бластоциста лучшие показатели отмечались у доноров с продуктивностью более 7 тыс. кг. молока. При использовании таких доноров выход эмбрионов на данной стадии увеличивался на 5,3 и 4 по сравнению с донорами с продуктивностью 5-6 и 6-7 тыс. кг молока за лактацию.
Таблица 91 - Использование животных, больных маститом и эндометритом, в качестве доноров ооцитов
| Показатели | группы животных | |||
|---|---|---|---|---|
| здоровые | эндометрит | мастит | ||
| Количество использованных животных, гол/ | 17 | 17 | 9 | |
| Получено ооцитов, всего, n | 425 | 629 | 300 | |
| Получено ооцитов на донора, n | 25±0,73 | 37,Ш,32 | 33,3±2,21 | |
| Получено качественных ооцитов, всего | n | 268 | 241 | 161 |
| % | 63,0*** | 38,3 | 53,7 | |
| Получено качественных ооцитов на донора, (n) | 15,8±0, 71 | 14,2+1,81 | 17,8±1,87 | |
| Оплодотворено ооцитов | 150 | 241 | 161 | |
| Уровень дробления | n | 91 | 109 | 91 |
| % | 60,7 | 45,2 | 56,5 | |
| Выход Мо-В-1 | n | 34 | 16 | 22 |
| % | 22,7* | 6,6 | 13,7 | |
Установлено, что заболевание эндометритом достоверно снижает выход ооцитов на 24,7%, а заболевание маститом на 9,3% по с контрольной группой. Выявлено, что уровень оплодотворения ооцитов, полученных от доноров заболевших маститом практически не отличался от контрольной группы и составил 56,5% в (контроле - 60,7%). В время выход морулбластоцист снижался на 9% (22,7% в контроле и л в опыте). Заболевание эндометритом снижало как уровень дробления (на 15,5%), так и выход предимплантационных зародышей (на 16,1%).
Одним из наиболее важных показателей влияющих на эффективность дальнейшей работы по получению эмбрионов в
культуре in vitro от созревания до оплодотворения является морфофункциональное состояние яичников. До настоящего времени идет спор о том, на какой стадии полового цикла лучше всего получать ооциты. Проведенные и проводимые исследования по этому вопросу однозначного ответа не дали. Получаемые данные нестабильны и носят противоречивый характер.
Исследования по оценке эффективности получения эмбрионов в культуре in vitro в зависимости от функционального состояния яичников показали, что по уровню дробления значительно более высокие результаты попри использовании ооцитов из яичников первых 3-х групп (на фолликулярной и лютеиновой фазе полового цикла, а также с желтым телом беременности). Использование яичников с персистентным желтым те-с кистой и с гипофункцией резко снижало уровень дробления. Так, средний уровень дробления при использовании яичников первых трех составлял 58,1%, то последних 3-х всего лишь 33%, то есть на 25,1% (табл. 92).
Таблица 92 - Влияние физиологического состояния яичников на эффективность получения эмбрионов вне организма
| Физиологическое состояние яичников | Показатели | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| оплодотво ренно, n | уровень дробления | Выход Мо-Бл | |||
| n | % | n | % | ||
| Фолликулярная фаза | 100 | 61 | 61,0 | 33 | 33,0 |
| Лютеиновая фаза | 103 | 59 | 57,3 | 25 | 24,3 |
| Желтое тело цикла | 95 | 53 | 55,8 | 20 | 21,1 |
| Персистентное желтое тело | 112 | 36 | 32,1 | 4 | 3,6 |
| Киста | 103 | 40 | 38,8 | 3 | 2,9 |
| Гипофункция | 27 | 4 | 14,7 | - | - |
Аналогичная картина наблюдалась и по выходу жизнеспособных эмбрионов. Выход морул и бластоцист у яичников на фолликулярной стадии составил 33% и превысил
аналогичный показатель яичников в лютеиновую на 8,7%, с желтым телом беременности - на 11,9%, с персистентным желтым телом - на 29,4%, с кистозным преобразованием - на 30,1%. При использовании яичников с гипофункцией полноценных эмбрионов не получено.
Установлено, что наиболее эффективным в наших исследованиях оказалось использование яичников в фолликулярной фазе. Однако следует отметить, что в работу необходимо включать весь полученный биоматериал, несмотря на его морфофункциональное состояние, особенно если донор I в себе высокоценную генетику.
С целью изучения оплодотворяемости ооцитов в зависимости от их содержания в одном яичнике было сформировано три группы: I - яичники, из которых выделено менее 10 ооцитов, II - от 10 до 20, III - более 20 клеток . Анализ данных свидетельствует, что наиболее эффективной по уровню дробления оказалась группа с количеством ооцитов от 10 до 20 на один яичник - на 5,7% по сравнению с третьей и на 11,4% по сравнению с первой группой (табл. 93).
Таблица 93 - Оплодотворяемость ооцитов в зависимости отих среднего количества в яичнике
| Группы ооцито | Кол-во ооцитов в яичнике | Количество прокультив ированных ооцитов, п | Количество оплодотворе нных ооцитов, п | Уровень дробления | Выход Мо- Бл | ||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| n | % | n | % | ||||
| I | <10 | 154 | 154 | 73 | 47,4 | 42 | 27,3 |
| II | 10-20 | 250 | 250 | 147 | 58,8 | 53 | 21,2 |
| III | >20 | 290 | 290 | 154 | 53,1 | 64 | 22,1 |
По выходу жизнеспособных эмбрионов более высокие результаты получены при использовании яичников I группы. Выход зародышей на предимплантационных стадиях в этой группе превышал на 6,1 и 5,2% вторую и третью группы, соответственно.
