Воспроизводство крупного рогатого скота

Материалы, необходимые для взятия проб, включают в себя инфузионную пипетку, шприц на 12 мл, маркерную ручку, емкость для хранения трих-пакетиков в вертикальном положении после инокуляции (прививки, помещения в них зараженного образца) , ножницы, дезинфицирующее средство, бумажные полотенца, перчатки для осмотра, шприц на 60 мл, физиологический раствор, InPouch™, вторичные транспортные контейнеры и изолированный транспортный бокс^5,7,13 (рис. 56.2).

Быки должны быть освобождены от случки за 1 неделю до тестирования. Сбор образцов начинается с подготовки необходимых материалов и удержания быка таким образом, чтобы образец был взят правильно и безопасно. Задняя нога, ближайшая к ветврачу, при необходимости может быть привязана для безопасности. Ветеринар надевает чистую пару латексных перчаток, чтобы уменьшить вероятность перекрестного заражения между быками. Волосы возле препуциального отверстия подстригают, а само отверстие высушивают бумажным полотенцем. Крайняя плоть теперь может быть промыта небольшим количеством физиологического раствора у быков, у которых она чрезмерно грязная или сухая. Инфузионную пипетку прикрепляют к стерильному шприцу объемом 12 мл. Пипетку желательно защитить пластиковым чехлом. Затем пипетку продвигают в канал препуциального мешка приблизительно до уровня свода, и крайняя часть достаточно агрессивно соскребается с одновременным приложением отрицательного давления в присоединенном шприце (Рисунок 56.3). Соскоб должен быть достаточно агрессивным, чтобы захватить не менее 1,5–2 см смегмы внутрь пипетки, но не настолько агрессивным, чтобы образец был загрязнен кровью. Затем образец инокулируется в правильно идентифицированный InPouch™ (автономное устройство со средой для выделения и обнаружения патогена) .

Пипетку помещают в среду в верхней камере InPouch™, аспирируя и удаляя жидкость несколько раз, чтобы эффективно смыть образец из пипетки в среду. Пакет затем складывают несколько раз в соответствии с рекомендациями производителя для экспрессии жидкости и образца из верхнего в нижний отсек пакета. Затем пакет закрывают проволочными стяжками и помещают в вертикальное положение. Теперь он должен быть защищен от прямых солнечных лучей и храниться при температуре от 20 до 37°C до тех пор, пока он не попадет в лабораторию с собственноручной доставкой или посредством службы ночной доставки. Поскольку требования к перевозке могут варьироваться в разных лабораториях, необходимо проконсультироваться с лабораториейполучателем до начала тестирования.^4,5,7,10,13

Для доставки пакеты должны быть помещены во вторичный транспортный контейнер, который трудно помять, а он помещен в изолированный бокс (коробку) , который должным образом маркирован для биологических продуктов, подлежащих отправке в течение ночи.^7,13 Эти образцы должны быть отправлены в ветеринарную диагностическую лабораторию, которая придерживается руководящих принципов, соответствующих или превышающих те, которые установлены Американской ассоциацией ветеринарных лабораторных диагностов. Эти лаборатории нацелены использовать лучшие доступные методы тестирования и по мере необходимости обращаются к услугам сторонних лабораторий для подтверждения результатов. Недавно появились новые устройства для отбора проб у быков. Устройство, известное как бычий рашпиль или Tricamper™, продаваемый в Австралии, и устройство, известное как Trichit™, которое продается в Соединенных Штатах, вводятся в препуциальную полость, как и пипетка, и используются для соскоба тканей. Эти устройства затем промывают в питательную среду для извлечения образца. Эти устройства могут обеспечить лучший отбор проб с меньшим загрязнением кровью. Сбор образцов слизи из влагалища у самок для культивирования или ПЦР также можно осуществить с помощью пипетки или любого из этих устройств¹⁴ (рис. 56.4).

Поскольку надлежащие методы отбора проб и их обработки непосредственно связаны с лабильной природой патогена, Общество териогенологии рекомендует ветеринарам пройти подготовку перед предоставлением образцов T. fetus.¹⁵ В некоторых штатах требуют или рассматривают возможность обучения и сертификации ветеринаров по взятию образцов T. fetus, прежде чем лаборатории примут от них образцы.

В стадах, о которых известно, что они заражены T. fetus, следует использовать серийное тестирование в сочетании с изменениями в управлении для создания стада без заболевания.⁵ Поскольку нет никакого законного или эффективного лечения для быков, зараженных T. fetus, эти быки должны быть отправлены на убой.^1,5 Расположение зараженных животных должно быть согласовано с руководителями. Не существует законного или эффективного лечения инфицированных коров, но поскольку самки обычно сами устраняют инфекцию, можно рассмотреть иные варианты, кроме убоя.^1,3,6 Положительные коровы могут содержаться в отдельном стаде и осеменяться ИО. В стадах с известными положительными случаями, нестельные положительные коровы должны быть выбракованы, абортированные плоды должны быть проверены на наличие T. fetus, а вакцинация может быть использована для ограничения воздействия заболевания.^1,16

Заключение

В 1947 году д-р Дейв Бартлетт суммировал практические меры борьбы с трихомониазом при естественном осеменении крупного рогатого скота на два основных принципа: не допускать осеменения восприимчивых коров инфицированными быками и осеменения восприимчивыми быками инфицированных коров.¹⁷

Эти принципы составляют основу борьбы с трихомониазом сегодня и могут быть достигнуты благодаря вниманию к деталям, знаниям о болезни и здравому смыслу. Следует избегать смешивания животных из разных стад. Ограниченный случной сезон и своевременная диагностика стельности могут повысить вероятность более раннего выявления проблемы.

Старших быков следует заменить более молодыми, и проверять всех быков перед введением в стадо и перед каждым сезоном размножения. Выявленных при диагностике стельности холостых коров, следует отбраковать. Абортировавших коров или имеющих заметные выделения, следует отбраковывать, а абортированные плоды или любые выделения следует проверять на наличие T. fetus. Существует вакцина против T. fetus, и хотя эффективность вакцины исторически считалась ограниченной, было показано, что она уменьшает негативное влияние заболевания у самок. Недавняя работа Cobo и соавт.¹⁶ указывает на то, что вакцинация быков также может быть полезной. ИО с использованием спермы от быков с отрицательным анализом на трихомониаз, явно ограничивает распространение болезни, хотя техники ИО должны придерживаться жестких процедур профилактики заболеваний. Вакцинация от других репродуктивных заболеваний облегчит проблему трихомониаза в стаде с репродуктивной недостаточностью.

Как и в случае многих других проблем со здоровьем стада, командный подход, задействующий производителей, ветеринаров и руководящий персонал, является наилучшим способом разработки и реализации эпидемиологически обоснованных протоколов биобезопасности для предотвращения внедрения венерического трихомониаза. Надлежащее тестирование имеет первостепенное значение для предотвращения заражения, а также для оздоровления инфицированных стад. Точность тестирования напрямую связана с качеством образца, что, в свою очередь, напрямую связано с его надлежащим сбором, обработкой и доставкой.

Ссылки

1. BonDurant R. Венерические заболевания крупного рогатого скота: естественное течение, диагностика и роль вакцин в борьбе с ними. Vet Clin North Am Food Anim Pract 2005;21:383–408.

2. Edmondson M. Борьба с трихомонозом крупного рогатого скота у самок. Clin Theriogenol 2013;5:225–230.

3. Corbeil B, Campero M, Hoosear V, BonDurant H. Обнаружение трихомонад разных видов в половых путях быков, использовавшихся и не использовавшихся для разведения. Vet Parasitol 2008;154:226–232.

4. Peter D, Fales W, Miller R и др. Tritrichomonas foetus Инфекция в стаде крупного рогатого скота в штате Миссури. J Vet Diagn Invest 1995;7:278–280.

5. Ondrak J, Keen J, Rupp G, Kennedy J, McVey D, Baker W. Повторные исследования методом культивирования и ПЦР для выявления быков — носителей Tritrichomonas foetus в заражённом стаде штата Небраска. J Am Vet Med Assoc 2010;237:1068–1073.

6. Ho M, Conrad P, Conrad P, LeFebvre R, Perez E, BonDurant R. Выявление трихомоноза крупного рогатого скота с помощью специфического ДНК-зонда и системы ПЦР-амплификации. J Clin Microbiol 1994;32:98–104.

7. Cobo E, Favetto P, Lane V и др. Чувствительность и специфичность культурального исследования и ПЦР образцов смегмы быков, экспериментально заражённых Tritrichomonas foetus . Theriogenology 2007;68: 853–860.

8. Rae D, Crews J, Greiner E, Donovan G. Эпидемиология Tritrichomonas foetus в популяциях быков мясных пород во Флориде. Theriogenology 2004;61:605–618.

9. Strickland L, Wolfe D, Carson R и др. Поверхностная архитектоника эпителия полового члена и препуция быков. Clin Theriogenol 2011;3:362 (аннотация).

10. Mukhufhi N, Irons P, Michel A, Peta F. Оценка ПЦР-теста для диагностики Tritrichomonas foetus у быков: влияние способа отбора проб, условий хранения и транспортной среды на результаты теста. Theriogenology 2003;60:1269–1278.

11. BonDurant R, Campero C, Anderson M, Van Hoosear K. Выявление Tritrichomonas foetus методом полимеразной цепной реакции в культивированных изолятах, цервиковагинальной слизи и тканях заражённых тёлок и плодов, фиксированных формалином. J Vet Diagn Invest 2003;15:579–584.

12. Montilla H, Estill C, Villarroel A, Bounpheng M. Материалы конференции Американской ассоциации американских ветеринарных диагностов,

• 52-я ежегодная конференция, 7–14 октября 2009 г., Сан-Диего, Калифорния. Дата обращения: 1 января 2011 г.; www.aavld.org/assets/ documents/2009%20Proceedings%20Book%20_92309.pdf

• Parker S, Campbell J, Ribble C, Gajadhar A. Факторы, связанные с отбором проб, влияют на чувствительность диагностического теста на Tritrichomonas foetus у быков. Can J Vet Res 2003;67:138–141.

• McMillan L, Lew A. Усовершенствованное выявление Tritrichomonas foetus в диагностических образцах от крупного рогатого скота с помощью нового метода ПЦР в реальном времени на основе зондов. Vet Parasitol 2006;141:204–215.

• Позиция по вопросу тестирования на Tritrichomonas foetus. Общество териогенологов. Доступно по адресу http://www.therio.org/?page=P ositionStatement#TRitri

• Cobo E, Corbiel L, Gershwin C, BonDurant R. Клеточный и антительный ответ в препуции быков после вакцинации и/или экспериментального заражения Tritrichomonas foetus . Vaccine 2010;28:361–370.

• Bartlett D, Hanson E, Teeter K. Обнаружение Tritrichomonas foetus в пробах из препуция инфицированных быков. J Am Vet Med Assoc 1947;110(839):114–120.