Воспроизводство крупного рогатого скота

Таблица 11.1 Базовый протокол обследований в центре искусственного осеменения в соответствии с требованиями CSS.

aL. pomona , L. hardjo , L. canicola , L. icterohaemorrhagiae , L. grippotyphosa. BAPA — буферный подкисленный антиген для планшетной пробы; BVDV — вирус вирусной диареи крупного рогатого скота; CF — реакция связывания комплемента; FA — метод флуоресцирующих антител.Источник: адаптировано по материалам Certified Semen Services, Inc. Дополнительную информацию о CSS см. http://www.naab-css.org/about_css/

Первый этап исследований — исследования перед изоляцией — может проводиться в хозяйстве происхождения штатным ветеринарным врачом. Требования, предъявляемые перед поступлением, должны быть выполнены в течение 30 дней до помещения в изолятор. Если владельцы быков не хотят самостоятельно заниматься исследованиями, многие центры по сбору спермы на заказ предоставляют помещения для содержания быка на период исследований перед изоляцией. Эти требования перед поступлением распространяются также на любых животных, используемых в качестве подставных при садке как в изоляторе, так и в основном стаде. Исследования в изоляторе и основном стаде проводятся по прибытии в центр сбора спермы, а затем через установленные интервалы. На всех этапах исследований необходимы полный клинический осмотр, отрицательная внутрикожная проба на туберкулез, отрицательный результат исследования на бруцеллез крупного рогатого скота и отрицательный результат исследования на лептоспироз крупного рогатого скота. Животных с титрами антител к лептоспирам 1 : 100 или выше можно повторно исследовать через 2–4 недель. Животные с титром не выше 1 : 400 считаются имеющими стабильный титр и допускаются в изолятор. До поступления необходимо провести исследование на вирус вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) и получить отрицательный результат; исследование должно проводиться исключительно путем выделения вируса из цельной крови или сыворотки в культуре клеток с последующей оценкой клеточных культур методом иммунопероксидазной реакции (IP), методом флуоресцирующих антител (FA), иммуноферментным анализом или методом полимеразной цепной реакции (PCR). Наконец, в период изоляции, а затем с интервалами в 6 месяцев требуется исследование на кампилобактериоз и трихомоноз. Для выявления обоих заболеваний быки должны пройти серию

еженедельных исследований, необходимое число которых зависит от возраста быка. В таблице 11.1 представлена базовая схема исследований в центре искусственного осеменения. Полные сведения и последние обновления требований к исследованиям приведены на сайте www.naab-css.org.

Осмотр животных при поступлении следует проводить как можно скорее после помещения в отделение предварительной изоляции. Полноценный клинический осмотр должен включать наблюдение за движением животного по поверхности, обеспечивающей хорошее сцепление копыт с грунтом, предпочтительно по рыхлой почве или траве. При этом следует оценить все внешние признаки животного от морды до хвоста, уделяя особое внимание конечностям и копытам (рисунок 11.1). После первоначального осмотра быка следует надежно зафиксировать в фиксационном станке, головном фиксаторе или стойле с фиксатором. Для быков мясных пород наиболее предпочтителен фиксационный станок. Начиная с головы, следует осмотреть ротовую полость, убедиться в наличии всех зубов и равномерности их износа (это особенно важно для возрастных племенных быков). Следует оценить прозрачность глаз, проверить наличие новообразований и следов прежних травм. Нужно убедиться, что оба глаза реагируют на движение и нормально функционируют. Уши проверяют на наличие необычных выделений; в некоторых регионах страны их также следует проверять на наличие ушных клещей. Необходимо провести аускультацию грудной клетки быка и отметить любые отклонения; таким же образом обследуют всю брюшную полость. Особое внимание следует уделить силе и частоте сокращений рубца. Пальпируют несколько регионарных периферических лимфатических узлов, проверяя их на

признаки лимфаденита. Затем снизу станка следует осмотреть нижнюю поверхность туловища быка. Пальпируют и осматривают отверстие крайней плоти, а также мошонку, прощупывая семенники и все структуры придатков семенников. Измеряют и записывают окружность мошонки с помощью специальной измерительной ленты. В это же время оценивают суставы нижних отделов конечностей и копыта. В завершение следует провести ректальную пальпацию для оценки органов брюшной полости, а также измерить и записать ректальную температуру. Очень важно уделить внимание добавочным половым железам, особенно состоянию семенных пузырьков. Во время ректального исследования полезно помассировать ножку полового члена, чтобы помощник мог полностью вывести половой член наружу. Пальпируют оба паховых кольца и отмечают любые отклонения. После осмотра и исследований перед поступлением следует руководствоваться рекомендациями NAAB/CSS по помещению быка в изолятор после его доставки в центр сбора спермы. Некоторые производители могут не желать направлять быка на дальнейшие исследования, поскольку не планируют экспортировать сперму. В отношении любого взрослого быка, которого до доставки на сбор спермы использовали для случки с коровами, всегда рекомендуется соблюдать правила CSS.

При поступлении в изолятор центра сбора спермы быков, или центра искусственного осеменения (AIC), как его иногда называют, быку присваивают уникальный код производителя в соответствии с единой системой кодирования NAAB, если центр участвует в программе NAAB. Этот код не зависит от татуировки или тавра, используемых при регистрации племенного животного. Код может быть нанесен различными способами, но большинство центров искусственного осеменения используют ушные бирки с четко обозначенным кодом. Центр может использовать этот код для идентификации продукции, полученной от быка, хотя для целей ветеринарных исследований применяют другую постоянную маркировку (например, тавро на шкуре или татуировку).

После поступления в изолятор быка необходимо поместить в загон, тщательно очищенный от остатков органических материалов, оставленных предыдущим животным, и продезинфицированный (рисунок 11.2). Для стойл с земляным полом обработки площади дезинфицирующим средством в виде мелкодисперсного распыления должно быть достаточно для соблюдения стандартов NAAB. Ветеринарный врач должен оценить состояние помещений и выявить любые поврежденные элементы оборудования, способные травмировать животное. Изолятор должен быть отделен от помещений для основного стада. Все оборудование, используемое для уборки, кормления, поения и сбора спермы

у быков в изоляторе, должно использоваться отдельно от оборудования для основного стада. Это относится также к хранению кормов и любым механическим средствам транспортировки. При входе в зону изоляции, выходе из нее или переходе в другие карантинные зоны работники должны менять сапоги или защитные бахилы. Исследования быков в изоляторе начинаются с внутрикожной пробы на туберкулез, проводимой не ранее чем через 60 дней после пробы перед поступлением; исследования на бруцеллез крупного рогатого скота, проводимого не ранее чем через 30 дней после исследования перед поступлением, с получением отрицательного результата; и исследования на лептоспироз крупного рогатого скота, проводимого не ранее чем через 30 дней после исследования перед поступлением, с получением отрицательного результата либо при условии стабильного титра менее 1 : 400. Для выявления кампилобактериоза крупного рогатого скота требуется до шести посевов и исследований смывов из препуция, взятых с недельными интервалами. При исследовании на трихомоноз крупного рогатого скота в период изоляции действуют такие же требования к еженедельным посевам. Исследование на BVDV проводят не позднее чем через 10 дней после поступления, используя цельную кровь или сыворотку и оценивая культуру клеток методами FA, IP или PCR. Всех быков, у которых собирают сперму, впоследствии повторно исследуют на BVDV до выпуска спермы. Предпочтительно исследовать сперму методом PCR с проведением как минимум одного пассажа на клеточной линии.

Ветеринарным врачам также следует ознакомиться с работой диагностической лаборатории, с которой им предстоит сотрудничать, особенно с требованиями к подаче образцов, особенностями методик исследования, а также с протоколами исследований и порядком представления результатов, поскольку правильное понимание результатов имеет большое значение. Любые положительные результаты, особенно полученные при исследованиях перед поступлением, следует оценивать с учетом предшествующей вакцинации. Некоторые вакцины нередко вызывают длительный иммунный ответ, который впоследствии может препятствовать получению разрешения на экспорт спермы. В отдельных случаях вакцинация против лептоспироза приводит к длительному сохранению титра антител.

Когда бык выполняет все требования протокола изоляции, его допускают в основное стадо, где исследования продолжают для обеспечения соответствия международным протоколам. Предписанные исследования каждого быка в основном стаде проводят раз в полгода. Ранее проводившиеся исследования продолжают с меньшей частотой (каждые 6 месяцев): на туберкулез, бруцеллез, лептоспироз, трихомоноз и кампилобактериоз исследуют по тем же протоколам, которые были описаны выше. Необходимо исключить любой контакт быков с другими

парнокопытными животными; если такой контакт произойдет, быка необходимо вернуть в изолятор и повторно выполнить протокол исследований для изолированных быков.

Осмотр помещений — еще одна обязанность ветеринарного врача. Помещение для подготовки искусственных вагин (AV), зону сбора спермы, помещения для содержания быков, лабораторию спермы и зону ее обработки следует проверять на чистоту, отсутствие перекрестного загрязнения и возможность дезинфекции контактных поверхностей. Оборудование для обработки спермы должно быть чистым и исправным, а зоны упаковки и отправки — чистыми и упорядоченными (рисунок 11.3). Ветеринарный врач несет ответственность за состояние всех этих зон, что он подтверждает, подписывая федеральный экспортный сертификат. Задача ветеринарного врача — точно удостовериться в соблюдении стандартов OIE и NAAB/CSS, чтобы обеспечить постоянный доступ ко всем рынкам.

Процесс сбора спермы

Сбор спермы для криоконсервации — довольно простая и понятная процедура, если у исполнителя есть опыт. Поэтому проводить ее должен только человек, умеющий обращаться с быками и хорошо знакомый с процессом сбора спермы. Надлежаще оборудованные помещения и площадки крайне важны для успешного сбора спермы, особенно у быков мясных пород, которых прежде в основном использовали для случки на пастбище. Сбор спермы у быков с помощью искусственной вагины (AV) требует немалой решимости. По сути, быку-донору позволяют сделать садку на другого вола, быка или корову, отводят его половой член в сторону и вводят выдвинувшийся половой член в AV. Обычно быки, освоившие этот прием, охотно делают садку и эякулируют в AV. Приучение их к этому — настоящее искусство, особенно если речь идет о менее спокойных взрослых быках мясных пород и быках, склонных к резким скачкам.

Правила CSS устанавливают требования к здоровью и чистоте быков. Чаще всего в качестве животного для садки используют волов, если только в центре не предпочитают фантом — муляж, предназначенный для опоры быка во время садки. Использовать для этого коров не рекомендуется из-за возможного проникновения полового члена и загрязнения спермы. Шерсть на задней части тела животных, используемых для садки, следует коротко стричь,

чтобы облегчить очистку и дезинфекцию, которые необходимо проводить после каждого использования. Обычно для выполнения процедуры требуются как минимум два человека, а лучше три. Один человек отвечает за животное, используемое для садки; обычно его удерживают за недоуздок или носовое кольцо. Его задача — расположить животное для садки и помогать удерживать его в нужном положении во время сбора спермы. В крупных центрах есть также работник, управляющий быком: он может удерживать его за недоуздок или на привязи во время садки. В большинстве центров сбора спермы на заказ быкам мясных пород позволяют свободно делать садку на подставное животное. Наконец, специалист по сбору спермы работает с AV и руководит всей зоной сбора спермы (рисунок 11.4). Он обеспечивает правильную идентификацию образца и соблюдение гигиены при его получении, а также отвечает за безопасность и благополучие работников и животных.

Процедура получения спермы довольно проста. Нескольких быков обычно содержат в отдельных загонах вдоль «бычьего прохода» напротив площадки для получения спермы. Животных, используемых в качестве садки, проводят перед быками, чтобы вызвать у них возбуждение. С этого места быки могут наблюдать, как другие быки делают садку и у них получают сперму. О возбуждении быков в «зрительском ряду» свидетельствует то, как активно они подают голос во время получения спермы у одного из них.

Когда приходит очередь быка, его выпускают из загона на площадку для садки. Сначала работник, удерживающий животное для садки, отводит его в сторону, не давая быку сделать садку. Это может продолжаться несколько минут, пока специалист по получению спермы не решит, что бык достаточно возбужден. Он также может счесть, что для усиления возбуждения и повышения качества и количества спермы быку нужна «ложная садка». Для этого работник, ведущий быка, позволяет ему сделать садку, но специалист по получению спермы отводит половой член быка от животного для садки, а последнее выводят из-под быка. Как отмечалось ранее, когда специалист считает, что бык достаточно возбужден, ему позволяют сделать садку для получения спермы (рисунок 11.5). После этого быка либо возвращают в помещение для содержания, либо снова ставят в «бычий проход» для повторного получения спермы.