соответственно, тогда как при 3000 ИЕ СЖК процент животных, реагирующих суперовуляцией, повышается до 80,0%.
С повышением дозы СЖК до 4000 ИЕ среднее число овуляций повышалось до 19,9 с одновременным снижением качества эмбрионов. Дальнейшее повышение дозы СЖК до 6000…7000 ИЕ сопровождалось уменьшением числа реагирующих животных до 36,2% и увеличением числа неовулировавших фолликулов и снижением оплодотворяемости яйцеклеток до 18,9%. В результате сделан вывод, что оптимальной дозой СЖК является 3000 ИЕ.
По данным литературы, часто практикуется многократное использование коров в качестве доноров эмбрионов, однако, повторное введение ГСЖК вызывает у отдельных животных иммунный ответ образование антител, ингибирующих ее действие. В исследованиях Gordon J. et al. /163/ были проведены две обработки коров препаратом СЖК и после первой получили 15,6, а после второй 11,3 овуляции на донора.
При повторных обработках коров препаратом СЖК с 6- недельным перерывом было отмечено снижение числа овуляций. Так, после первой обработки получено в среднем 10, второй – 7, третьей – 2 и четвертой – 0,8 овуляций на одного реагирующего донора.
Несмотря на общую тенденцию снижения числа овуляций с увеличением числа обработок наблюдается повышение индивидуальной изменчивости по этому показателю. Повидимому, повторные инъекции ГСЖК не у всех животных стимулируют образование антител на ГСЖК и тем самым инактивируют его действие.
Применяя СЖК в сочетании с антисывороткой стабильные результаты можно получить после двух обработок 7,8 и 8,2 овуляций и соответственно 6,8 и 7,7 пригодных для пересадки эмбрионов. Дальнейшее увеличение кратности обработок СЖК+антисыворотка не снижает число овуляций (8,8) на одного реагирующего донора, но уменьшает число коров, реагирующих суперовуляцией с 90 до 50% и выход нормальных эмбрионов с 6,8 до 2,8 на донора.
Следовательно, обрабатывать препаратом СЖК+антисыворотка более двух раз нецелесообразно. В этом случае суперовуляцию следует вызывать препаратом ФСГ-п. При многократной обработке (5…б и более раз) доноров ФСГ-п число овуляций и нормальных эмбрионов не снижается, а у отдельных коров даже повышается. Кроме того, улучшается качество эмбрионов и их приживляемость, по сравнению с СЖК или CЖK+антисывороткой.
В литературе имеются сообщения о применении СЖК в сочетании с рилизинг-гормоном (Гн-РГ), который инъецировали под второе осеменение. Оказалось, что Гн-РГ заметно снижает число неовулировавших фолликулов и тем самым повышает уровень овуляций. И тем самым способствует повышению оплодотворяемости яйцеклеток и увеличению выхода нормальных эмбрионов, сокращает период овуляции и охоты. Препарат действует непосредственно на гипофиз и обеспечивает дополнительный выброс в кровь лютеинизирующего гормона (ЛГ) и тем самым компенсирует его недостаток.
В последнее время подавляющее большинство исследователей во всем мире отмечают преимущество гипофизарных гонадотропинов перед плацентарными при вызывании суперовуляции у крупного рогатого скота /113/. Это связано, главным образом, с длительностью инактивации ГСЖК (6 дней и более).
Гонадотропины гипофизарного происхождения в крови животных инактивируются через 5…6 часов и поэтому обычно их вводят животным 2 раза в день с интервалом между инъекциями 12 часов в течение 4…5 дней. Предпринимаются попытки упростить такой трудоемкий режим вызывания суперовуляции без снижения результативности. С этой целью применяли однократную инъекцию ФСГ с пролонгаторами, такими как карбоксиметил, целлюлоза и поливинил-пиролидон, но они оказались малоэффективными. В других исследованиях была получена одинаковая реакция яичников на ФСГ при вдвое меньшем числе инъекций (5 из 10 или 4 из 8) при использовании его в 3,2% растворе желатина.
Во многих странах применяются препараты с соотношением ФСГ к ЛГ (5:1). Однако Гордон А. /11/ утверждают, что хроматографически очищенный ФСГ обеспечивает получение до 7,0 нормальных эмбрионов на донора. При применении коммерческого ФСГ получают в среднем по 4,5 качественных эмбрионов. Добавление к очищенному ФСГ препарата ЛГ уменьшает число качественных эмбрионов с 7,8 до 4,4. Уровень прогестерона в крови в день охоты после применения коммерческого ФСГ в среднем составляло 0,88 нг/мл, а очищенного ФСГ – 0,45 нг/мл. В то же время Greve T. /164/ и др. установили, что сочетание ФСГ и ЛГ обеспечивает в 2 раза больше овуляций, чем применение только ФСГ, при этом повышается качество эмбрионов.
При использовании ФСГ также отмечается изменчивость в уровне суперовуляции, что объясняется, вероятно, колебанием уровня эндогенных гонадотропинов. В литературе часто появляются данные о вызывании суперовуляции в разные дни полового цикла без учета уровня эндогенных гормонов в крови коров на день гормональной обработки.
Гордон А. /11/ вызывала суперовуляцию на 9…13 день полового цикла и не выявили существенных различий в числе и качестве полученных эмбрионов
По данным Н.И. Сергеева /90/ вызывание суперовуляции лучше всего начинать с 10…11 дня полового цикла. При этом уменьшается число дегенерированных эмбрионов и неоплодотворенных яйцеклеток, повышается выход полноценных эмбрионов.
В работе Niemann H. и др. /226/ по определению оптимальной дозы ФСГ, установлено, что использование ФСГ в дозах, превышающих 28 мг, снижает число эмбрионов с 14,9 до 6,8 на донора. С увеличением дозы ФСГ до 60 мг уменьшается число эмбрионов, пригодных для пересадки с 57 до 40%. При этом достоверно возрастает число «нулевых» вымываний.
В исследованиях L.D. Nelson et al. /223/ отмечено, что повышение дозы ФСГ от 32 мл до 48 мл вызвало увеличение среднего числа овуляций с 9,5 до 12,6 и выход эмбрионов с 6,1
