
Критерии отбора маркерной коровы должны включать здоровые конечности и копыта, большой размер и достаточно настойчивый характер, чтобы конкурировать со стадом. Однако важно не выбирать корову, которая беременна или кормит подсосного теленка или является членом дойного стада; кроме того, корова не сможет осемениться после этого лечения, потому что она будет субфертильной, а реакция на лечение может быть переменной.
Кроме того, если выявление эструса используется для программ ИО, то уровень точности выявления более важен для повышения успеха этих программ. Обнаружение охоты - это искусство, и чем больше времени уходит на наблюдение за скотом, тем выше точность выявления.
Ссылки
Обобщение
Эффективность обнаружения охоты или течки у крупного рогатого скота варьируется в зависимости от используемого метода и времени, потраченного на визуальное наблюдение за коровами. Важно учитывать стоимость, трудозатраты и систему управления при принятии решения о том, какой метод или комбинация методов работают лучше всего с учетом работы фермы и временных рамок.
-
Battaglia RA. Выявление охоты. В кн.: Руководство по управлению животноводством , 3-е изд. Аппер-Сэдл-Ривер, штат Нью-Джерси: Prentice Hall, 2000, с. 119–126.
-
Parish J, Larson J, Vann R. Выявление эструса (охоты) у крупного рогатого скота. Информационное издание 2610, Университет штата Миссисипи, 2010. Доступно по адресу http://msucares.com/pubs/publications/p2610.pdf
Глава 32
Искусственное осеменение
Ram Kasimanickam
Отделение ветеринарных клинических наук, Колледж ветеринарной медицины, Университет штата Вашингтон, Пуллман, Вашингтон, США
Вступление
Искусственное осеменение (ИО) - введение сперматозоидов в репродуктивный тракт самки с помощью инструмента - является самой старой вспомогательной репродуктивной технологией.1 Использование ИО в репродукции домашних животных было впервые внедрено по санитарным причинам. Однако, как только замороженная сперма стала легко доступной, экономические преимущества улучшения фертильности и ускоренного генетического прогресса стали очевидными. С тех пор ИО стало основным методом быстрого распространения предпочтительных генетических признаков животных. Многочисленные быки произвели сотни тысяч доз семени и потомства. Кроме того, уменьшенное количество сперматозоидов на дозу осеменения без ущерба для фертильности значительно увеличило количество осеменений и потомков от генетически превосходных производителей. Несколько важных разработок, включая новые разбавители спермы, новые методы искусственного осеменения, протоколы синхронизации охоты и овуляции, а также семя, разделенное по полу, еще больше увеличили масштаб использования и важность искусственного осеменения в качестве вспомогательной репродуктивной технологии.
Достижение высокой фертильности при искусственном осеменении требует превосходного управления всеми фазами программы ИО; это действительно требует командного подхода. В связи с этим персонал, отвечающий за сбор, обработку и доставку спермы, должен правильно выполнять свои задачи, поскольку любой дефицит приведет к снижению плодовитости. Кроме того, врожденная фертильность быков и коров также имеет жизненно важное значение.
Крупные коммерческие центры искусственного осеменения, как правило, имеют протоколы и процедуры контроля качества для обеспечения сбыта спермы хорошего качества. Однако, после продажи спермы фертильность зависит от способности других людей правильно обрабатывать и оттаивать сперму и правильно осеменять коров в нужное время. Основной целью обработки спермы является сохранение оплодотворяющей способности, что достигается путем минимизации воздействия вредных факторов на сперматозоиды. Повреждение спермы во время криоконсервации, хранения и оттаивания объясняется температурным шоком, образованием ледяных кристаллов, окислительным стрессом, мембранными изменениями, криопротекторной токсичностью и осмотическими изменениями.2
Знание техники обращения с сосудом для хранения семени, правильной технологии оттаивания и обращения со спермой, а также соблюдение гигиены, места введения семени и времени ИО являются критическими точками и должны периодически пересматриваться.
Обращение с сосудом Дьюара
Замороженная сперма хранится в специализированном резервуаре с жидким азотом. Эти резервуары имеют прочный внешний кожух (алюминий или нержавеющая сталь) и внутренний отсек, в котором находится жидкий азот. Пространство между внутренней и наружной оболочками изолировано и находится под вакуумом. Крышка в виде цилиндра из плотной пены закрывает горловину сосуда для изоляции жидкого азота и замороженной спермы от внешних температур, тем самым сводя к минимуму испарение азота. Тем не менее, сосуд не герметичен; жидкий азот превращается в газ при колебаниях температуры (если сосуд плотно закрыт, он может взорваться). Последние технические достижения в проектировании и конструировании привели к созданию удобных в использовании резервуаров для сохранения хорошего качества спермы, в том числе с увеличенными интервалами хранения (6–12 месяцев). Следует отметить, что интервалы хранения зависят от модели сосуда и кратности его использования ( открывания ). Важно, чтобы уровень азота регулярно контролировался и азот добавлялся по мере необходимости.
Благодаря новым сосудам для спермы поддержание с помощью жидкого азота очень низких температур во внутренней камере возможно благодаря высококачественному твердому изоляционному материалу и вакууму. Несмотря на это, все сосуды подвержены повреждениям в результате неправильного обращения. Внутренняя камера, содержащая жидкий азот, фактически подвешена к наружному корпусу с помощью горловины. Следовательно, любое ненормальное напряжение в трубке горловины, вызванное значительным усилием или чрезмерным колебательным движением, может привести к растрескиванию трубки, что приведет к потере вакуума. Прокол внешней оболочки также приведет к потере вакуума. Следует избегать сварки наружного корпуса, так как это также может привести к потере вакуума. Поскольку вакуум является основным изолирующим компонентом резервуара, его потеря вызывает повышение температуры во внутренней камере и быстрое испарение азота.
Накопление изморози в верхней части резервуара указывает на быстрое испарение жидкого азота и выход сосуда из строя. Хотя сперму можно хранить при –196 ° C в течение неопределенного времени с минимальным содержанием жидкого азота, следует все же соблюдать минимальную глубину 5 см.
Сосуды для хранения спермы следует держать вдали от прямых солнечных лучей в прохладном, чистом, сухом, не пыльном и хорошо проветриваемом помещении. Резервуары следует установить на деревянном поддоне и никогда не хранить непосредственно на бетонном полу (чтобы предотвратить коррозию на дне сосуда). Кроме того, сосуды нельзя складывать друг на друга. Сосуды следует размещать в месте, где их можно часто видеть, чтобы обнаружить чрезмерное испарение жидкого азота. Резервуар нельзя укладывать горизонтально и катить. Хранение сосуда на деревянной или пластиковой тележке с колесами облегчает его перемещение. Сосуды должны быть надлежащим образом закреплены во время транспортировки в транспортном средстве, чтобы минимизировать вероятность повреждения или утечки.
Хранение замороженной спермы
Большая часть спермы упакована в соломинки по 0,25 или 0,5 мл (отсортированная по полу сперма всегда выпускается в соломинках по 0,25 мл). Соломину помещают в стаканчик с четырьмя другими соломками от того же быка. Два стаканчика помещают в металлическую трость, на которой напечатан код быка. Трости хранятся в канистрах в сосуде для спермы. Хранение и обработка соломинок объемом 0,5 и 0,25 мл аналогичны.
Поддержание низких температур является залогом успешного хранения замороженной спермы. Во время охлаждения и замораживания в соломинке со спермой создаются микросреды. Каждый химический компонент незамороженной спермы замерзает или затвердевает при различной температуре. Вода начинает замерзать при понижении температуры ниже 0 ° C, образуя ледяные кристаллы, которые остаются несколько нестабильными при температурах выше –80°C. Считается, что эта нестабильность вызвана рекристаллизацией льда. Кроме того, когда вода превращается в лед, сперма подвергается воздействию оставшегося концентрированного раствора солей и других компонентов наполнителя, которые замерзают при температурах, значительно ниже точки замерзания воды. Нестабильность льда и концентрированных растворов вредны для спермы. Обезвоживание во время криоконсервации оказывает важное влияние на сперму; обезвоживание снижает риск образования внутриклеточных кристаллов льда, но чрезмерное обезвоживание так же вредно.2,4 Регулирование осмоляльности разбавителей имеет решающее значение, так как она влияет на распределение воды во время криоконсервации.2,4 К счастью, криопротекторы и оптимизированные программы замораживания помогают минимизировать повреждение сперматозоидов. Тем не менее, сперма должна храниться в условиях значительно ниже критических температур, когда начинает происходить рекристаллизация льда (от – 100 до –80 ° C). Температура опасно колеблется от нижней до верхней трети горловины резервуара3 (таблица 32.1). Кроме того, хранящаяся сперма может подвергаться воздействию неблагоприятных высоких температур при изъятии из сосуда Дьюара для размораживания, при перемещении семени из сосуда в сосуд и при обращении со спермой в горловине при попытке обнаружить и разморозить определенную соломинку. При этом другие соломинки для спермы в стаканах и канистрах также подвергаются воздействию высоких температур. Термальная реакция спермы в пайете объемом 0,5 мл при подъёме на 5 см от верхней части резервуара (при воздействии температуры –22 ° C) и 2,5 см (при воздействии 5 ° C) показана в таблице 32.2.3
Таблица 32.1 Колебание температуры в горловине стандартного сосуда для хранения спермы.
| Расположение в горловине сосуда | Температура (°C) |
|---|---|
| Верхний край горловины | от 2.2 до 12.2 |
| 2.54 cm от верхнего края | от –15 до –22.2 |
| 5.08 cm от верхнего края | от –40 до –46 |
| 7.62 cm (3 дюйма) от верхнего края | от –75 до –82 |
| 10.16 cm от верхнего края | от –100 до –120 |
| 12.7 cm от верхнего края | от –140 до –160 |
| 15.24 cm от верхнего края | от –180 до –192 |
Источник : адаптировано из Saacke R, Lineweaver J, Aalseth E. Процедуры обработки замороженной спермы. В кн: Материалы 12-й конференции по ИО мясного скота NААВ, 1997, с. 49.
Таблица 32.2 Термальная реакция спермы (французская соломка объемом 0,5 мл), выдерживаемой при 5 и –22 ° C (температура, наблюдаемая в верхней части резервуара для хранения спермы).
| Время (с) | 5 °C | –22 °C |
|---|---|---|
| 5 | –180 | –180 |
| 10 | –115 | –118 |
| 20 | –85 | –90 |
| 30 | –62 | –77 |
| 40 | –50 | –60 |
| 50 | –39 | –53 |
| 60 | –30 | –48 |
| 70 | –24 | –42 |
| 80 | –21 | –40 |
| 90 | –19 | — |
| 110 | — | –31 |
| 130 | — | –25 |
Источник : адаптировано из Saacke R, Lineweaver J, Aalseth E. Процедуры обработки замороженной спермы. В кн: Материалы 12-й конференции по ИО мясного скота NAAB , 1997, p. 49.
Время достижения критической температуры, при которой происходит рекристаллизация льда (от –100 до –80 ° C) составляет примерно 10–20 с для обеих температур. Термическое повреждение спермы является необратимым и не может быть исправлено путем возврата спермы в жидкий азот. Чтобы обеспечить поддержание жизнеспособности сперматозоидов, трости и канистры должны быть подняты в горловину сосуда и находиться ниже линии замерзания не более 5–8 с. Если не удалось достать нужную соломинку в течение этого времени, канистру следует опустить обратно в сосуд для охлаждения, а затем вернуть в горловину.
Количество сперматозоидов на пайету является переменным, с некоторым уменьшением количества для высоковостребованных элитных быков и значительно меньшим количеством для семени, разделенного по полу. Более значительные разведения (2 миллиона сперматозоидов в соломинке 0,25 мл) не влияли на процент сперматозоидов с прямо поступательным движением, целостность или стабильность мембраны или целостность хроматина сразу после оттаивания по сравнению с малым разведением (15 миллионов сперматозоидов в соломинке 0,25 мл). Кроме того, не было различий в оплодотворяемости между этими уровнями разведения.5
