57,4% (Р<0,001) дробящихся зародышей, из 8% Мо-В1, что составило 21% от всех ооцитов в группе. Увеличение времени совместного культивирования до 24 часов снизило на 2,6% количество оплодотворенных ооцитов и на 8,5% Мо-В1. Выход ранних зародышей на предимплатационных стадиях, по отношению к общему количеству поставленных в первом опыте ооцит-кумулюсных комплексов, снизился на 5,1%.
Таким образом, оптимальная продолжительность совместного инкубирования спермотозоидов с яйцеклетками составляет 18-20 часов и которая позволяет получать 57,4% дробящихся и увеличить выход зародышей на стадии морулабластоцистадо 36,8%.
Таблица 107 - Выход жизнеспособных эмбрионов в зависимости от продолжительности оплодотворения
| Продолжительность совместной инкубации спермы с ооцитами, ч | Оплодотворено ооцитов, п | Дробящихся зародышей | Выход Мо-В1 | ||
|---|---|---|---|---|---|
| n | % | n | % | ||
| 3,0 | 174 | 26 | 14,9 | 5 | 19,2 |
| 3,1-6,0 | 187 | 32 | 17,1 | 6 | 18,7 |
| 6,1-9,0 | 180 | 50 | 27,8 | 11 | 22,0 |
| 9,1-12,0 | 191 | 62 | 32,5 | 20 | 32,2 |
| 12,1-15,0 | 160 | 64 | 40,0 | 19 | 29,7 |
| 15,1-18,0 | 171 | 81 | 47,4 | 26 | 32,1 |
| 18,1-20,0 | 204 | 117 | 57,4 | 43 | 36,8 |
| 20,1-24,0 | 157 | 86 | 54,8 | 25 | 29,1 |
11.4. Сравнительная эффективность получения эмбрионов путем трансцервикальной аспирации (ОРU) и из яичников доноров убитых на мясокомбинате
Выделение ооцитов проводилось одним из двух методов: 1 - трансцервикальное отсасывание ооцитов из фолликулов доноров с использованием ультразвукового зонда или его еще
называют ультросонографом; 2 - из яичников убитых на мясокомбинате коров.
Полученные эмбрионы пересаживались или подвергались криокон-сервации. Результаты этой работы представлены в таблице 108, из которой видно, что за 418 операций по отсасыванию было получено всего 3429 ооцит-кумулюсных комплексов (ОКК) или по 8,2 ОКК на одну операцию. Пригодными для постановки на дальнейшее созревание оказалось 2092 ОКК или 61%. После оплодотворения и культивирования ранних зародышей в течение 7...9 дней было получено 717 жизнеспособных эмбрионов, что составило 1,72 зародыша на операцию.
Таблица 108 - Результаты работы по получению эмбрионов вне организма с использованием технологии ОРU
| Количество операций, п | Получено ОКК | Пригодных для созревания | Получено эмбрионов | |||
|---|---|---|---|---|---|---|
| всего | на одну операци ю | N | % | всего | на одну операцию | |
| ОРU 418 | 3429 | 8,2 | 209 2 | 61 | 717 | 1,72 |
| м/к 77 | 6890 | 89,5 | 489 8 | 71,1 | 1768 | 22,9 |
Анализ эффективности использования ооцитов, полученных из яичников коров, убитых на мясокомбинате, показывает, что всего за 77 циклов (одна поездка на м/к) получено 6890 ооцитов или 89,5 ооцита на один цикл. Из них пригодных для дальнейшего созревания оказалось 4898 или 71,1%, что на 10,1% выше по сравнению с трансцервикальным получением женских гамет.
Из поставленных на созревание ооцитов было получено 1768 жизнеспособных эмбрионов или 22,9 на один цикл. Выход
полноценных зародышей от числа пригодных ооцитов в первом случае составил 34,3%, во втором - 36,1%.
Для получения одного эмбриона при использовании трансцервикального метода затрачивается 4,8 ооцита, а мясокомбината - 3,9, что, по всей видимости, можно объяснить возможностью более тщательного отбора ооцитов в случае использования яичников с мясокомбината в связи с их большим количеством. Но достоверных различий в этом вопросе не установлено.
В таблице 109 показаны результаты пересадки свежих и замороженно-оттаянных эмбрионов, полученных in vitro. Из 209 пересадок свежих зародышей стельными оказались 99 реципиентов (47,4%). Из 89 пересадок замороженно-оттаянных эмбрионов стельными стали 37 реципиентов (41,6%).
При пересадке эмбрионов, полученных из яичников коров, убитых на мясокомбинате, из 78 свежих эмбрионов прижилось 35 (44,9%), из 47 пересадок замороженно-оттаянных эмбрионов стельными стали 20 реципиентов или 42,5%.
Таким образом, анализ результатов работы по получению эмбрионов вне организма показывает достаточно высокую эффективность как одного, так и второго способа получения ооцитов, их созревания и оплодотворения.
Таблица 109 - Результаты пересадок эмбрионов, полученных с использованием технологии ОРU
| Пересадка свежих эмбрионов | Пересадка з/о эмбрионов | ||
|---|---|---|---|
| метод получения ооцитов | процент стельностеи, п-% | количество пересадок | процент стельностеи, п- % |
| ОРU (209) | 99-47,4 | 89 | 37-41,6 |
| м/к (78) | 35-44,9 | 47 | 20-42,5 |
