Воспроизводство крупного рогатого скота

Низкий/средний
Низкий уровень питания, N: P = 0.07
Низкий/высокий
Средний уровень питания, A: P < 0.001
10 10 Средний/средний
8 8
6 6
4 4
2 2
0 0
14 18 22 26 30 34
Средний/средний
Низкий уровень питания, N: P < 0.05 Низкий/средний
A: P < 0.0001
1.8 Средний уровень питания, A: P < 0.005 12 Низкий/высокий
1.5 10
1.2
8
0.9
6
0.6
4
0.3
2
0.0
14 18 22 26 30 34 38 42 46 50 54 58 62 66
Возраст (недели) Возраст (недели)
Период 1 Период 2
Импульсы ЛГ/10 ч Импульсы ЛГ/10 ч
Тестостерон (нг/mL) Тестостерон (нг/mL)

Рисунок 4.5 Среднее (± стандартная ошибка среднего) число импульсов ЛГ и концентрации тестостерона в сыворотке крови бычков пород ангус и ангус × шароле, получавших рацион со средним (контрольным) уровнем питания в возрасте от 10 до 70 недель либо рацион с низким уровнем питания в возрасте от 10 до 26 недель, а затем рацион со средним или высоким уровнем питания в возрасте от 27 до 70 недель. N, A и N*A обозначают соответственно влияние питания, возраста и взаимодействия питания с возрастом. Бычки из группы со средним/средним уровнем питания достигали половой зрелости раньше и имели большую суммарную массу обоих семенников в возрасте 70 недель, чем бычки из группы с низким/средним уровнем питания (293 против 331 дней и 600 против 528 g соответственно). У бычков из группы с низким/высоким уровнем питания возраст наступления половой зрелости и суммарная масса обоих семенников занимали промежуточное положение (313 дней и 553 g соответственно). Адаптировано по Brito L, Barth A, Rawlings N и др. . Влияние ограничения кормления в раннем возрасте на концентрации метаболических гормонов, гонадотропинов и тестостерона в сыворотке крови, а также на половое развитие бычков. Reproduction 2007;134:171– 181. Публикуется с разрешения Общества репродукции и фертильности.

межклеточные контакты над сперматогониями и в базальной части канальцев; первые признаки «растрескивания» цитоплазмы канальцев обнаруживаются примерно в возрасте 6 месяцев.^9–11 Вероятно, секреция ФСГ, созревание клеток Сертоли и усиление секреции тестостерона также участвуют в дифференцировке гоноцитов в сперматогонии. Гоноциты постепенно смещаются к базальной мембране и делятся митозом, образуя сперматогонии типа A. В результате дифференцировки и дегенерации гоноциты полностью исчезают из семенных канальцев к возрасту 5 месяцев. Сперматогонии типа A делятся митозом, образуя сперматогонии типа In и типа B, которые, в свою очередь, вступают в мейоз примерно в возрасте 4–5 месяцев.^{9,11,14,28,29}

Пубертатный период

Пубертатный период характеризуется снижением секреции гонадотропинов, усилением секреции тестостерона, началом сперматогенеза и последующим появлением сперматозоидов в эякуляте. Этот период также совпадает с началом фазы быстрого роста семенников (см. главу 5, где приведены графики

роста семенников) и продолжается приблизительно с 6 до 12 месяцев жизни у быков Bos taurus.

Быстрое усиление секреции тестостерона и, возможно, повышение чувствительности гипоталамуса к отрицательной обратной связи со стороны андрогенов, вероятно, обусловливают снижение секреции ЛГ в пубертатный период. При этом вырабатываемый клетками Сертоли ингибин может действовать на гонадотрофы, ограничивая секрецию ФСГ, поскольку иммунизация антисывороткой к ингибину вызывает выраженное повышение концентрации ФСГ у бычков в препубертатный период.^{30, 31}После 7 месяцев жизни масса клеток Лейдига медленно, но непрерывно увеличивается и к 24 месяцам достигает в семеннике молодого взрослого быка примерно 10 g вследствие значительного увеличения объёма клеток Лейдига (гипертрофии); масса митохондрий в клетках Лейдига с 10 до 24 месяцев жизни возрастает более чем вдвое.⁸После околопубертатного периода частота импульсов секреции тестостерона не увеличивается и с 6 до 10 месяцев жизни остаётся на уровне приблизительно 4.5–6.8 импульсов за 24 часов. Однако в период полового созревания амплитуда импульсов возрастает, вследствие чего средняя концентрация тестостерона повышается примерно до 12 месяцев жизни. Повышенная секреция тестостерона необходима для начала сперматогенеза.^6,19–21,32

Диаметр семенных канальцев увеличивается приблизительно до 200 мкм к 8 месяцам жизни и достигает 240 мкм к 16 месяцам.^14,28, 33 У быков голштинской породы общая длина семенных канальцев в одном семеннике увеличивается с 830 м в 3 месяцев жизни до 2010 м в 8 месяцев жизни.²⁸После 6–7 месяцев жизни большинство клеток Сертоли завершают морфологическую дифференцировку и приобретают строение, характерное для взрослых животных. При этом можно наблюдать контактные комплексы, состоящие из множества последовательно расположенных точек или линий слияния мембран соседних клеток Сертоли. Эти контакты образуют функциональный гематотестикулярный барьер и разделяют эпителий канальцев на базальный отдел, содержащий сперматогонии, и адлюминальный отдел, содержащий половые клетки на более поздних стадиях сперматогенеза; формирование функционального гематотестикулярного барьера сопровождается образованием просвета канальцев и предшествует появлению первичных сперматоцитов и половых клеток на более поздних стадиях развития.^9–11У быков голштинской породы число клеток Сертоли взрослого типа резко возрастает с 202 до 8862 миллионов клеток на семенник в возрасте 5 и 8 месяцев соответственно.²⁸

Пролиферация половых клеток достигает максимума между 4 и 8 месяцами жизни и отражает увеличение пула стволовых клеток сперматогониев. У быков голштинской породы число сперматогониев возрастает с 181 миллионов клеток на семенник в 4 месяцев жизни до 3773 миллионов клеток на семенник в 8 месяцев жизни; число сперматогониев продолжает увеличиваться примерно до 12 месяцев жизни.²⁸Число первичных сперматоцитов медленно увеличивается до 8 месяцев жизни, когда оно превышает число сперматогониев. Вторичные сперматоциты и округлые сперматиды впервые появляются приблизительно в 6–7 месяцев жизни, тогда как удлинённые сперматиды появляются примерно в 8 месяцев. После 10 месяцев жизни число сперматид быстро возрастает и становится больше числа половых клеток любого другого типа. Зрелые сперматозоиды появляются в семенных канальцах приблизительно в 8–10 месяцев жизни. Семенники массой более 100 g у быков шведской красно-пёстрой породы или более 80 g у быков голштинской породы, вероятно, уже вырабатывают сперматозоиды.^{9, 11, 14, 28, 29}В конечном итоге сперматогенез достигает такого уровня эффективности (то есть из отдельных клеток-предшественников образуется всё больше половых клеток на поздних стадиях развития), при котором вырабатывается количество сперматозоидов, достаточное для их появле-

ния в эякуляте, — физиологического события, характеризующего наступление половой зрелости (см. главу 5).

Метаболические гормоны в предпубертатный и пубертатный периоды

Механизмы регуляции размножения и энергетического баланса неразрывно связаны и сформировались в ходе эволюции, обеспечивая преимущества при размножении и выживание видов. Нервный аппарат, оценивающий интенсивность обмена веществ и энергетический баланс, получил название «метаболический сенсор» организма. Этот сенсор преобразует сигналы, определяемые концентрациями определённых гормонов в крови (на периферии), в нейронные сигналы, которые в конечном счёте регулируют генератор импульсов GnRH и управляют репродуктивным процессом. Гормоны — показатели метаболического состояния могут служить сигналами для гипоталамо-гипофизарно-гонадной оси и влиять на половое развитие. Динамика некоторых из этих гормонов изучалась у растущих быков мясных пород (рисунок 4.6). В отличие от видов, у которых концентрация циркулирующего гормона роста (GH) продолжает увеличиваться и после наступления половой зрелости, у быков концентрация GH в пубертатный период снижается.^16,34Различия в стадии развития организма, на которой представители разных видов достигают половой зрелости, вероятно, обусловливают различия в динамике GH между видами. Соответственно, динамика GH у быков, по-видимому, указывает на то, что для эффективной выработки сперматозоидов гонадами организм должен достичь относительно поздней стадии развития. Различия в секреции GH между видами могут быть связаны с регуляторным влиянием стероидов на его секрецию. У других видов стероиды стимулируют секрецию GH, но концентрации GH у интактных быков и кастрированных бычков не различаются.³⁵Кроме того, в ходе полового развития снижение концентрации GH наблюдается одновременно с повышением концентрации тестостерона, что указывает на отсутствие у быков положительной обратной связи между стероидами и секрецией GH, характерной для других видов.^16,34

Концентрация циркулирующего инсулиноподобного фактора роста (IGF)-I у быков непрерывно повышается и достигает плато

IGF-I
Инсулин
550 GH 22
500 Лептин 20
450 18
400 16
350 14
300 12
250 10
200 8
150 6
100 4
50 2
0 0
14 18 22 26 30 34 38 42 46 50 54 58 62 66 70
Возраст (недели)
IGF-I (нг/mL)
Инсулин, GH, лептин (нг/mL)

Рисунок 4.6Средние концентрации (± SEM) IGF-I, инсулина, GH и лептина в сыворотке крови в ходе полового развития у быков пород ангус и ангус × шароле при полноценном кормлении.^{16, 26, 27, 34}

(или несколько снижается) лишь после того, как половое развитие в основном завершается в возрасте старше 12–14 месяцев; в ходе полового развития также наблюдаются повышение концентрации циркулирующего белка, связывающего IGF, 3 и снижение концентрации белка, связывающего IGF, 2.^{16,26,27,34,36–38}Одновременное снижение концентрации циркулирующего GH и повышение концентрации IGF-I в ходе полового развития быков указывает либо на резкое изменение чувствительности печени к GH, либо на наличие других источников выработки IGF-I. Одним из возможных источников IGF-I могут быть семенники, поскольку у других видов клетки Лейдига способны секретировать этот гормон. Наблюдения, согласно которым у интактных быков в возрасте 12 месяцев концентрация IGF-I, как правило, выше, чем у кастрированных бычков, дополнительно подтверждают предположение о том, что семенники могут вносить существенный вклад в концентрацию циркулирующего IGF-I в предпубертатный и пубертатный периоды у быков.³⁵Тесные временные связи, выявленные в серии исследований кормления, убедительно указывают на то, что циркулирующий IGF-I может участвовать в регуляции генератора импульсов GnRH, а также величины и продолжительности раннего подъёма уровня гонадотропинов у быков мясных пород.^16,26,27

Также высказывалось предположение о возможном влиянии IGF-I на стероидогенез в семенниках быков. Клетки Лейдига и Сертоли вырабатывают IGF-I, что указывает на существование паракринных и аутокринных механизмов регуляции функции семенников с участием IGF-I.^39,40Предполагается, что большая часть IGF-I в семенниках вырабатывается локально, а циркулирующий IGF-I может играть второстепенную роль в регуляции развития и функции семенников. Однако временная динамика и тесная взаимосвязь между концентрацией циркулирующего IGF-I, размером семенников и секрецией тестостерона, наблюдавшиеся у быков при разных уровнях кормления, свидетельствуют в пользу ведущей роли этого гормона.^16,26,27Основная роль повышения концентрации циркулирующего IGF-I в пубертатный период может заключаться в повышении концентрации тестостерона за счёт регуляции размножения, дифференцировки и созревания клеток Лейдига. Поскольку тестостерон усиливает выработку IGF-I и экспрессию рецепторов IGF-I клетками Лейдига и Сертоли,⁴¹формирование положительной обратной связи между секрецией IGF-I и выработкой тестостерона может иметь важное значение для полового развития.

Концентрации циркулирующих лептина и инсулина у быков также повышаются в пубертатный период. Однако различия в частоте импульсов LH, связанные со стадией развития и уровнем кормления, у быков мясных пород не связаны с различиями в концентрациях лептина или инсулина.^16,27Другие исследования также показали, что лептин не стимулируетin vitroсекрецию GnRH в эксплантатах гипоталамуса или секрецию гонадотропинов в клетках аденогипофиза, полученных от быков и кастрированных бычков, содержавшихся при полноценном кормлении.⁴²Эти результаты указывают на то, что роль этих гормонов в регуляции секреции GnRH у быков, если она вообще существует, может быть исключительно пермиссивной.

Развитие семенников, не зависящее от GnRH

Быстрый рост семенников, наблюдаемый у быков после 6 месяцев жизни, происходит на фоне снижения концентраций циркулирующих гонадотропинов, что указывает на существование важных механизмов регуляции развития семенников, не зависящих от GnRH. Период ускоренного роста семенников совпадает с повышением концентраций циркулирующих IGF-I и лептина; у

растущих быков мясных пород^16,34выявлена тесная взаимосвязь между этими гормонами и размером семенников, что указывает на возможное участие метаболических гормонов в регуляции развития семенников, не зависящего от GnRH. Поскольку в этих исследованиях не было обнаружено связи между концентрациями циркулирующих метаболических гормонов и гонадотропинов, возможное влияние метаболических гормонов на рост семенников, вероятно, является прямым и не зависит от гипоталамуса и гипофиза. Ускоренный рост семенников у быков сопровождается увеличением диаметра и длины семенных канальцев, объёма паренхимы семенников, занимаемого семенными канальцами, и общего числа половых клеток.^9,28Хотя концентрации IGF-I и лептина связаны с размером семенников, связи между этими гормонами и диаметром и площадью семенных канальцев, площадью семенного эпителия или объёмом, занимаемым семенными канальцами, не обнаружено (L.F.C. Brito, неопубликованные результаты). Эти наблюдения позволяют предположить, что повышение концентраций циркулирующих IGF-I и лептина связано с увеличением длины семенных канальцев и, вероятно, с общим увеличением числа клеток семенников. С учётом клеточных процессов, происходящих в семенниках в пубертатный период, временная динамика концентраций метаболических гормонов указывает на то, что циркулирующие IGF-I и лептин могут участвовать в регуляции размножения и созревания клеток Лейдига, созревания клеток Сертоли и размножения половых клеток в период ускоренного роста семенников у быков, не зависящего от GnRH.

Концентрации рецепторов LH и FSH в семенниках быков мясных пород снижаются примерно в 5–6 месяцев жизни, но затем повышаются как минимум приблизительно до 13 месяцев жизни, что может увеличивать чувствительность клеток Лейдига и Сертоли к низким концентрациям гонадотропинов в фазе быстрого роста семенников.²⁹К другим механизмам, которые могут быть связаны с ростом семенников, не зависящим от GnRH, относятся изменения концентраций и биодоступности в семенниках факторов роста, таких как трансформирующий фактор роста (TGF)-α, TGF-β1, TGF-β2 и TGF-β3, а также интерлейкин (IL)-1α, IL-1β и IL-6.^43,44Кроме того, эксперименты по оценке влияния питания на половое развитие показали, что воздействие гонадотропинов на ткани-мишени в препубертатный период имеет долгосрочные последствия для развития семенников у быков. У быков, у которых частота импульсов секреции ЛГ была выше или её повышение в период раннего подъёма секреции гонадотропинов было более продолжительным, период ускоренного роста семенников был длительнее, а их размер в возрасте 15–16 месяцев — больше, даже если после 6 месяцев различий в концентрациях метаболических гормонов или тестостерона не наблюдалось. Эти результаты указывают на то, что предполагаемое влияние циркулирующих метаболических гормонов, гонадотропинов, местных факторов роста и других неизвестных факторов в период быстрого роста семенников может зависеть от предшествующего воздействия ЛГ в препубертатный период. По-видимому, характер секреции ЛГ во время раннего подъёма секреции гонадотропинов «задаёт программу» развития семенников и определяет их максимальный размер у быков.^{16, 26, 27}

Список литературы

1. Amann R, Wise M, Glass J, Nett T. Препубертатные изменения в гипоталамо-гипофизарной системе быков голштинской породы. Biol Reprod 1986; 34:71–80.

2. Wise M, Rodriguez R, Kelly C. Регуляция секреции ЛГ гонадами у бычков в препубертатный период. Domest Anim Endocrinol 1987;4: 175–181.