Таким образом, оптимальным возрастом доноров для получения ооцитов являются животные 1-3 и 4-5 лактации. Их использование позволяет получить до 59,4 - 65,7% дробящихся зародышей от числа поставленных на созревание и до 28,3 - 21,3% жизнеспособных эмбрионов, соответственно.
На следующем этапе мы изучали влияние уровня продуктивности на эффективность получения эмбрионов вне организма. В опыте и животные с продуктивностью 5-6, 6-7 и свыше 7 тыс. кг. молока за лактацию. Анализ полученных данных показывает, что показатели а и качества полноценных ооцитов и эмбрионов были выше у с продуктивностью 5-6 тыс. кг. молока. Так по количеству ооцитов донора эта разница составила 9,6 и 9,7 ооцита, а по выходу жизнеспособных ооцитов на 5,8 и 11,4% по сравнению с донорами с продуктив-67 и более 7 тыс. кг. молока за лактацию, соответственно (табл. 90).
Таблица 90 - Влияние продуктивности доноров на количество и качество эмбрионов
| Показатели | Продуктивность доноров, тыс. кг | |||
|---|---|---|---|---|
| 5-6 | 6-7 | 7 и более | ||
| Количество использованных доноров, n | 21 | 10 | 7 | |
| Получено ооцитов, всего n | 777 | 274 | 191 | |
| На донора | 37,0±2,4 | 27,4±2,1 | 27,3±2,3 | |
| Получено качественных ооцитов, всего | n | 487 | 156 | 98 |
| % | 62,7 | 56,9 | 51,3 | |
| На донора | 23,2±1,8 | 15,6+2,0 | 14,0+1,4 | |
| Оплодотворено ооцитов, n | 487 | 156 | 98 | |
| Уровень дробления | n | 298 | 102 | 58 |
| % | 61,2 | 65,4 | 59,2 | |
| Выход Мо-В1 | n | 143 | 40 | 34 |
| % | 29,4 | 25,6 | 34,7 | |
По уровню оплодотворения и выходу эмбрионов на предимплантационных стадиях можно сказать следующее. Если по уровню дробления показатели были примерно одинаковыми (59,2 - 65,4%), то по выходу зародышей на стадии морула-
бластоциста лучшие показатели отмечались у доноров с продуктивностью более 7 тыс. кг. молока. При использовании таких доноров выход эмбрионов на данной стадии увеличивался на 5,3 и 4 по сравнению с донорами с продуктивностью 5-6 и 6-7 тыс. кг молока за лактацию.
Таблица 91 - Использование животных, больных маститом и эндометритом, в качестве доноров ооцитов
| Показатели | группы животных | |||
|---|---|---|---|---|
| здоровые | эндометрит | мастит | ||
| Количество использованных животных, гол/ | 17 | 17 | 9 | |
| Получено ооцитов, всего, n | 425 | 629 | 300 | |
| Получено ооцитов на донора, n | 25±0,73 | 37,Ш,32 | 33,3±2,21 | |
| Получено качественных ооцитов, всего | n | 268 | 241 | 161 |
| % | 63,0*** | 38,3 | 53,7 | |
| Получено качественных ооцитов на донора, (n) | 15,8±0, 71 | 14,2+1,81 | 17,8±1,87 | |
| Оплодотворено ооцитов | 150 | 241 | 161 | |
| Уровень дробления | n | 91 | 109 | 91 |
| % | 60,7 | 45,2 | 56,5 | |
| Выход Мо-В-1 | n | 34 | 16 | 22 |
| % | 22,7* | 6,6 | 13,7 | |
Установлено, что заболевание эндометритом достоверно снижает выход ооцитов на 24,7%, а заболевание маститом на 9,3% по с контрольной группой. Выявлено, что уровень оплодотворения ооцитов, полученных от доноров заболевших маститом практически не отличался от контрольной группы и составил 56,5% в (контроле - 60,7%). В время выход морулбластоцист снижался на 9% (22,7% в контроле и л в опыте). Заболевание эндометритом снижало как уровень дробления (на 15,5%), так и выход предимплантационных зародышей (на 16,1%).
Одним из наиболее важных показателей влияющих на эффективность дальнейшей работы по получению эмбрионов в
культуре in vitro от созревания до оплодотворения является морфофункциональное состояние яичников. До настоящего времени идет спор о том, на какой стадии полового цикла лучше всего получать ооциты. Проведенные и проводимые исследования по этому вопросу однозначного ответа не дали. Получаемые данные нестабильны и носят противоречивый характер.
Исследования по оценке эффективности получения эмбрионов в культуре in vitro в зависимости от функционального состояния яичников показали, что по уровню дробления значительно более высокие результаты попри использовании ооцитов из яичников первых 3-х групп (на фолликулярной и лютеиновой фазе полового цикла, а также с желтым телом беременности). Использование яичников с персистентным желтым те-с кистой и с гипофункцией резко снижало уровень дробления. Так, средний уровень дробления при использовании яичников первых трех составлял 58,1%, то последних 3-х всего лишь 33%, то есть на 25,1% (табл. 92).
Таблица 92 - Влияние физиологического состояния яичников на эффективность получения эмбрионов вне организма
| Физиологическое состояние яичников | Показатели | ||||
|---|---|---|---|---|---|
| оплодотво ренно, n | уровень дробления | Выход Мо-Бл | |||
| n | % | n | % | ||
| Фолликулярная фаза | 100 | 61 | 61,0 | 33 | 33,0 |
| Лютеиновая фаза | 103 | 59 | 57,3 | 25 | 24,3 |
| Желтое тело цикла | 95 | 53 | 55,8 | 20 | 21,1 |
| Персистентное желтое тело | 112 | 36 | 32,1 | 4 | 3,6 |
| Киста | 103 | 40 | 38,8 | 3 | 2,9 |
| Гипофункция | 27 | 4 | 14,7 | - | - |
Аналогичная картина наблюдалась и по выходу жизнеспособных эмбрионов. Выход морул и бластоцист у яичников на фолликулярной стадии составил 33% и превысил
