них не прижился. Аналогичные результаты были получены после пересадки эмбрионов от коровы-донора № 101. Из 8 эмбрионов 6 пересадили телкам второй группы и 2 – телкам первой группы. После их пересадки стельностей не установлено (табл. 79). У одной телки второй и у одной третьей группы получены отелы двойнями. Одна телка-реципиент второй группы на пятом месяце стельности абортировала двойней, поэтому выход телят в этой группе составил 37,5%.
Всего в результате опыта было получено 10 теляттрансплантатов, из них 9 телят герефордской породы и 1 теленок породы саллерс. В целом приживляемость эмбрионов составила 38,5%.
Таблица 79 - Результаты межпородной пересадки замороженнооттаянных эмбрионов мясных пород
| Показатель | 1 эмбрион в 1 рог матки | 2 эмбриона в 1 рог матки | 2 эмбриона в 2 рога матки | Всего |
|---|---|---|---|---|
| Число эмбрионов | 12 | 16 | 12 | 40 |
| Число реципиентов | 12 | 8 | 6 | 26 |
| Стельных реципиентов | 4 | 4 | 2 | 10 |
| Процент стельности | 33,3 | 50,0 | 33,3 | 38,5 |
| Число реципиентов стельных двойнями | - | 1 | 1 | 2 |
| Процент отелов двойнями от числа | - | 25,0 | 50,0 | 20,0 |
| Получено телят | 4 | 3 | 3 | 10 |
10.4. Получения монозиготных телят-двоен
Одним из наиболее перспективных и имеющих высокое прикладное значение биотехнологических приемов, позволяющих увеличить количество исходного эмбриоматериала, повысить эффективность воспроизводства и
селекции, является микрохирургическое разделение ранних зародышей на две или более частей /89/. Все клетки зародышевого комплекса эмбриона тотипотентные и содержат полную генетическую информацию о всем организме, вследствие чего при разобщении связей между первичными бластомерами или группами бластомеров сохраняется способность развития целого организма из разобщенных частиц. Это подтверждается обширными практическими исследованиями во всем мире.
Одна из попыток разделения зародышей на отдельные бластомеры завершилась получением пяти пар монозиготных двоен у овец /272/.
Долгое время попытки разделения эмбрионов крупного рогатого скота на стадиях развития на отдельные бластомеры, с последующим доведением их развития до стадии бластоцисты, были безуспешны. Например, у эмбрионов мышей, у которых удаляли прозрачную оболочку или она оказывалась поврежденной развитие протекало не далее стадии поздней морулы /113/. В последующем Willadsen, S.M. /272/ удалось получить идентичных близнецов крупного рогатого скота. Техника деления заключалась в извлечении зародышей из яйцеводов донора хирургическим способом на стадии 2 бластомеров (2…3-ий день), путем отделения их от прозрачной оболочки и разделением на бластомеры и размещении каждого из них в свободную оболочку. Сконструированные полуэмбрионы размещали в микроцилиндре, состоящего из физраствора и агар-агара (1%). В свою очередь, цилиндр с эмбрионами помещали в более широкий цилиндр, состоящий из одного агар-агара и хирургическим методом переносили в перевязанный яйцевод овцематки (промежуточный реципиент) на 24…48 часов после чего эмбрионы извлекали и пересаживали телкам-реципиентам. Было пересажено 52 эмбриона 13 реципиентам, по 2 в каждый рог матки. Стельными стали 9 реципиентов. После отела было получено одна тройня, две двойни и один одинцовый теленок.
Впоследствии стали применять способ деления 7-дневных
эмбрионов, на стадии поздней морулы или ранней бластоцисты на две половинки. Одновременно совершенствовались и микрохирургические манипуляции.
Несколько упрощенный способ использовали французские ученые D.Osil et. al. /230/. Семидневные эмбрионы разделяли на специальном микроманипуляторе, включающем несколько видов ииструментов для различны микрохирургических операций. Делени производили с помощью микроскальпеля через прозрачную оболочку на две половинки . Затем каждую половинку переносили в пустую оболочку неоплодотворенной яйцеклетки или дегенерированного эмбриона. После кратковременного культивирования в течение 2…4 часов пересаживали реципиенту нехирургическим способом. При таком способе разделения приживляeмocть полуэмбрионов составляла около 50%.
Несколько выше результаты были получены в опытах Y. Hahn /168/. Ими было отмечено, что деление эмбрионов не оказывает отрицательного влияния на при-живляемость эмбрионов. Так, при пересадке половинок эмбрионов стельность составила 58%, а при пересадке целых эмбрионов – 63%.
Auran T. /121/ считаtт, что решающим условием для получения монозиготных двоен является предварительный тщательный отбор эмбрионов. Только эмбрионы на стадии морулы высокого качества можно использовать для деления. Это означает, что из 10 вымытых эмбрионов только один может быть пригоден для разделения и последующего получения монозиготных двоен.
В литературе имеется сообщение о попытке в ФРГ в 1983 г. использовать этот способ в коммерческих целях одной из станций по пересадке эмбрионов крупного рогатого скота. После раздeлeния 23 эмбрионов на стадии морулы было получено 46 полуэмбрионов, которые были тут же пересажены реципиентам. У 32 реципиентов была установлена стельность (71,1%), из них у 22 реципиентов прижились обе половинки, т.е. 11 эмбрионов (48,9%).
По оценке специалистов этой станции, включение метода
