Воспроизводство крупного рогатого скота

Щиток и цитощетка проходят через влагалище к шейке матки, где прорывается наружный пластиковый чехол; щиток, все еще защищая щетку, осторожно проходит через шейку матки, а затем кисть продвигается в тело матки. Большинство операторов поворачивают щетку на четверть до половины оборота, но следует избегать сдавливания стенок матки, чтобы предотвратить повреждение эндометрия. Затем щеточка втягивается в щиток перед удалением из репродуктивного тракта.⁴⁵ Клеточный материал, прилипший к щетке, раскатывается на чистом предметном стекле микроскопа и высушивается на воздухе перед окрашиванием красителем Райта Гимзы. Метод цитощетки не требует центрифугирования и сбора клеточного материала; тем не менее, клеточный материал собирается только из области, в которой цитощетка контактирует с поверхностью эндометрия. Метод лаважа ( промывания) позволяет собирать клеточный дебрис из глубины матки. Несмотря на это различие, Barlund et al.⁴⁵ сообщили о высоком уровне сходства результатов между цитологическими исследованиями при промывании и использовании цитощетки. Трудности, связанные с извлечением жидкости⁴⁴ и потеря четкости клеток⁴⁵ в цитомазках, полученных из жидкости лаважа, были отмечены как недостатки.

Цитологические критерии для диагностики субклинического эндометрита продолжают уточняться, причем ключевой переменной является послеродовой интервал для отбора проб. Оценку степени тяжести воспаления производятся путем определения процента полиморфноядерных (PMN) клеток на 100 клеток (PMNs плюс клетки эндометрия) при увеличении в 400 раз.^4,43,45,46 Barlund и др.⁴⁵ сообщили, что порог в 8% PMN был самой низкой долей PMN, значительно влияющих на статус стельности через 150 дней лактации. Несмотря на специфичность этого порогового показателя на уровне 89,9%, чувствительность была низкой на уровне 12,9%, что указывает на множество причин отсутствия стельности, кроме цитологических признаков эндометрита. Другие исследователи определили субклинический эндометрит, основываясь на аналогичных пропорциях PMN, но с уменьшением порога по мере увеличения послеродового периода (Таблица 50.1). Ghasemi и соавт.⁴⁷ использовали экспрессию провоспалительных факторов некроза опухолей - цитокинов TNF-α, интерлейкина IL-6 и IL-8 клетками эндометрия, собранными с использованием метода цитощетки, для определения процентного порога PMN, указывающего на эндометрит у коров в послеродовом периоде. Порог выше 18% PMN был наименьшим процентом, достоверно связанным с повышением у коров всех трех цитокинов, отобранных через 31±1 день после отела. Этот порог намного выше, чем основанный на анализе выживаемости (класс статистических моделей, позволяющих оценить вероятность наступления события - здесь стельности) до стельности.

Данные, полученные при УЗИ внутриматочной жидкости, как было показано, связаны с ростом бактерий и нарушением инволюции матки.²⁷

Таблица 50.1 Пороговые уровни нейтрофилов в разные дни послеродового периода, указывающие на субклинический эндометрит.

У коров, у которых при исследовании в период между 20-47-м днем после отела была обнаружена маточная жидкость, средний сервиспериод увеличивался на 62–63 дня по сравнению с теми, у которых не было жидкости.⁴⁶ Как Kasimanickam с соавт.⁴⁶ , так и Barlund с соавт.⁴⁵ сообщили, что присутствие жидкости в просвете матки и положительная цитология эндометрия были эффективными при диагностике эндометрита на основе увеличения дней до стельности; однако тесты не выявили одинаковых коров. Имеющиеся на сегодняшний день данные свидетельствуют о том, что цитология эндометрия выявляет коров, которые имеют клеточный воспалительный ответ, в то время как наличие внутриматочной жидкости может быть связано с уменьшением механизмов очистки матки.

Предпринимались попытки улучшить диагностические возможности УЗИ путем измерения диаметра просвета матки и количественной оценки толщины эндометрия. Тщательно отобранные пороговые значения диаметра просвета матки >1мм и >3мм и толщины эндометрия >7мм и >8мм оказались ненадежными для прогнозирования статуса стельности через 150 дней и хуже по-сравнению с цитологическими исследованиями цитощеткой.⁴⁵ Ультразвуковая технология помогает в выявлении некоторых, но не всех коров с эндометритом. Это прискорбно, так как УЗИ имеет преимущество в том, что позволяет на месте поставить диагноз.

Для улучшения наших диагностических возможностей изучаются новые методы. Так, показатели оптической плотности (длина волны 620 нм) обработанных образцов лаважа матки были в значительной степени связаны с принятой пороговой долей нейтрофилов, считающихся диагностическими при эндометрите, а присутствие T. pyogenes в образце было связано с более высокими средними оптическими плотностями. Определение оптической плотности жидкости в маточном лаваже может быть гораздо менее трудоемкой, но в то же время точной альтернативой обычному цитологическому анализу цитопрепарата.⁴⁸

Пиометра

Пиометра часто диагностируется во время рутинного обследования коров с анэструсом. Наличие пальпируемой жидкости в маточном роге и пальпируемого желтого тела при отсутствии плода или слизистой оболочки плода являются симптомами. Ультрасонография также является отличным диагностическим инструментом, особенно для менее опытных врачей. Явным преимуществом УЗИ является способность визуализировать маточную жидкость, которая сильно отличается от амниотической или аллантоисной жидкости. В случаях пиометры просвет матки одного или обоих рогов заполнен различными количествами густой жидкости разной эхогенности из-за высокого содержания клеточного гноя. Наличие желтого тела подтверждает диагноз.

Лечение

Метрит

Метрит традиционно лечился системными или внутриматочными антибиотиками. Ценность поддерживающего лечения никогда не следует недооценивать; у тяжело пораженных животных следует также применять противовоспалительные средства и внутривенную жидкостную терапию. В ретроспективном анализе ведения 78 случаев послеродового метрита выяснилось, что все, что требовалось, - это назначить поддерживающую терапию, пока матка заживала сама.⁴⁹ Системная антибактериальная терапия, по-видимому, дает больше преимуществ по сравнению с внутриматочной инфузией. Известны периоды выведения препаратов, возможно распределение по всем слоям матки, и системное введение антибиотиков менее вредно для маточной среды.⁵⁰ Когда-то пенициллин был предпочтительным антибиотиком для лечения послеродового метрита, поскольку он проникает во все слои матки, стоит недорого, и большинство бактерий, проникающих в эндометрий и вызывающих сепсис, были чувствительны к пенициллину.^50,51 Стандартная доза прокаин пенициллина G 22 000 МЕ/кг в/м один раз в день в течение 3-5 дней. Молоко подлежит утилизации не менее 96 часов, а убой животного на мясо запрещен в течение 10 дней после последней обработки. Альтернативно, цефтиофур натрия 1 мг/кг в/м или п/к может применяться в течение 3–5 дней без необходимости утилизации молока при указанной дозировке. Было обнаружено, что цефтиофур натрия и цефтиофур гидрохлорид концентрируются в тканях матки на уровнях, превышающих среднюю ингибирующую (подавляющую) концентрацию для T. pyogenes, F. necrophorum и E. coli.^50,52 Также было показано, что стерильная суспензия цефтиофура гидрохлорида эффективна для лечения острого послеродового метрита в дозе 1,1 или 2,2 мг/кг в/м или п/к в течение 5 дней с большей эффективностью более высокой дозы.²⁹ При дозе 1,1 мг/кг можно следовать указаниям по срокам ожидания по мясу и молоку; однако 2,2 мг/кг является дозировкой не предписанной производителем. Окситетрациклин также был популярным препаратом для лечения послеродового метрита. Внутривенные дозы окситетрациклина в дозе 11 мг/кг, вводимые два раза в день, сохраняли среднюю концентрацию в тканях стенки матки выше 5 мкг/г в течение первых 4 часов после инъекции, достигая максимума в 9 часов к пятому дню лечения. Чуть более высокие его уровни были обнаружены в карункулах и эндометрии в течение более длительных периодов лечения и были приблизительно эквивалентны концентрации 5 мкг/мл в сыворотке. Сообщается, что минимальная ингибирующая доза для T. pyogenes в изолятах матки составляет 20,4 мкг/мл. Эта информация говорит о том, что окситетрациклин является плохим выбором для лечения послеродового метрита.⁵³ Единственное значение может быть для лечения случаев метрита, имеющих лишь легкое или умеренное системное поражение (например, легкое угнетение). В попытке уничтожить бактерии в матке, усилить ее защитные механизмы или повысить тонус и кровоток, в полость матки вводили различные соединения. Идеальное лечение должно удалять вредные бактерии из матки, но в то же время не должно наносить ущерб матке или нарушать ее защитные механизмы. Возможно, наиболее распространенный инфузионный раствор - это вода или физиологический раствор, содержащий йод. Неудивительно, что нет никаких доказательств в поддержку использования маточных средств на основе йода. На самом деле, всего лишь 50–100 мл 2%-ного раствора поливинилпирролидона йода (повидон-йода) в качестве рутинной терапии через 30 дней после родов оказали пагубное влияние на фертильность по сравнению с нелеченными животными.⁵⁴

Другие исследователи поддержали раствор декстрозы; результаты инфузии 1 л 50%-ного раствора декстрозы в матку коров, испытывающих патологический послеродовой период, никогда не подвергались критической оценке и, вероятно, приводят лишь к повышению тонуса матки. Как правило, следует избегать внутриматочных антибиотиков или инфузии антисептиков в качестве лечения послеродового метрита. Когда мы вводим антибиотики в матку, мы не можем быть уверены, что лекарство распространяется по всем слоям матки. Более того, многие агенты, вводимые системно или всасываемые из матки, вызывают озабоченность по поводу подходящих периодов ожидания по мясу и молоку, так как эти соединения хотя бы частично абсорбируются.^51,55 Большинство распространенных препаратов не предназначены для внутриматочного применения, и многие из них не оказывают лечебного эффекта на матку в новотельный период. Препараты семейства пенициллинов так же неэффективны при инфузионном введении в послеродовом периоде, поскольку существует ряд организмов, продуцирующих инактивирующие (β-лактамазные) ферменты.⁵¹ Тетрациклины очень раздражают матку крс, и большинство препаратов не следует использовать для внутриматочной терапии. Было обнаружено, что все внутриматочные антибактериальные средства оказывают негативное влияние на функцию лейкоцитов, а их введение вызывает ятрогенное загрязнение или дальнейшее повреждение матки. По сообщениям распространены устойчивые к окситетрациклину штаммы T.pyogenes, что является дополнительным свидетельством того, что внутриматочной инфузии окситетрациклина следует избегать.⁵⁶ Терапия простагландинами в ближайшем послеродовом периоде была направлена на повышение тонуса матки и изгнание маточной жидкости и бактерий, а не на изменение гормонального влияния через лютеолиз. По большей части, исследования, указывающие на преимущества PGF2α для лечения метрита, были в значительной степени опровергнуты.⁵⁷ Заметным исключением было исследование, показавшее, что две дозы PGF2α внутримышечно через 8 часов и на 8-й день после родов у коров с острым послеродовым метритом увеличили оплодотворяемость по первому осеменению на 17%, но только у первотелок; у повторнородящих коров не было никакого эффекта.³⁰ Такое несоответствие в результатах в сочетании с относительно небольшими размерами опытных групп позволяет предположить, что это открытие, возможно, было недостоверным. Точно так же сообщалось, что окситоцин в дозе 25-30 МЕ, по крайней мере, три раза в день в течение первой недели после родов у коров с метритом является наиболее физиологическим средством стимулирования вытеснения жидкости из матки, но до настоящего времени не было проведено никаких масштабных научных исследований, подтверждающих пользу его использования.⁵⁷

В послеродовом периоде для лечения или профилактики метрита у коров уже давно используются эстрогены, исходя из обоснования того, что они повышают тонус матки и стимулируют фагоцитоз, вызывая эстрогенное состояние, а также усиливают реакцию миометрия на окситоцин.⁵⁸ Однако, результаты применения дозировок в 4 и 5 мг эстрадиола ципионата в течение 36 часов после отела не смогли подтвердить эти убеждения.^58,59 Необоснованное использование стероидных гормонов у продуктивных животных будет только способствовать нагнетанию мнения о небезопасности безопасности пищевых продуктов, поэтому их следует избегать. Несмотря на важность задержания последа (RFM) в патогенезе метрита, следует понимать, что одно только RFM оказывает лишь незначительное влияние на будущую фертильность. Проблемы возникают, когда эти случаи осложняются метритом. Любая терапия для RFM должна быть направлена на лечение метрита.

Было показано, что ручное удаление последа отрицательно сказывается на будущей фертильности, особенно у коров с метритом⁶⁰ а внутриматочные антибиотики нарушают гнилостные процессы, необходимые для растворения мембран.⁵¹ Экболические (сокращающие) агенты, такие как PGF2α и его синтетические аналоги, производное спорыньи и окситоцин, не влияют на изгнание плаценты.^51,61 Лучший совет - игнорировать послед и сосредоточить усилия на лечении метрита.

Эндометрит

Лечение эндометрита в настоящее время основано на двух различных схемах: внутримышечном введении PGF2α и внутриматочной инфузии антибиотиков. Многие другие протоколы лечения были популяризированы, но не выдержали научных исследований. Адекватные размеры выборки, лучшее понимание инволюции матки и использование показателей воспроизводства при оценке результатов лечения являются требованиями достоверных исследований.

Основанием для лечения эндометрита с помощью PGF2α или синтетического аналога является стимуляция защитных механизмов матки путем разрушения желтого тела и удаления источника прогестерона.^62,63 Считается, что утеротонические эффекты в отсутствие желтого тела незначительны.⁹ Лечение субклинического эндометрита клопростенолом между 20 и 33 днями лактации привело к 70%-ному улучшению вероятности этих коров стать стельными по сравнению с неподверженными лечению аналогами.⁶⁴ О наличии или отсутствии функционирующего желтого тела не сообщалось; тем не менее, считается, что лечение PGF2α более эффективно при наличии лютеиновой ткани^65,66 , поэтому рекомендуется применять PGF2α для лечения заболеваний матки только после первого месяца после родов.⁹ Программы эстральной синхронизации, особенно те, в которых используют многократные инъекции PGF2α, показали положительный эффект у коров с диагнозом эндометрит;⁶² однако, в двух исследованиях лечение PGF2α через 35 дней и 49 дней после родов не показало никакой пользы для разрешения болезни матки.^67,68 Хотя, по-видимому, PGF2α не имеет прямой пользы при лечении заболеваний матки, наблюдался положительный эффект от лечения PGF2α на репродуктивную функцию у коров с плохой упитанностью.⁶⁸

Внутриматочная инфузия противомикробных препаратов направлена на получение более высоких концентраций лекарственного средства в месте заражения, чем при системном введении. Окситетрациклин был когда-то самым популярным средством, вводимым в матку коров, но он относительно неэффективен, так как он плохо всасывается в более глубокие слои матки.^53,65 Несмотря на это, некоторая абсорбция происходит, и поэтому следует соблюдать период ожидания по молоку и мясу.⁶⁹ Некоторые препараты могут также вызывать коагуляционный некроз эндометрия.⁷⁰ Так, было показано, что маточные вливания в день или на следующий день после осеменения, которые проводят исходя из предпосылки, что терапевтическая эффективность выше в течение фолликулярной фазы, оказывали пагубное влияние на беременность у большинства коров, предположительно вызванное воспалением эндометрия.⁷¹

Там, где это возможно, бензатин-цефапирин (Metricure, Merck Animal Health), цефалоспорин первого поколения, не выявляющийся в мясе или молоке, является препаратом для инфузии матки. В обширном полевом исследовании 316 коров в возрасте от 27 до 33 дней лактации с клиническим эндометритом разделили на группы, одна из которых получала инфузию цефапирина, вторая - PGF2α внутримышечно, а третья служила контролем и не получала лечения.

Животные, получавшие цефапирин, забеременели на 60% быстрее, чем контрольные; однако, интервал до беременности у животных, обработанных PGF2α, значительно не отличался от такового у контрольных животных.⁶⁶ Похоже, что не все препараты цефалоспорина одинаковы; внутриматочная инфузия 125 мг гидрохлорида цефтиофура (Spectramast LC, Pfizer Animal Health) через 44 дня после родов у коров с клиническим эндометритом снизила распространенность бактериальных инфекций, но не повлияла на индекс стельности.⁷²

Пиометра

Бесспорно, лучшим лечением пиометры является лютеолитическая (рекомендованная производителем доза) инъекция PGF2α или его синтетического аналога клопростенола. Эти рекомендации не менялись в течение десятилетий, большинство животных реагировали после одной инъекции. Эвакуация матки начинается уже через 24 часа после инъекции, а эстральное поведение часто проявляется через 3-4 дня. Инсеминацию следует откладывать до первого или даже второго эструса после индуцированного эструса, при этом более двух третей животных, по сообщениям, становятся стельными.⁷³ В редких случаях бывает некоторое повреждение шейки матки, что ухудшает очищение матки. В таких случаях может быть полезно промывание физиологическим раствором.

Ссылки

1. Sheldon I, Price S, Cronin J, Gilbert R, Gladsby J. Механизмы бесплодия, связанного с клиническим и субклиническим эндометритом у высокопродуктивного молочного крупного рогатого скота. Reprod Domest Anim 2009; 44(доп. вып. 3):1–9.

2. Markusfeld O. Особенности околородового периода в семи высокопродуктивных молочных стадах. Частота возникновения, связь с числом отёлов и взаимосвязи между признаками. J Dairy Sci 1987;70:158–166.

3. Gröhn Y, Erb H, McCulloch C, Saloniemi H. Эпидемиология нарушений воспроизводства у молочного крупного рогатого скота: взаимосвязи между характеристиками животных, заболеваниями и продуктивностью. Prev Vet Med 1990; 8:25–39.

4. Dubuc J, Duffield T, Leslie K, Walton J, LeBlanc S. Определения и диагностика послеродового эндометрита у молочных коров. J Dairy Sci 2010;93:5225–5233.

5. Cheong S, Nydam D, Galvão K, Crosier B, Gilbert R. Факторы риска субклинического эндометрита у лактирующих голштинских коров на уровне отдельных животных и стада. J Dairy Sci 2011;94:762–770.

6. Rutigliano H, Lima F, Cerri R и др. . Влияние метода предварительной синхронизации и источника селена на состояние матки и воспроизводство у молочных коров. J Dairy Sci 2008;91:3323–3336.

7. Huzzey J, Veira D, Weary D, von Kerserlingk M. Поведение до отёла и потребление сухого вещества позволяют выявить коров с риском метрита. J Dairy Sci 2007;90:3220–3233.

8. Urton G, von Keyserlingk M, Weary D. Кормовое поведение позволяет выявить молочных коров с риском метрита. J Dairy Sci 2005;88: 2843–2849.

9. LeBlanc S. Послеродовые заболевания матки и показатели воспроизводства молочного стада: обзор. Vet J 2008;176:102–114.

10. Hammon D, Evjen I, Dhiman T, Goff J, Walters J. Функция нейтрофилов и энергетический статус у голштинских коров с заболеваниями матки. Vet Immunol Immunopathol 2006;113:21–29.

11. Smith B, Risco C. Предрасполагающие факторы и возможные причины послеродового метрита у молочного крупного рогатого скота. Comp Cont Educ Pract Vet 2002;24:S74–S80.