Воспроизводство крупного рогатого скота

Для ретроспективного определения диагностических порогов использовались показатели воспроизводства, в том числе индекс стельности, интервал от отела до первого осеменения, оплодотворяемость по первому осеменению, количество осеменений на одну стельность и общая оплодотворяемость. Понимание того, что инволюция матки включает в себя сепсис и воспалительный процесс, и что это пока еще нормальный физиологический процесс, имеет решающее значение. Понимание того, что нарушение репродуктивной функции вызывается осложненной или замедленной инволюцией матки, позволяет заключить, что большинство случаев эндометрита имеет первостепенное значение. Даже у коров, переживающих нормальный послеродовой период, диаметр рога матки не достигает предгравидного (до беременности) размера 4–5 см в течение 25–30 дней после отела.³⁹ LeBlanc и др.³⁵ сообщили о результатах крупномасштабного исследования с участием 1865 исследованных молочных коров от 27 до 33 дней лактации. Одной из целей было изучение и проверка диагностических критериев эндометрита. Характеристики матки, включая ее расположение, симметрию рогов, диаметр рогов, наличие пальпируемого просвета матки и толщину стенки рога матки, оценивали путем трансректальной пальпации. Ни одна из пальпируемых характеристик матки не была связана с относительным уровнем стельности. Следует избегать использования трансректальной пальпации матки в качестве основного метода диагностики эндометрита, поскольку он слишком субъективен и неточен. С прагматической точки зрения, будет пропущено слишком много случаев эндометрита, что может привести к риску ухудшения репродуктивной функции у ряда больных животных, если их не лечить.

Биопсия ткани эндометрия и бактериологическое исследование маточного экссудата, возможно, могут считаться наиболее точными, объективными и, вероятно, надежными диагностическими тестами на воспаление и инфекцию матки, соответственно. Однако ни одна из этих методик не используется, поскольку биопсия матки была связана со снижением оплодотворяемости при первом осеменении, и подавляющее большинство инфекций после 3-х недель после отела связано с T.pyogenes. Кроме того, разовая биопсия матки не отражает состояние всего эндометрия коровы.³⁴

Вагиноскопия - это быстрый и простой метод диагностики гнойных выделений из влагалища. Использование вагиноскопии для диагностики клинического эндометрита основано на предпосылке, что гнойный экссудат, присутствующий в краниальной части влагалища, вероятно, является результатом его эвакуации из матки. Важен и характер выделений. Прозрачная слизь нормальна, тогда как гнойные (>50% гноя) и слизисто-гнойные (приблизительно 50% гноя и 50% слизи) и дурно пахнущие выделения свидетельствуют о заболевании.^4,35 Trueperella pyogenes, Fusobacterium necrophorum и Proteus sp. - маточные инфекции, которые были связаны с гнойными и слизисто-гнойными выделениями из влагалища, тогда как зловонные выделения были связаны с инфекциями T. pyogenes, E.coli и Mannheimia haemolytica. Другие известные патогены матки и условно-патогенные бактерии не были связаны с характером или запахом вагинальной слизи.⁴⁰ При использовании вагиноскопии через 26 дней после родов было выявлено 44% коров с патологическими выделениями, которые в противном случае остались бы незамеченными, если бы использовались только пальпация и внешнее обследование. При откладывании вагинального обследования примерно до 1 месяца после отела, ложноположительные результаты (т.е. у коров, перенесших нормальную инволюцию) были менее вероятны.³⁵ Были изучены другие способы выявления выделений из матки, включая руку в перчатке⁴¹ и устройство Metricheck (Simcrotech, Hamilton, Новая Зеландия) (рис. 50.2).⁴² Эти альтернативы, по крайней мере, так же эффективны, как и вагиноскопия, и могут дать некоторое преимущество в выявлении экссудата, который в противном случае остался бы незамеченным, особенно в случаях, когда передняя часть влагалища наклоняется вентрально.

a b c

Рисунок 50.1 Цитощетка и модифицированная рукоятка (а) ввинчены в стальной стержень (б) и наружный щиток (в).

Другое практическое преимущество заключается в том, что специалисту намного легче избежать загрязнения. Те, у кого большие ладони и руки, могут столкнуться с трудностями применения метода при работе в перчатках, тогда как устройство Metricheck легко вставлять и легко чистить между коровами.

Вагиноскопия или аналогичная процедура дает немедленный результат, но не позволяет выявить всех коров с риском нарушения репродуктивной функции из-за эндометрита. Субклинический эндометрит не может быть диагностирован путем осмотра влагалищного экссудата; однако, если никакие другие скрининговые тесты не используются, рутинное вагинальное обследование для выявления слизисто-гнойного или гнойного экссудата является простым, надежным и экономически эффективным способом выявления коров с риском нарушения репродуктивной функции.

Цитологическая диагностика эндометрия, основанная на выявлении клеточных признаков воспаления, в настоящее время считается наиболее точным способом диагностики эндометрита у крупного рогатого скота, как клинического, так и субклинического. Воспалительные клетки могут быть получены любым из двух методов: промывание матки или цитощетка. Преимуществом промывания матки является использование легкодоступных материалов: 20–60 мл 0,9% физиологического раствора заливается в просвет матки с помощью стерильной инфузионной пипетки с последующим легким массажем матки перед аспирацией жидкости обратно в шприц, прикрепленный к инфузионной пипетке. Образцы жидкости центрифугируются, клеточный дебрис (мусор, остатки) извлекается и размазывается на предметное стекло, и после окрашивания с использованием модифицированного красителя Райта Гимзы выполняется микроскопический анализ.⁴³ В методе с применением цитощетки (рис. 50.1) используется небольшой инструмент с щеточкой и ручкой, разработанный для цитологического исследования шейки матки человека и измененный для использования у коров.⁴⁴ Рукоятка обрезана до длины 3 см или менее и врезана в стержень из нержавеющей стали диаметром 4 мм и длиной 65 см. Трубка из нержавеющей стали диаметром 5–6 мм длиной 50 см используется для защиты модифицированной цитощетки и стержня при прохождения через шейку матки. На трубку, содержащую стержень и цитощетку, надевается гигиенический пластиковый чехол, чтобы защитить инструмент от загрязнения при прохождении через влагалище. Имеющиеся в продаже устройства с цитощеткой, разработанные специально для сбора клеточного материала эндометрия у крупных животных, являются альтернативой, предлагающей множество очевидных преимуществ.

Щиток и цитощетка проходят через влагалище к шейке матки, где прорывается наружный пластиковый чехол; щиток, все еще защищая щетку, осторожно проходит через шейку матки, а затем кисть продвигается в тело матки. Большинство операторов поворачивают щетку на четверть до половины оборота, но следует избегать сдавливания стенок матки, чтобы предотвратить повреждение эндометрия. Затем щеточка втягивается в щиток перед удалением из репродуктивного тракта.⁴⁵ Клеточный материал, прилипший к щетке, раскатывается на чистом предметном стекле микроскопа и высушивается на воздухе перед окрашиванием красителем Райта Гимзы. Метод цитощетки не требует центрифугирования и сбора клеточного материала; тем не менее, клеточный материал собирается только из области, в которой цитощетка контактирует с поверхностью эндометрия. Метод лаважа ( промывания) позволяет собирать клеточный дебрис из глубины матки. Несмотря на это различие, Barlund et al.⁴⁵ сообщили о высоком уровне сходства результатов между цитологическими исследованиями при промывании и использовании цитощетки. Трудности, связанные с извлечением жидкости⁴⁴ и потеря четкости клеток⁴⁵ в цитомазках, полученных из жидкости лаважа, были отмечены как недостатки.

Цитологические критерии для диагностики субклинического эндометрита продолжают уточняться, причем ключевой переменной является послеродовой интервал для отбора проб. Оценку степени тяжести воспаления производятся путем определения процента полиморфноядерных (PMN) клеток на 100 клеток (PMNs плюс клетки эндометрия) при увеличении в 400 раз.^4,43,45,46 Barlund и др.⁴⁵ сообщили, что порог в 8% PMN был самой низкой долей PMN, значительно влияющих на статус стельности через 150 дней лактации. Несмотря на специфичность этого порогового показателя на уровне 89,9%, чувствительность была низкой на уровне 12,9%, что указывает на множество причин отсутствия стельности, кроме цитологических признаков эндометрита. Другие исследователи определили субклинический эндометрит, основываясь на аналогичных пропорциях PMN, но с уменьшением порога по мере увеличения послеродового периода (Таблица 50.1). Ghasemi и соавт.⁴⁷ использовали экспрессию провоспалительных факторов некроза опухолей - цитокинов TNF-α, интерлейкина IL-6 и IL-8 клетками эндометрия, собранными с использованием метода цитощетки, для определения процентного порога PMN, указывающего на эндометрит у коров в послеродовом периоде. Порог выше 18% PMN был наименьшим процентом, достоверно связанным с повышением у коров всех трех цитокинов, отобранных через 31±1 день после отела. Этот порог намного выше, чем основанный на анализе выживаемости (класс статистических моделей, позволяющих оценить вероятность наступления события - здесь стельности) до стельности.

Данные, полученные при УЗИ внутриматочной жидкости, как было показано, связаны с ростом бактерий и нарушением инволюции матки.²⁷

Таблица 50.1 Пороговые уровни нейтрофилов в разные дни послеродового периода, указывающие на субклинический эндометрит.

У коров, у которых при исследовании в период между 20-47-м днем после отела была обнаружена маточная жидкость, средний сервиспериод увеличивался на 62–63 дня по сравнению с теми, у которых не было жидкости.⁴⁶ Как Kasimanickam с соавт.⁴⁶ , так и Barlund с соавт.⁴⁵ сообщили, что присутствие жидкости в просвете матки и положительная цитология эндометрия были эффективными при диагностике эндометрита на основе увеличения дней до стельности; однако тесты не выявили одинаковых коров. Имеющиеся на сегодняшний день данные свидетельствуют о том, что цитология эндометрия выявляет коров, которые имеют клеточный воспалительный ответ, в то время как наличие внутриматочной жидкости может быть связано с уменьшением механизмов очистки матки.

Предпринимались попытки улучшить диагностические возможности УЗИ путем измерения диаметра просвета матки и количественной оценки толщины эндометрия. Тщательно отобранные пороговые значения диаметра просвета матки >1мм и >3мм и толщины эндометрия >7мм и >8мм оказались ненадежными для прогнозирования статуса стельности через 150 дней и хуже по-сравнению с цитологическими исследованиями цитощеткой.⁴⁵ Ультразвуковая технология помогает в выявлении некоторых, но не всех коров с эндометритом. Это прискорбно, так как УЗИ имеет преимущество в том, что позволяет на месте поставить диагноз.

Для улучшения наших диагностических возможностей изучаются новые методы. Так, показатели оптической плотности (длина волны 620 нм) обработанных образцов лаважа матки были в значительной степени связаны с принятой пороговой долей нейтрофилов, считающихся диагностическими при эндометрите, а присутствие T. pyogenes в образце было связано с более высокими средними оптическими плотностями. Определение оптической плотности жидкости в маточном лаваже может быть гораздо менее трудоемкой, но в то же время точной альтернативой обычному цитологическому анализу цитопрепарата.⁴⁸

Пиометра

Пиометра часто диагностируется во время рутинного обследования коров с анэструсом. Наличие пальпируемой жидкости в маточном роге и пальпируемого желтого тела при отсутствии плода или слизистой оболочки плода являются симптомами. Ультрасонография также является отличным диагностическим инструментом, особенно для менее опытных врачей. Явным преимуществом УЗИ является способность визуализировать маточную жидкость, которая сильно отличается от амниотической или аллантоисной жидкости. В случаях пиометры просвет матки одного или обоих рогов заполнен различными количествами густой жидкости разной эхогенности из-за высокого содержания клеточного гноя. Наличие желтого тела подтверждает диагноз.

Лечение

Метрит

Метрит традиционно лечился системными или внутриматочными антибиотиками. Ценность поддерживающего лечения никогда не следует недооценивать; у тяжело пораженных животных следует также применять противовоспалительные средства и внутривенную жидкостную терапию. В ретроспективном анализе ведения 78 случаев послеродового метрита выяснилось, что все, что требовалось, - это назначить поддерживающую терапию, пока матка заживала сама.⁴⁹ Системная антибактериальная терапия, по-видимому, дает больше преимуществ по сравнению с внутриматочной инфузией. Известны периоды выведения препаратов, возможно распределение по всем слоям матки, и системное введение антибиотиков менее вредно для маточной среды.⁵⁰ Когда-то пенициллин был предпочтительным антибиотиком для лечения послеродового метрита, поскольку он проникает во все слои матки, стоит недорого, и большинство бактерий, проникающих в эндометрий и вызывающих сепсис, были чувствительны к пенициллину.^50,51 Стандартная доза прокаин пенициллина G 22 000 МЕ/кг в/м один раз в день в течение 3-5 дней. Молоко подлежит утилизации не менее 96 часов, а убой животного на мясо запрещен в течение 10 дней после последней обработки. Альтернативно, цефтиофур натрия 1 мг/кг в/м или п/к может применяться в течение 3–5 дней без необходимости утилизации молока при указанной дозировке. Было обнаружено, что цефтиофур натрия и цефтиофур гидрохлорид концентрируются в тканях матки на уровнях, превышающих среднюю ингибирующую (подавляющую) концентрацию для T. pyogenes, F. necrophorum и E. coli.^50,52 Также было показано, что стерильная суспензия цефтиофура гидрохлорида эффективна для лечения острого послеродового метрита в дозе 1,1 или 2,2 мг/кг в/м или п/к в течение 5 дней с большей эффективностью более высокой дозы.²⁹ При дозе 1,1 мг/кг можно следовать указаниям по срокам ожидания по мясу и молоку; однако 2,2 мг/кг является дозировкой не предписанной производителем. Окситетрациклин также был популярным препаратом для лечения послеродового метрита. Внутривенные дозы окситетрациклина в дозе 11 мг/кг, вводимые два раза в день, сохраняли среднюю концентрацию в тканях стенки матки выше 5 мкг/г в течение первых 4 часов после инъекции, достигая максимума в 9 часов к пятому дню лечения. Чуть более высокие его уровни были обнаружены в карункулах и эндометрии в течение более длительных периодов лечения и были приблизительно эквивалентны концентрации 5 мкг/мл в сыворотке. Сообщается, что минимальная ингибирующая доза для T. pyogenes в изолятах матки составляет 20,4 мкг/мл. Эта информация говорит о том, что окситетрациклин является плохим выбором для лечения послеродового метрита.⁵³ Единственное значение может быть для лечения случаев метрита, имеющих лишь легкое или умеренное системное поражение (например, легкое угнетение). В попытке уничтожить бактерии в матке, усилить ее защитные механизмы или повысить тонус и кровоток, в полость матки вводили различные соединения. Идеальное лечение должно удалять вредные бактерии из матки, но в то же время не должно наносить ущерб матке или нарушать ее защитные механизмы. Возможно, наиболее распространенный инфузионный раствор - это вода или физиологический раствор, содержащий йод. Неудивительно, что нет никаких доказательств в поддержку использования маточных средств на основе йода. На самом деле, всего лишь 50–100 мл 2%-ного раствора поливинилпирролидона йода (повидон-йода) в качестве рутинной терапии через 30 дней после родов оказали пагубное влияние на фертильность по сравнению с нелеченными животными.⁵⁴

Другие исследователи поддержали раствор декстрозы; результаты инфузии 1 л 50%-ного раствора декстрозы в матку коров, испытывающих патологический послеродовой период, никогда не подвергались критической оценке и, вероятно, приводят лишь к повышению тонуса матки. Как правило, следует избегать внутриматочных антибиотиков или инфузии антисептиков в качестве лечения послеродового метрита. Когда мы вводим антибиотики в матку, мы не можем быть уверены, что лекарство распространяется по всем слоям матки. Более того, многие агенты, вводимые системно или всасываемые из матки, вызывают озабоченность по поводу подходящих периодов ожидания по мясу и молоку, так как эти соединения хотя бы частично абсорбируются.^51,55 Большинство распространенных препаратов не предназначены для внутриматочного применения, и многие из них не оказывают лечебного эффекта на матку в новотельный период. Препараты семейства пенициллинов так же неэффективны при инфузионном введении в послеродовом периоде, поскольку существует ряд организмов, продуцирующих инактивирующие (β-лактамазные) ферменты.⁵¹ Тетрациклины очень раздражают матку крс, и большинство препаратов не следует использовать для внутриматочной терапии. Было обнаружено, что все внутриматочные антибактериальные средства оказывают негативное влияние на функцию лейкоцитов, а их введение вызывает ятрогенное загрязнение или дальнейшее повреждение матки. По сообщениям распространены устойчивые к окситетрациклину штаммы T.pyogenes, что является дополнительным свидетельством того, что внутриматочной инфузии окситетрациклина следует избегать.⁵⁶ Терапия простагландинами в ближайшем послеродовом периоде была направлена на повышение тонуса матки и изгнание маточной жидкости и бактерий, а не на изменение гормонального влияния через лютеолиз. По большей части, исследования, указывающие на преимущества PGF2α для лечения метрита, были в значительной степени опровергнуты.⁵⁷ Заметным исключением было исследование, показавшее, что две дозы PGF2α внутримышечно через 8 часов и на 8-й день после родов у коров с острым послеродовым метритом увеличили оплодотворяемость по первому осеменению на 17%, но только у первотелок; у повторнородящих коров не было никакого эффекта.³⁰ Такое несоответствие в результатах в сочетании с относительно небольшими размерами опытных групп позволяет предположить, что это открытие, возможно, было недостоверным. Точно так же сообщалось, что окситоцин в дозе 25-30 МЕ, по крайней мере, три раза в день в течение первой недели после родов у коров с метритом является наиболее физиологическим средством стимулирования вытеснения жидкости из матки, но до настоящего времени не было проведено никаких масштабных научных исследований, подтверждающих пользу его использования.⁵⁷

В послеродовом периоде для лечения или профилактики метрита у коров уже давно используются эстрогены, исходя из обоснования того, что они повышают тонус матки и стимулируют фагоцитоз, вызывая эстрогенное состояние, а также усиливают реакцию миометрия на окситоцин.⁵⁸ Однако, результаты применения дозировок в 4 и 5 мг эстрадиола ципионата в течение 36 часов после отела не смогли подтвердить эти убеждения.^58,59 Необоснованное использование стероидных гормонов у продуктивных животных будет только способствовать нагнетанию мнения о небезопасности безопасности пищевых продуктов, поэтому их следует избегать. Несмотря на важность задержания последа (RFM) в патогенезе метрита, следует понимать, что одно только RFM оказывает лишь незначительное влияние на будущую фертильность. Проблемы возникают, когда эти случаи осложняются метритом. Любая терапия для RFM должна быть направлена на лечение метрита.