Воспроизводство крупного рогатого скота

Успех диагностического тестирования на C. fetus venerealis и T. fetus зависит от наличия обоих организмов в смегме препуциального мешка, собранной путем аспирации или промывания внутренней крайней плоти и слизистой оболочки полового члена. Препуциальная смегма сразу же засевается в транспортную среду и отправляется в диагностическую лабораторию для тестирования. CSS требует проведения бак.посева обоих организмов для каждого образца с отрицательным результатом. CSS допускает проведение первоначального скрининга на наличие C. fetus venerealis с использованием теста на флуоресцентные антитела, но все положительные результаты этого теста должны быть подтверждены с помощью бактериального посева.⁹ Доступны и другие диагностические тесты для анализа препуциальной смегмы, включая ПЦР и ELISA для C. fetus venerealis^25,26 и ПЦР для T. fetus.

Частота тестирования одинакова для C. fetus subsp. venerealis и T. fetus. CSS требует серийного тестирования быков, находящихся в карантине ЦИО, с еженедельными интервалами до попадания в постоянное производственное стадо. Количество тестов, требуемых по отдельности, зависит от возраста быка, при этом для быков старше 1 года требуется шесть тестов препуциальной смегмы с отрицательными результатами, проводимых с недельными интервалами. Быкам до 1 года требуется три теста препуциальной смегмы с отрицательными результатами. Находясь в производственном стаде, быки проверяются каждые 6 месяцев на каждое заболевание и должны иметь отрицательные результаты.⁹ ВОЗЖ рекомендует, чтобы быки старше 6 месяцев тестировались трижды с интервалом в неделю, а быки младше 6 месяцев тестировались один раз с отрицательным результатом в карантине и один раз в год в постоянном производственном стаде.¹

Было показано, что добавление антибиотиков сдерживает C. fetus venerealis, присутствующие в бычьем семени.^27,28 Помимо требований к анализу на C. fetus venerealis для того, чтобы быки могли поступить и остаться в ЦИО, CSS требует добавления комбинации антибиотиков гентамицина, тилозина и линкомицина-спектиномицина, которые должны быть добавлены к необработанной сперме, а затем в разбавитель, который добавляется для окончательного разбавления перед замораживанием спермы.⁹ Приемлемые комбинации антибиотиков, которые ВОЗЖ рекомендует для добавления в разбавленную сперму, включают гентамицин, тилозин, линкомицинспектиномицин; пенициллин, стрептомицин, линкомицин – спектиномицин; или амикацин и дибекацин.¹ Добавление антибиотиков не контролирует присутствие T. fetus в свежей или замороженной сперме.

Инфекционный ринотрахеит крупного рогатого скота

Инфекционный ринотрахеит (ИРТ) - это вирусное заболевание крупного рогатого скота, которое вызывает заболевания верхних дыхательных путей, аборты, бесплодие, энцефалит, конъюнктивит, вульвовагинит и баланопостит. Заболевание вызывается вирусом герпеса крупного рогатого скота типа 1 (BHV-1) и типа 5 (BHV-5). BHV-1 можно разделить на два подтипа. BHV-1.1 связан с респираторной формой заболевания (ИРТ), а BHV-1.2 связан с генитальной формой заболевания, вызывающей инфекционный пустулезный вульвовагинит (ИПВ) у самок и инфекционный пустулезный баланопостит (ИПБ) у самцов. Оба подтипа способны вызывать аборты. BHV-1 передается воздушно-капельным путем при респираторной форме и половым путем при генитальной форме, вирус был обнаружен в свежей и замороженной сперме, и может передаваться через ИО.²⁹ BHV-5 - это энцефалитная форма заболевания, которая в первую очередь передается воздушнокапельно и, как недавно сообщалось, вызывает поражения половых путей и аборты.

BHV-5 был обнаружен в сперме инфицированных быков, и возможна передача через ИО.³⁰

Первичное заражение BHV-1 у быков может привести к выделению вируса из крайней плоти через 7–10 дней после заражения и может длиться от нескольких дней до нескольких недель. После начальной фазы BHV-1 становится латентным у инфицированного быка, и периодическое выделение может происходить на протяжении всей жизни животного. Вирус может оставаться латентным в течение неопределенного времени, хотя введение кортикостероидов или период стресса, например, при транспортировке, могут привести к повторному появлению BHV-1 и последующему выделению вируса из препуция. Заражение спермы BHV-1, вероятно, является результатом присутствия вируса на слизистой оболочке препуция, а не в семенниках, придатках яичек или придаточных половых железах.²⁹ Хотя воздействие приводит к выработке антител, присутствие антител не может предотвратить повторное появление и выделение латентного вируса в крайней плоти, а уровни антител могут быть очень низкими или отсутствовать у быков, которые оставались латентными в течение длительного периода.¹⁸

Есть несколько рекомендаций по тестированию и содержанию быков в ЦИО. CSS не требует обязательного тестирования быков на ИРТ при производстве спермы. Это основано на нескольких исследованиях, показывающих, что в сперме от серопозитивных быков, содержащихся в надлежащих условиях в ЦИО, не выделялся BHV-1, и это объясняется отсутствием стресса в окружающей среде, в которой живут быки.³¹ Для выявления антител к BHV-1 существуют серологические тесты, включающие тест нейтрализации сыворотки и ELISA, и обычно рекомендуется, чтобы тест на антитела, сделанный до и, по крайней мере, через 21 день после производства спермы показал, что бык не был активно инфицирован. Для проверки на наличие вируса партий спермы от серопозитивных быков доступны тесты VI и ПЦР. ВОЗЖ рекомендует, чтобы стада в ЦИО были свободны от ИРТ. Быки должны иметь отрицательный серологический тест на антитела за 28 дней до поступления в изолятор или должны происходить из стада, свободного от ИРТ. Быков в изоляторе также тестируют с помощью серологического теста, и все быки в изоляторе должны быть отрицательными перед входом в производственное стадо. Производственное стадо ежегодно проверяется серологическим тестом, и все быки-резиденты должны быть отрицательны.

Арбовирусы

Крупный рогатый скот подвержен болезням, переносимым членистоногими, которые могут передаваться через сперму. Крупный рогатый скот заражается от насекомых, которые являются носителями вируса, и, в свою очередь, инфицируются, питаясь кровью виремических животными и впоследствии передают вирус, кусая восприимчивых животных. Распространение болезни ограничивается эндемичными районами, где обитают насекомые-переносчики, и вирусы часто сохраняются в этих районах через популяции диких животных. Новые районы эпидемии возникают в результате перемещения инфицированных вирусом переносчиков в новые районы или перемещения животных-хозяев с вирусом в новые районы с компетентными переносчиками (способными передавать болезнь) .

Вирус блютанга (BTV) (или "вирус синего языка") и вирус эпизоотической геморрагической болезни (EHD) - это все орбивирусы, распространенные во всем мире. Существует по крайней мере 24 идентифицированных серотипа BTV, и вирус в основном передается мошками (виды Culicoides), а крупный рогатый скот является основным резервуаром для вируса. У инфицированного крупного рогатого скота клинические признаки проявляются редко, но болезнь может вызывать лихорадку, отек морды, кровоизлияния и изъязвления слизистых оболочек у некоторых особей.

BTV обнаруживался в семенной жидкости быков, но только во время виремического периода инфекции, что, вероятно, связано с кровью, вытекшей из половых путей.⁸ EHD похож на BTV и существует по крайней мере семь серотипов со значительной иммунологической перекрестной реактивностью между двумя вирусами. EHD также похож на BTV в том, что он редко вызывает клинические признаки у крупного рогатого скота и в основном передается мошками (виды Culicoides). Сообщений о EHD в сперме не поступало, но из-за его сходства с BTV международные рекомендации включают тестирование на вирус быков, используемых для ИО.

Для мониторинга быков и спермы, используемой для ИО существуют серологические тесты и тесты на выявление вирусов. Доступные серологические тесты включают иммунодиффузию в агаровом геле и ELISA. ВОЗЖ рекомендует проверять серонегативных быков до сбора спермы и повторно через 21–60 дней после сбора. Тесты на идентификацию вирусов включают VI и ПЦР, проводимые на цельной крови. Также ВОЗЖ рекомендует проведение либо VI, либо ПЦР перед сбором и повторно, минимум каждые 7 дней в течение периода сбора для VI или, минимум каждые 28 дней в течение периода сбора для ПЦР и заключительного теста в конце периода сбора.³² Тесты VI и ПЦР также доступны для замороженной спермы.

Недавно в Европе появился новый арбовирус, вызванный вирусом Шмалленберга (SBV), который впервые был обнаружен в ноябре 2011 года у молочного скота, при этом у животных снизились надои молока и возникла диарея; позже было обнаружено, что он вызывает врожденные пороки развития, наблюдаемые у абортированных и новорожденных телят. SBV является ортобуньявирусом, представителем серогруппы Simbu и передается мошками Culicoides. Вирус был обнаружен в сперме крупного рогатого скота с помощью ПЦР и может выделяться последовательными партиями спермы или периодически в течение 43 дней в одном отчете³³ и до 3 месяцев в другом отчете.³⁴ Еще не определено, жизнеспособен ли SBV, обнаруженный с помощью ПЦР в сперме, и способен ли он передавать болезнь восприимчивым животным. Для диагностики заболевания доступны серологические тесты, включая нейтрализацию сыворотки и ELISA, а ПЦР и VI используют для обнаружения вирусного антигена в крови.

Энзоотический лейкоз крупного рогатого скота

Энзоотический лейкоз крупного рогатого скота - это ретровирусное заболевание, которое вызывает стойкий лимфоцитоз и лимфосаркому у пораженных животных и вызывается вирусом бычьей лейкемии (BLV) . BLV обнаруживается в лимфоцитах и может передаваться горизонтально через контакт с выделениями инфицированных животных, ятрогенным путем через зараженные инструменты, такие как тавро (щипцы для нанесения татуировки) и инструмент для обезроживания, и вертикально через трансплацентарный барьер. В одном исследовании сообщалось о присутствии BLV в сперме быков, выявленном по наличию сероконверсии у овец, которым внутрибрюшинно вводили сперму, полученную от BLV-положительных быков.³⁵ Сперма быка была собрана с помощью ректального массажа, что могло привести к травме и присутствию лимфоцитов в сперме. Последующий повторный эксперимент с 32 серопозитивными быками, у которых отобрали сперму обычным способом, не подтвердил возникновение сероконверсии у инокулированных овец.³⁶ Исследование по использованию спермы от BLV-серопозитивных быков, собранной и обработанной в ЦИО, не показало никаких доказательств сероконверсии у самок в незараженном BLV стаде в течение 5-летнего периода при их искусственном осеменении.³⁷

В другом исследовании тестировали партии замороженной спермы от BLV-серопозитивных быков с помощью ПЦР и не обнаружили никаких доказательств присутствия BLV.³⁸ Сперма, собранная в этих исследованиях, была от быков, проживающих в ЦИО, получена с использованием искусственной вагины и подвергалась стандартным лабораторным процедурам, используемым для оценки качества спермы, включая наличие лейкоцитов.

В соответствии с международными требованиями к торговле спермой крупного рогатого скота для проверки спермы на наличие BTV применяют серологические тесты, которые включают иммунодиффузию в агаровом геле и ELISA. ВОЗЖ рекомендует, чтобы быки-доноры либо находились в стаде, свободном от BLV, либо проходили серологическое тестирование как минимум за 30 дней до и как минимум через 90 дней после сбора спермы. В Соединенных Штатах CSS не требует тестирования на лейкоз быков-доноров, находящихся в производственном стаде. В настоящее время для диагностики используют тесты VI и ПЦР для обнаружения вирусного антигена в крови, а также тест ПЦР для тестирования спермы.

Контроль

Контроль патогенов в сперме крупного рогатого скота, особенно быков, находящихся в ЦИО, в первую очередь зависит от частоты тестирования на распространенные заболевания, как на антиген патогена, так и на реакцию антител на заболевание. Некоторые болезни, такие как BVDV и лептоспироз, требуют, чтобы постоянно резидентное стадо сохраняло статус заболевания, а положительный результат теста обычно требует удаления положительного животного и повторного тестирования резидентной популяции стада. Другие заболевания, такие как BTV и EHD, позволяют серопозитивным животным присутствовать в постоянном стаде и подвергаться различным тестам, чтобы минимизировать риск присутствия патогена в семенной жидкости. Серонегативных животных проверяют на антитела перед сбором спермы и снова после сбора, чтобы показать отсутствие контакта с патогеном. Аналогичное тестирование проводится на серопозитивных животных с использованием тестов для обнаружения антигена патогена во время сбора. Стратегия тестирования для каждого AIC будет зависеть от правил и стандартов страны, в которой находится AIC, и стандартов, необходимых для экспорта замороженной спермы на зарубежные рынки.

Сведение к минимуму распространения заболеваний является важным фактором для сохранения стада, свободного от этих заболеваний. Для снижения вероятности заноса болезни нужны протоколы биобезопасности. Быков следует содержать в помещении или в загонах с ограждением по периметру для предотвращения контакта с другим домашним скотом и дикими животными. Персонал коровника должен переодеться в одежду, предназначенную для работы в учреждении, и, как минимум, мыть обувь перед входом в помещения и при перемещении между карантинными и изоляционными помещениями. Снаружи транспортные средства должны быть чистыми, а шины продезинфицированы перед въездом в ЦИО. Быков следует содержать в чистом помещении, следить за их чистотой во время сбора и поддерживать хорошее здоровье и физическое состояние. Больных животных следует изолировать и не использовать для сбора спермы. Во многих странах требуют соблюдения минимальных стандартов биобезопасности для получения и распространения спермы как внутри страны, так и за ее пределами. Руководства по биобезопасности и стандартные действующие правила проведения процедур должны присутствовать в каждом ЦИО, своевременно обновляться и соблюдаться, чтобы уменьшить вероятность заноса инфекций.

Ссылки

1. Всемирная организация здравоохранения животных (OIE). Кодекс здоровья наземных животных (2012), том 1, раздел 4, глава 4.6.

2. Kirkland P, Mackintosh S, Moyle A. Последствия широкого использования семени быка, персистентно инфицированного пестивирусом. Vet Rec 1994;135:527–529.

3. Meyling A, Jensen A. Передача вируса вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) при искусственном осеменении (AI) семенем персистентно инфицированного быка. Vet Microbiol 1988;17:97–105.

4. Kirkland P, McGowan M, Mackintosh S, Moyle A. Осеменение крупного рогатого скота семенем быка с транзиторной пестивирусной инфекцией. Vet Rec 1997;140:124–127.

5. Rikula U, Nuotio L, Laamanen L, Sihvonen L. Передача вируса вирусной диареи крупного рогатого скота через семя быков с острой инфекцией в полевых условиях. Vet Rec 2008;162:79–82.

6. Voges H, Horner G, Rowe S, Wellenberg G. Персистентная пестивирусная инфекция крупного рогатого скота, локализованная в семенниках иммунокомпетентного быка без виремии. Vet Microbiol 1998;61:165–175.

7. Givens D, Riddell K, Edmondson M и др. Эпидемиология длительных инфекций семенников, вызванных вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота. Vet Microbiol 2009;139:42–51.

8. Wrathall A, Simmons H, Van Soom A. Оценка риска передачи вирусов реципиентам эмбрионов крупного рогатого скота при оплодотворении инфицированным вирусом семенем. Theriogenology 2006;65:247–274.

9. Certified Semen Services. Минимальные требования CSS к профилактике заболеваний при производстве семени для искусственного осеменения. 2011. Доступно по адресу http://www.naab-css.org/about_css/CSSMinReqJan2011 rev0312.htm.

10. Nickell J, White B, Larson R и др. Начало и продолжительность транзиторных инфекций у телят с различным антительным статусом после контакта с телёнком, персистентно инфицированным вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота. Int J Appl Res Vet Med 2011;9:29–39.

11. Kirkland P, Richards S, Roghwell J, Stanley D. Репликация вируса вирусной диареи крупного рогатого скота в репродуктивном тракте быков и выделение вируса с семенем при острых и хронических инфекциях. Vet Rec 1991;128:587–590.

12. Givens D, Kurth K, Zhang Y и др. Редкий случай персистентной инфекции семенников приводит к выделению инфекционного вируса с семенем. Clin Theriogenol 2012;4:426.

13. Niskanen R, Alenius S, Belák K и др. Осеменение восприимчивых тёлок семенем быка без виремии, у которого персистентная инфекция вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота была локализована в семенниках. Reprod Domest Anim 2002;37:171–175.

14. Givens D, Heath A, Brock K, Brodersen B, Carson R, Stringfellow D. Обнаружение вируса вирусной диареи крупного рогатого скота в семени, полученном после заражения серонегативных половозрелых быков. Am J Vet Res 2003;64:428–434.

15. Radostits OM, Gay CC, Hinchcliff KW, Constable PD. Ветеринарная медицина , 10-е изд. Филадельфия: Saunders, 2007, с. 1094–1110.

16. Johnson RC. Leptospira. В кн.: Baron S (ред.) Медицинская микробиология , 4-е изд. Галвестон, Техас: University of Texas Medical Branch at Galveston, 1996, гл. 35.

17. Miraglia F, Morais Z, Cortez A и др. Сравнение четырёх антибиотиков для инактивации лептоспир в семени быков, разбавленном разбавителем на основе яичного желтка и экспериментально заражённом Leptospira santarosai серовар cuaricura. Braz J Microbiol 2003;34:147–151.

18. Eaglesome M, Garcia M. Риски заболеваний для здоровья животных при искусственном осеменении спермой быков. Rev Sci Tech Off Int Epiz 1997;16:215–225.

19. Bercovich Z. Поддержание статуса стад, свободных от Brucella abortus: обзор с особым вниманием к эпидемиологии и проблемам диагностики бруцеллёза в районах с низкой распространённостью заболевания. Vet Quart 1998;20:81–88.

20. Bartlett D. Комментарии по поводу случая туберкулёза крупного рогатого скота в группе быков, используемых для искусственного осеменения. В: Материалы ежегодного собрания Ассоциации охраны здоровья животных США , 1967, с. 166–171.

21. Niyaz Ahmed A, Khan J, Ganai N. Метод амплификации ДНК для быстрого выявления возбудителей туберкулёза крупного рогатого скота в сперме. Anim Reprod Sci 1999;57:15–21.

22. USDA APHIS. Ликвидация туберкулёза крупного рогатого скота. Единые методы и правила, действующие с января 1 г., 2005.

23. Bondurant R. Болезни крупного рогатого скота, передающиеся при случке: естественное течение, диагностика и роль вакцин в борьбе с ними. Vet Clin North Am Food Anim Pract 2005;21:383–408.

24. Thibier M, Guerin B. Гигиенические аспекты хранения и использования спермы для искусственного осеменения. Anim Reprod Sci 2000;62:233–251

25. McMillen L, Fordyce G, Doogan V, Lew A. Сравнение культурального метода и нового 5′-Taqнуклеазного анализа для прямого выявления Campylobacter fetus подвида venerealis в клинических образцах, полученных от крупного рогатого скота. J Clin Microbiol 2006;44:938–945.

26. Devenish J, Brooks B, Perry K и др. Валидация иммуноферментного анализа с улавливанием на основе моноклональных антител для выявления Campylobacter fetus . Clin Diagn Lab Immunol 2005;12:1261–1268.

27. Shin S, Lein D, Patten V, Ruhnke H. Новая комбинация антибиотиков для замороженной спермы быков. Theriogenology 1988; 29:577–591.

28. Shin S. Сравнительное исследование эффективности разбавления спермы быков: 1-этапная и 2-этапная процедуры. В: Материалы 18-й технической конференции по искусственному осеменению и воспроизводству , 2000, с. 60–62.

29. van Oirschot J. Герпесвирус крупного рогатого скота 1 в сперме быков и риск его передачи: краткий обзор. Vet Quart 1995;17:29–33.

30. Favier P, Marin M, Pérez S. Роль герпесвируса крупного рогатого скота типа 5 (BoHV-5) в заболеваниях крупного рогатого скота. Новые данные о связи BoHV-5 с заболеваниями половых органов. Open Vet J 2012;2:46–53.

31. Monke D. Новые данные исследований IBR и комментарий. В: Материалы 14-й технической конференции по искусственному осеменению и воспроизводству , 1992, с. 26–29.

32. Всемирная организация охраны здоровья животных (OIE). Кодекс здоровья наземных животных (2012). Том 2, раздел 8, глава 8.3.

33. ProMED-Mail. Дата публикации: 2012-12-20. Вирус Шмалленберг, Европа (76): РНК вируса в сперме быков. Архивный номер: 20121220.1460864. http://www.promedmail.org/ direct.php?id=20121220.1460864.

34. ProMED-Mail. Дата публикации: 2012-12-21. Вирус Шмалленберг, Европа (77): (Нидерланды, Франция) РНК вируса в сперме быков. Архивный номер: 20121221.1462748: http://www.promedmail. org/direct.php?id=20121221.1462748.

35. Lucas M, Dawson M, Chasey D, Wibberley G, Roberts D. Вирус энзоотического лейкоза крупного рогатого скота в сперме. Vet Rec 1980;106:128.

36. Kaja R, Olson C. Отсутствие инфекционности спермы быков, заражённых вирусом лейкоза крупного рогатого скота. Theriogenology 1982;18:107–112.

37. Monke D. Отсутствие инфекционности спермы быков, заражённых вирусом лейкоза крупного рогатого скота. J Am Vet Med Assoc 1986;188:823–826.

38. Choi K, Monke D, Stott J. Отсутствие вируса лейкоза крупного рогатого скота в сперме серопозитивных быков. J Vet Diagn Invest 2002;14: 403–406.