Сравнительный анализ данных подтверждает хорошо известный в практике животноводства факт резкой активизации половой функции у коров в весенний и первый летний месяцы, чему способствует удлинение светового дня и потепление. Эта зависимость у животных может меняться с изменением условий содержания и кормления. Однако изменения, происходящие в половой системе самок, не проявляются под воздействием одного или нескольких факторов, а являются следствием взаимодействия комплекса субъективных причин.
ГЛАВА 4. ИЗВЛЕЧЕНИЕ ЭМБРИОНОВ
4.1. Эффективность нехирургических методов вымывания эмбрионов
4.1.1. Влияние катетера н эффективность извлечения эмбрионов
Извлечение эмбрионов – одна из важнейших составных частей общей технологии трансплантации эмбрионов, требующая хороших навыков и тщательного подхода к выполнению данной процедуры. Если на начальных этапах развития данного метода эмбрионы извлекались или после убоя животного или путем хирургической операции, то с разработкой инструментов получение эмбрионов начали осуществлять трансцервикальным методом с помощью различных катетеров. Первые сообщения об успешном применении нехирургического метода извлечения эмбрионов у коровдоноров относятся к 1949 г. Вначале результаты по сравнению с хирургическим методом были значительно хуже. В последующем для этой цели были усовершенствованы старые и разработаны новые инструменты.
Был сконструирован жесткий металлический катетер из нержавеющей стали с внешним диаметром 4 мм и внутренним диаметром 2 мм, длиной 50 см, с надувным баллончиком на конце катетера. Такая конструкция катетера обеспечивала 100% прохождение канала шейки матки у коров, а также v крупных
телок. Процент извлечения зародышей от числа овуляций составил 56,4, или в среднем по 6,5 эмбриона на каждого донора.
Биотехнический метод бескровного получения эмбрионов должен быть простым и надежным, позволяющим с высоким результатом получать эмбрионы в условиях ферм. Был предложен каучуковый 2-канальный катетер длиной 52 см с отверстиями для введения и выведения жидкости. Катетер имеет металлический наконечник с четырьмя отверстиями и шаровидным окончанием, что обеспечивает более легкое прохождение канала шейки матки и уменьшает травмирование её слизистой. Для придания жесткости в полость катетера вставляют металлический упругий стилет. Такая конструкция прибора дает возможность получать до 7 эмбрионов на донора с хорошей суперовуляцией, или 63% от числа овуляций.
По мнению большинства исследователей и практиков, наиболее удобны резиновые катетеры. Они дают возможность получать от 4 до 6 эмбрионов, пригодных к пересадке. Однако такие катетеры иногда трудно проходят через цервикальный канал. Даже после прохождения шейки матки встречаются затруднения в проведении его глубоко в рог матки и контролировании состояния баллончика. Тем не менее, у резиновых катетеров имеются определенные преимущества по сравнению с жесткими металлическими. При их использовании снижается вероятность повреждения эндометрия. Жесткий катетер сравнительно легко проникает в канал шейки матки, но и может повредить эндометрий. При этом в промывную среду попадает кровь, что затрудняет поиск эмбрионов.
В 1980 г. был модифицирован металлический жесткий катетер, который стал представлять из себя трубку из нержавеющей стали и съемного гибкого наконечника из пластика с несколькими отверстиями. Жесткая трубка имеет два пуговчатых утолщения для фиксации трубки в канале шейки матки. Для придания жесткости съемному пластиковому наконечнику вовнутрь трубки вводят упругий стальной стилет.
Такая конструкция катетера обеспечивает удаление введенной среды из рогов матки на 93…96%, а извлечение
эмбрионов – на 56,6% от числа овуляций и получение в среднем 6,2 зародыша на донора. Недостаток катетера – отсутствие надувного баллончика, предотвращающего вытекание промывной среды через канал шейки матки. Поэтому оператору приходится постоянно пережимать рукой основание рога матки во время промывания. а это не всегда удается, особенно у коров с высокой ригидностью ректального канала.
Наиболее подходящий по конструкции оказался прибор, состоящий из металлического цилиндра диаметром 5 мм и длиной 49,5 см. Вовнутрь цилиндра с помощью специального крючка проводят катетер Фоллея, в конце которого сделано 2 отверстия. В верхушку катетера вставляют открытую металлическую упругую спираль диаметром 2,5 мм и длиной 5,5…6 см. К наружному концу катетера Фоллея прикрепляют три конца пластиковых трубок с двумя двухходовыми краниками для регулирования введения и оттока промывной жидкости. Для придания верхушке катетера упругости вставляют жесткий металлический стилет. Упругая спираль предохраняет от проникновения стилета через боковые отверстия верхушки катетера и стабилизирует рабочую часть верхушки после удаления стилета. Общая длина прибора – 60 см.
После расположения катетера в роге матки стилет удаляют и в баллон нагнетают воздух, к катетеру присоединяют систему шлангов с двумя 60-миллиметровыми шприцами. Один из них предназначен для нагнетания, второй – для отсасывания промывной жидкости.
Сбор промывной жидкости с помощью этого прибора составляет 92%, извлечение эмбрионов и яйцеклеток – до 69% от общего числа овуляций. Лучшие результаты получены при извлечении эмбрионов на 8-й день с начала охоты (76%) и несколько хуже – на 6-й и 10-й день (54 и 43% соответственно). В среднем этим прибором извлекают по 6,3 эмбриона на донора с вариациями от 0 до 29. Такая вариабельность связана, прежде всего, с навыком оператора и днем извлечения эмбрионов после первого осеменения. Так, на 6-й день извлекают 54% эмбрионов,
