Для гормональной обработки коров с целью вызывания суперовуляции применяются препараты, полученные либо из сыворотки крови беременных животных (сывороточные гонадотропины), либо из гипофизов самок (гипофизарные гонадотропины). Основной недостаток сывороточных гонадотропинов – растянутость овуляционного процесса и возможность возникновения у обработанных животных фолликулярных кист вследствие длительного лютеолитического эффекта. Кроме того, сывороточные гонадотропины химически соединены с сиаловыми кислотами и имеют нерегулируемый длительный период распада. Гипофизарные препараты представляют собой очищенную от белков вытяжку из задней доли гипофиза и содержат смесь ФСГ и ЛГ.
Длительная инактивация СЖК в крови животных создает определенные затруднения при вызывании суперовуляции у коров-доноров.
Некоторые исследователи заметили, что наличие СЖК в крови коровы после овуляции может оказывать отрицательное влияние на развитие зародыша. Остающиеся после вызывания суперовуляции гонадотропины вызывают рост второй волны фолликулов, которые не овулируют, а превращаются в кисты, что приводит к выделению значительного количества эстрогенов в организме. Поэтому при вымывании на 7…8 день после осеменения получают значительное число дегенерированных эмбрионов.
Для нейтрализации и прекращения действия гонадотропина СЖК начали использовать сыворотку, содержащую антитела против СЖК. При введении антисыворотки в дозе 600…1000 ИЕ через 105…106 часов после инъекции СЖК от 58 коров в среднем было получено по 4,9 эмбриона, пригодных для трансплантации, против 3 в контрольной группе (51 корова).
Введение антисыворотки на СЖК в день осеменения коров-доноров повышает количество овуляций на 24,5% и на 30% снижает вариабельность в числе овуляций в расчете на каждого донора. Антисыворотка нейтрализует остаточную ФСГ-
активность CЖK, прекращает дальнейший рост фолликулов, нормализует эстрогенный фон в организме и значительно сокращает продолжительность проявления эструса у животныхдоноров.
Еще одной немаловажной причиной низкой эффективности СЖК для вызывания суперовуляции по данным некоторых авторов является соотношение фолликулостимулирующего (ФСГ) и лютеинизирующего (ЛГ) гормонов.
Для получения удовлетворительных результатов гормональную обработку проводили в разные фазы полового цикла, При этом применение СЖК в лютеиновую фазу оказалось безуспешным, а при его использовании в фолликулярную, на 1617 день, множественная овуляция хотя и наблюдалась у большинства животных, однако выход жизнеспособных эмбрионов был крайне низким
В некоторых опытах для вызывания суперовуляции применяли многократное введение ГСЖК. Но такое применение гонадотропина так же не имела преимуществ по сравнению с однократной обработкой: охота у коров часто наступала преждевременно.
J.M.Scrееnаn /251/ в течение 9…10 дней инъецировали донорам прогестерон, который на фоне эстрогенов обеспечил синхронный лизис желтого тела, а в сочетании с ГСЖК, удовлетворительный уровень овуляции. Однако, наряду с хорошим суперовуляторным эффектом наблюдалось снижение уровня приживляемости полученных эмбрионов.
Применение ГСЖК в сочетании с хориогонинами /88/ и эстрадиол-бензоатом обеспечивало получение в среднем по 15 эмбрионов на донора с высоким процентом дегенерированных зародышей до 70%.
В результате многочисленных работ по стимулированию суперовуляции установлено, что с увеличением дозы гонадотропина СЖК увеличивается средний уровень суперовуляции. Так, после введения 1000 ИЕ и даже 2000 ИЕ СЖК не реагирует суперовуляцией от 33,5 до 63,4%,
соответственно, тогда как при 3000 ИЕ СЖК процент животных, реагирующих суперовуляцией, повышается до 80,0%.
С повышением дозы СЖК до 4000 ИЕ среднее число овуляций повышалось до 19,9 с одновременным снижением качества эмбрионов. Дальнейшее повышение дозы СЖК до 6000…7000 ИЕ сопровождалось уменьшением числа реагирующих животных до 36,2% и увеличением числа неовулировавших фолликулов и снижением оплодотворяемости яйцеклеток до 18,9%. В результате сделан вывод, что оптимальной дозой СЖК является 3000 ИЕ.
По данным литературы, часто практикуется многократное использование коров в качестве доноров эмбрионов, однако, повторное введение ГСЖК вызывает у отдельных животных иммунный ответ образование антител, ингибирующих ее действие. В исследованиях Gordon J. et al. /163/ были проведены две обработки коров препаратом СЖК и после первой получили 15,6, а после второй 11,3 овуляции на донора.
При повторных обработках коров препаратом СЖК с 6- недельным перерывом было отмечено снижение числа овуляций. Так, после первой обработки получено в среднем 10, второй – 7, третьей – 2 и четвертой – 0,8 овуляций на одного реагирующего донора.
Несмотря на общую тенденцию снижения числа овуляций с увеличением числа обработок наблюдается повышение индивидуальной изменчивости по этому показателю. Повидимому, повторные инъекции ГСЖК не у всех животных стимулируют образование антител на ГСЖК и тем самым инактивируют его действие.
Применяя СЖК в сочетании с антисывороткой стабильные результаты можно получить после двух обработок 7,8 и 8,2 овуляций и соответственно 6,8 и 7,7 пригодных для пересадки эмбрионов. Дальнейшее увеличение кратности обработок СЖК+антисыворотка не снижает число овуляций (8,8) на одного реагирующего донора, но уменьшает число коров, реагирующих суперовуляцией с 90 до 50% и выход нормальных эмбрионов с 6,8 до 2,8 на донора.
