Анализ полученных данных показывает, что независимо от используемого при замораживании криопротектора и способа оттаивания наибольная выживаемость отмечена у ранних бластоцист по сравнению с морулами и поздними бластоцистами.
Следует отметить и тот факт, что сохранность эмбрионов при использовании стандартного метода оттаивания несколько снижалась по сравнению со способом оттаивания с применением сахарозы 88,4-89,0% против 92,1-92,5% при применении этиленгликоля и глицерина, соответственно, что еще раз подтверждает положительное влияние данного криопротектора на жизнеспособность эмбрионов при их замораживании и оттаивании.
Таблица 46 - Сохранность эмбрионов в зависимости от способа замораживания, оттаивания и стадии развития
| Стадия | Криопротектор | ||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| этиленгликоль | этиленгликоль | ||||||||
| Способ оттаивания | |||||||||
| стандартный | стандартный | стандартный | стандартный | ||||||
| оттаяно, n | приг-х, n-% | оттаяно, n | приг-х, n-% | оттаяно, n | приг-х, n-% | оттаяно, n | приг-х, n-% | ||
| Мо | 362 | 320-88,4 | 90 | 83-92,2 | 279 | 236-84,6 | 77 | 68-88,3 | |
| Бл I | 104 | 93-89,4 | 60 | 57-95,0 | 185 | 173-93,5 | 59 | 53-89,8 | |
| Бл II | 35 | 97-77,1 | 33 | 31-93,9 | 56 | 49-87,5 | 27 | 23-85,2 | |
В таблице 47 представлены результаты сохранности эмбрионов в зависимости от их качества, стадии развития и криопротектора. Наивысшую сохранность (96,8%) показали ранние бластоцисты отличного качества, замороженные в этиленгликоле. Несколько ниже (95,3%) при заморозке в глицерине. А самую низкую – поздние бластоцисты удовлетворительного качества, замороженные в глицерине (50,0%). Достаточно высокую сохранность показали также морулы и бластоцисты хорошего качества: от 94,0% (ранние бластоцисты) до 92,8% – морулы.
Таблица 47 - Сохранность эмбрионов в зависимости от криопротектора, стадии развития и их качества
| Качество эмбрион ов | Криопротектор | ||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| этиленгликоль | глицерин | ||||||||||||
| Стадия развития | |||||||||||||
| Мо | Бл I | Бл II | Мо | Бл I | Бл II | ||||||||
| оттаяно, n | пригодных, n-% | оттаяно, n | пригодных, n-% | оттаяно, n | пригодных, n-% | оттаяно, n | пригодных, n-% | оттаяно, n | пригод-ных,n-% | оттаяно, n | пригод-ных,n-% | ||
| Отл. | 326 | 302-93 | 95 | 92-97 | 33 | 30-90,9 | 204 | 181-89 | 170 | 162-95 | 69 | 61-88 | |
| Хор. | 83 | 77-92,8 | 50 | 47-94 | 28 | 24-85,7 | 117 | 105-90 | 62 | 57-92 | 12 | 10-83 | |
| Удовл. | 43 | 24-55,8 | 19 | 11-58 | 7 | 4-57,1 | 35 | 18-51,4 | 12 | 7-58 | 2 | 1-50 | |
8.2. Влияние некоторых факторов при криоконсервировании эмбрионов на их приживляемость
Одним из решающих критериев жизнеспособности как свежих, так и замороженно-оттаянных эмбрионов является их приживляемость.
В таблице 48 представлены результаты пересадки зародышей с учетом одного из факторов, влияющим на его приживляемость после оттаивания и пересадки. Из таблицы видно, что приживляемость свежих эмбрионов достоверно выше замороженно-оттаянных: 69,8% против 55,9 и 57,8% при использовании глицерина и этиленгликоля, соответственно.
Таблица 48 - Приживляемость эмбрионов при учете одного из некоторых факторов
| Показа тели | Факторы влияния | |||||||||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| криопроте ктор | стадия развития | качество эмбриона | качество желтого тела | реци пиен т | сторо на перес адки | способ оттаив ания | ||||||||||||
| этиленгликоль | глицерин | контроль (интактные) | Морула | бластоциста I | бластоциста II | отличное | хорошее | Удовл. | отличное | хорошее | Удовл. | телка | корова | левая | правая | стандартный | с сахарозой | |
| Количе ство эмбрио переса док, n | 611 | 602 | 686 | 1154 | 521 | 224 | 1246 | 482 | 171 | 835 | 942 | 122 | 1441 | 458 | 840 | 1059 | 898 | 315 |
| Уровен ь прижи вляемо сти,% | 57,8 | 55,9 | 69,8 | 57,4 | 65,4 | 73,7* | 67,1 | 54,1 | 42,1 | 68,9 | 57,9 | 39,3 | 64,2* | 53,3 | 63,3 | 60,1 | 56,7 | 57,4 |
Сравнительный анализ результативности пересадок зародышей разных стадий развития выявил достоверную разницу в пользу поздних бластоцист по сравнению с ранними бластоцистами и морулами: 73,7%, 65,4% и 57,4% при P<0,05 и P<0,001 соответственно. Не менее важным фактором чем соответствие возраста зародыша сроку развития в момент извлечения, является его качество, которое определяется по пятибальной шкале: отличные, хорошие, удовлетворительные, условно пригодные и не пригодные. Из всех этих эмбрионов пересаживаются только отличные, хорошие и удовлетворительные остальные, как правило, используются в качестве подсадочного материала.
Как видно из таблицы наиболее высокую приживляемость при достоверной разнице показали эмбрионы отличного качества по сравнению с хорошими и удовлетворительными.
