9.1.17. Качество желтого тела

Качество желтого тела, при пересадке эмбрионов определяемое визуально или же ректальной пальпацией по ряду исследований не коррелирует с уровнем приживляемости (Coleman , 1987 Hasler, 1987, Donaldson et. al., 1985a, Looney et. al., 1984). Не установлено также взаимосвязи между объемом желтого тела, измеренного с помощью ультразонда, и уровнем приживляемости (Spell et. al., 2001).

9.1.18. Влияние биопсии при определении пола на результативность эмбриопересадки

Общеизвестно, что соотношение полов, как у человека, так и у животных с растениями относительно постоянно и близко 1:1. Соотношение полов в потомстве очень важное обстоятельство для нормального самовоспроизведения видов. С разработкой и развитием технологии трансплантации эмбрионов и ее широким внедрением в практику разведения и селекции крупного рогатого скота, главная особенность которого молочная продуктивность, является признаком ограниченным полом, исследования по определению пола животных на стадии раннего эмбриогенеза стало одной из первоочередных задач в развитии биотехнологии /375/.

Есть несколько путей получения потомства заданного пола. Общепринятым фактом является то, что женский организм несёт набор ХХ хромосом, а мужской ХУ. В связи, с чем у исследователей данной проблемы возникла идея разделения Х и У хромосом, что позволило бы регулировать пол путем осеменения самок семенем с набором Х или У хромосом, с получением потомства заданного пола. Основной для разделения Х и У хромосом явилось то, что У– хромосомы имеют меньшую массу и размеры (2,22 мкм) по сравнению с Х- хромосомами (6,17 мкм). Исходя из этого с целью разделения спермиев с Х и У-хромосомами применялось

центрорегулирование и сидиментация однако в большинстве случаев результаты опытов не подтвердили ожиданий в связи с чем данные методы не нашли широкого распространения.

Не дало положительных результатов использования электрофореза и метода фильтрации спермиев.

В 50-е годы нашего столетия, после того как был обнаружен НУ-антиген начали разрабатываться иммунологические методы, которые показали более высокие результаты. Так, в исследованиях Booman et. al. /132/ при оценке 112 эмбрионов получена точность от 73 до 77%.

Однако отмечается, что сама процедура может оказать воздействие на последующую жизнеспособность эмбрионов.

В итоге что разработанные методы по разделению спермиев не нашли широкого применения в производстве /133/.

В связи с разработкой и внедрением в практику метода трансплантации эмбрионов появилась возможность определения пола ранних зародышей и первая такая попытка была предпринята Gardner R. et. al. /161/, которые устанавливали пол зародышей кроликов по наличию или отсутствию полового хроматика.

После того как было установлено, что удаление части клеток трофобласта не оказывает отрицательного воздействия на жизнеспособность эмбрионов их пол начали определять с помощью хромосомного анализа отторгнутых клеток трофобласта /123/.

Точность метода составила в среднем 68…70%. Недостаток данного метода заключается в том, что для анализа пригодны только эмбрионы поздних (12…15 суток) стадии развития, что снижало эффективность их пересадки и криоконсервации.

В 1978 были проведены первые работы по определению пола у 6…7 дневных эмбрионов /132/.

Было отмечено, что хотя отделение трофобласта не имеет негативного влияния на жизнеспособность эмбриона но недостаток митотических клеток лимитирует надежность метода которая не превышает в среднем 50%.

Современные методы определения пола зародышей основаны на анализе ДНК.

Использование полимеразой цепной реакции значительно расширило возможности метода, точность которого в лучших лабораториях достигает 90-95%, а приживляемость достигает 55,6% по свежим эмбрионам и 44,4% по заморожено-оттаянным /227/.

Таким образом, последние разработки научных лабораторий вплотную подошли к тому, чтобы данные методы нашли широкое применение в практике разведения и селекции крупного рогатого скота.

В последнее время экономические условия в странах с развитым животноводством все чаще заставляют фермеров решать вопрос определения пола эмбрионов на ранних стадиях их развития. Современные достижения биотехнологии позволяют делать это с достаточно высоким уровнем достоверности (93…95%).

В наших исследованиях мы пытались изучить влияние биопсии клеток при определении пола на дальнейшую жизнеспособность эмбрионов. В таблице 62 представлены результаты определения пола у ранних зародышей в зависимости от стадии их развития и качества эмбрионов.

Таблица 62 - Результаты определения пола ранних зародышей