2.3.3. Вызывание множественной овуляции и факторы ее обуславливающие

Важнейшим требованием для более широкого практического применения трансплантации эмбрионов является наличие надежных методов получения в достаточном количестве биологически полноценных эмбрионов.

Одним из первых идея трансплантации эмбрионов была высказана Heape W. /171, 172/.

Теоретические и практические основы гормонального вызывания суперовуляции у крупного рогатого скота были разработаны еще в 30-х годах группой советских ученых под руководством академика М.М.Завадовского /42, 28, 29/.

Однако и сегодня она является наиболее важным и непредсказуемым этапом в технологии трансплантации эмбрионов. Несмотря на многочисленные исследования во всем мире, попытки прогнозирования результатов реакции на введение экзогенных гонадотропинов не увенчались успехом. Это касается не только животных, впервые подвергаемых суперовуляторной обработке, но и проверенных, потенциальных доноров. Многие исследования подтверждают тот факт, что получение от коровы-донора большого числа зародышей не гарантирует повторения результата при последующих гормональных обработках, хотя и предполагает такую возможность.

Так, Хаслер в 1992 году заявил о том, что за последние 15 лет не было какого-либо заметного улучшения в технике вызывания суперовуляции у крупного рогатого скота. Восемнадцать лет спустя данное заявление по-прежнему остаётся в силе. Данные, подтвержденные как Американской так и Канадской ассоциациями по трансплантации эмбрионов говорят о том, что средний показатель эмбриопродуктивности на донора колеблется в пределах 5-7 и не меняется уже в течении многих лет (табл.13).

Таблица 13 - Результаты извлечения эмбрионов в США с 2002 по 2008 год

Эмбриопродуктивность мясного скота несколько выше по сравнению с молочным примерно на 1-1 5 эмбриона на вымывание. Так поданным Looney (1986) от 2048 мясных доноров было получено 6,6 эмбриона на извлечение. От 1000 коров голштинской породы получено 5.1 хороший эмбрион на каждое извлечение (Наslег et. al., 1983) Как видим, ни у мясного ни у молочного скота средний уровень извлеченных эмбрионов за предшествующие годы не изменился.

На выход эмбрионов влияет целый ряд субъективных факторов, трудно поддающихся систематизации. Поэтому их учет при подборе доноров и организации работы в некоторой мере оказывают влияние на эффективность суперовуляции /63, 90/.

Известные в настоящее время способы индуцирования суперовуляции у коровы-донора не дают желаемого результата у значительного числа животных. Около 20-25% животных не реагируют на гормональную обработку, а у некоторых реагировавших животных на гонадотропин наблюдается минимальное или чрезмерное число овуляций, что также не гарантирует получение достаточного числа нормальных эмбрионов. Престимуляция яичников и получение большого числа овуляций сопровождается снижением оплодотворяемости, повышением числа дегенерированных эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток.

Для гормональной обработки коров с целью вызывания суперовуляции применяются препараты, полученные либо из сыворотки крови беременных животных (сывороточные гонадотропины), либо из гипофизов самок (гипофизарные гонадотропины). Основной недостаток сывороточных гонадотропинов – растянутость овуляционного процесса и возможность возникновения у обработанных животных фолликулярных кист вследствие длительного лютеолитического эффекта. Кроме того, сывороточные гонадотропины химически соединены с сиаловыми кислотами и имеют нерегулируемый длительный период распада. Гипофизарные препараты представляют собой очищенную от белков вытяжку из задней доли гипофиза и содержат смесь ФСГ и ЛГ.

Длительная инактивация СЖК в крови животных создает определенные затруднения при вызывании суперовуляции у коров-доноров.

Некоторые исследователи заметили, что наличие СЖК в крови коровы после овуляции может оказывать отрицательное влияние на развитие зародыша. Остающиеся после вызывания суперовуляции гонадотропины вызывают рост второй волны фолликулов, которые не овулируют, а превращаются в кисты, что приводит к выделению значительного количества эстрогенов в организме. Поэтому при вымывании на 7…8 день после осеменения получают значительное число дегенерированных эмбрионов.

Для нейтрализации и прекращения действия гонадотропина СЖК начали использовать сыворотку, содержащую антитела против СЖК. При введении антисыворотки в дозе 600…1000 ИЕ через 105…106 часов после инъекции СЖК от 58 коров в среднем было получено по 4,9 эмбриона, пригодных для трансплантации, против 3 в контрольной группе (51 корова).

Введение антисыворотки на СЖК в день осеменения коров-доноров повышает количество овуляций на 24,5% и на 30% снижает вариабельность в числе овуляций в расчете на каждого донора. Антисыворотка нейтрализует остаточную ФСГ-