зародышей от числа поставленных на созревание и до 28,3 - 21,3% жизнеспособных эмбрионов, соответственно.
На следующем этапе мы изучали влияние уровня продуктивности на эффективность получения эмбрионов вне организма. В опыте и животные с продуктивностью 5-6, 6-7 и свыше 7 тыс. кг. молока за лактацию. Анализ полученных данных показывает, что показатели а и качества полноценных ооцитов и эмбрионов были выше у с продуктивностью 5-6 тыс. кг. молока. Так по количеству ооцитов донора эта разница составила 9,6 и 9,7 ооцита, а по выходу жизнеспособных ооцитов на 5,8 и 11,4% по сравнению с донорами с продуктив-67 и более 7 тыс. кг. молока за лактацию, соответственно (табл. 90).
Таблица 90 - Влияние продуктивности доноров на количество и качество эмбрионов
| Показатели | Продуктивность доноров, тыс. кг | |||
|---|---|---|---|---|
| 5-6 | 6-7 | 7 и более | ||
| Количество использованных доноров, n | 21 | 10 | 7 | |
| Получено ооцитов, всего n | 777 | 274 | 191 | |
| На донора | 37,0±2,4 | 27,4±2,1 | 27,3±2,3 | |
| Получено качественных ооцитов, всего | n | 487 | 156 | 98 |
| % | 62,7 | 56,9 | 51,3 | |
| На донора | 23,2±1,8 | 15,6+2,0 | 14,0+1,4 | |
| Оплодотворено ооцитов, n | 487 | 156 | 98 | |
| Уровень дробления | n | 298 | 102 | 58 |
| % | 61,2 | 65,4 | 59,2 | |
| Выход Мо-В1 | n | 143 | 40 | 34 |
| % | 29,4 | 25,6 | 34,7 | |
По уровню оплодотворения и выходу эмбрионов на предимплантационных стадиях можно сказать следующее. Если по уровню дробления показатели были примерно одинаковыми (59,2 - 65,4%), то по выходу зародышей на стадии морула-
