Y-образная шейка матки
У Y-образной шейки матки одно отверстие во влагалище, а примерно посередине шейка раздваивается. Иногда имеется общее тело матки, но чаще каждый канал шейки ведёт только в один рог, не сообщающийся с другим через общее тело матки. Это означает, что при искусственном осеменении и сборе эмбрионов с каждым рогом необходимо работать отдельно. Обычно один из каналов шейки шире, и, если аномалия не выявлена, осеменение всегда будет проводиться в один и тот же рог. Внимательный специалист распознает аномальную шейку по отсутствию общего тела матки. Это особенно заметно у реципиентов с Y-образной шейкой. Неспециалисты нередко искусственно осеменяют коров с такой аномалией и даже собирают у них эмбрионы, не понимая, в чём дело (рисунок 76.13).
Перевёрнутая Y-образная шейка матки
У перевёрнутой Y-образной шейки матки два отверстия во влагалище, но оба канала сходятся в средней части шейки и ведут в одно общее тело матки. Таких коров можно искусственно осеменять и промывать им матку. Недостаточно внимательный специалист может даже не распознать аномалию, а просто посчитать, что через шейку трудно провести катетер. Диагностика в этом случае не столь важна, поскольку рога имеют общее тело матки: независимо от того, какое влагалищное отверстие используется, все яйцеклетки должны оплодотворяться, а эмбрионы — извлекаться (рисунок 76.14).
Двуствольная шейка матки
При этой аномалии во влагалище имеются два отверстия и две полностью раздельные шейки матки, каждая из которых ведёт в свой рог. Такую аномалию легче выявить при пальпации. Шейка заметно
шире обычной. При глубокой пальпации можно прощупать бороздку, напоминающую промежуток между стволами двуствольного ружья. Через каждый «ствол» необходимо проводить искусственное осеменение отдельно, а из каждого рога отдельно собирать эмбрионы, поскольку общего тела матки нет (рисунок 76.15).
Повреждения, причинённые техником по искусственному осеменению
Утолщённая стенка прямой кишки
Если при пальпации донора перед сбором эмбрионов через 7 дней после искусственного осеменения вы ощущаете утолщённую, отёчную стенку прямой кишки, это явный признак того, что у техника возникли трудности при осеменении. Иногда прямая кишка травмирована настолько сильно, что безопасно собрать эмбрионы у коровы невозможно. Если сбор всё же проводится, нередко обнаруживаются неоплодотворённые яйцеклетки, что указывает на то, что сперма так и не была введена в матку.
Бурые сгустки крови
Бурые сгустки крови в первой порции извлечённой жидкости обычно указывают на то, что инструмент для искусственного осеменения травмировал тело матки и вызвал кровотечение — от слабого до сильного. Бурый цвет означает, что кровь пролилась несколько дней назад, скорее всего при осеменении. Это ещё один тревожный признак того, что эмбрионы могут оказаться неоплодотворёнными. Бурые сгустки крови — враги специалиста.
Введённая жидкость исчезает и не извлекается
На ум приходят три причины. Во-первых, инструмент для искусственного осеменения мог вызвать перфорацию, которая ещё не зажила. Во-вторых, вы сами могли перфорировать стенку. При прежней травме обычно обнаруживаются
бурые сгустки крови, тогда как при свежей травме кровь всегда красная. В обоих случаях процедуру промывания можно спасти, если удастся найти место перфорации: достаточно провести катетер дальше отверстия, раздуть баллон и промыть рога по отдельности.
Третья причина серьёзна и почти всегда приводит к потере всех эмбрионов. Когда имеется много неовулировавших фолликулов, наполненных активно вырабатывающимся эстрогеном, сфинктер в области маточно-трубного соединения (UTJ) примерно на 5-й день не закрывается должным образом. При введении жидкости в матку на 7-й день она просто проходит через UTJ в яйцевод и вытекает в брюшную полость, унося с собой все эмбрионы. Такая недостаточность сфинктера встречается нечасто, но мне приходилось неоднократно с ней сталкиваться. В некоторых случаях при первых промываниях с введением 25 mL в каждый рог утечки не было, но она возникала, когда я увеличивал объём до 50 или 75 mL на каждый рог. Поэтому при первых двух введениях следует использовать меньший объём жидкости, а при последующих увеличивать его. Утешает то, что из-за повышенного уровня эстрогена эти эмбрионы обычно и так не были оплодотворены.
Образования на наружной поверхности матки
Образование размером от стеклянного шарика до мяча для гольфа вблизи тела матки указывает на вероятную травму, вызванную инструментом для искусственного осеменения или грубой пальпацией, с образованием гематомы. Со временем такие образования рассасываются, но, если они очень велики, в день промывания возникают затруднения.
Гематомы тазовой области
Гематомы тазовой области, возникшие вследствие травмы при неправильной установке CIDR, могут помешать доступу к матке. Обычно они расположены с одной стороны, на 3 часов или на 9 часов по условному циферблату, и выступают в полость таза. Назначьте
антибиотики системного действия на 1 неделю для предотвращения образования абсцесса. Если абсцесс всё же образуется, дренируйте его через прокол со стороны влагалища.
Повреждения, причинённые специалистом по пересадке эмбрионов
Крепитация в широкой связке матки указывает на разрыв эндометрия, из-за которого промывочная среда просочилась в связку. Ощущение напоминает газовую крепитацию в поражённых мышцах при эмфизематозном карбункуле. Если вы столкнулись с этим, прекратите промывание, введите пенициллин в матку и назначьте пенициллин системного действия на 5 дней. Эмбрионы будут потеряны, попав в связку. Частая причина — смещение манжеты назад при промывании рогов либо чрезмерное раздувание манжеты при промывании рога или тела матки. Это ощущение невозможно забыть. Крепитация — враг специалиста.
Во время промывания возле тела матки, особенно в области раздвоения, или вдоль серозной оболочки рога могут внезапно появиться гематомы, если обращаться с маткой слишком грубо. При пальпации всегда надавливайте плоской поверхностью пальцев и по возможности избегайте давления кончиками пальцев.
Другие проблемные области
Травматические спайки
Причины их образования разнообразны. Кесарево сечение или осложнённые роды, приведшие к перфорации, могут вызвать выраженные спайки, из-за которых манипуляции с маткой становятся затруднительными или невозможными. Паутинообразные спайки вокруг яичника, вероятно, связаны с перенесённой восходящей инфекцией матки или сальпингитом. Это серьёзная проблема с неблагоприятным прогнозом. Такие паутинообразные спайки часто затрагивают яичниковую сумку и мешают захвату яйцеклетки во время овуляции. Лучший способ лечения с расчётом на долгосрочный результат — попытаться добиться стельности коровы путём пересадки эмбриона в надежде, что растяжение матки устранит достаточно спаек для прохождения сперматозоидов и яйцеклеток через яйцевод. В качестве альтернативы in vitro можно попробовать оплодотворение (IVF).
Иногда при проведении катетера можно ощутить, что серозная оболочка матки стала зернистой, словно наждачная бумага. Происхождение этого изменения неизвестно, но на ощупь оно весьма характерно. Я подозреваю, что травма, нанесённая «крылышками» CIDR, может вызывать воспаление в тазовой области с отложением фибрина на серозной оболочке. В большинстве случаев помогает неоднократное введение пенициллина местно и назначение пенициллина системного действия (100 mL ежедневно в течение 7 дней).
Параовариальные кисты
Небольшие узелки вокруг яичниковой сумки обычно не вызывают патологии, если только не достигают очень крупных размеров. Большинство из них меньше 10 cm.
Предотвращение нежелательной или многоплодной стельности
После промывания всем донорам следует вводить простагландин. Обычно в конце промывания я ввожу в матку 5 mL препарата Lutalyse, а затем прошу владельца ввести 5 mL (25 mg) внутримышечно дважды в течение третьего дня после промывания. Это быстро уменьшает размеры яичников и прерывает нежелательную стельность. Если сбор эмбрионов у коров проводят с интервалом 21–28 дней, очень важно быстро уменьшить размеры яичников. Однако
введение PGF2α в матку до проверки чашек на наличие эмбрионов лишает вас возможности при необходимости повторно промыть матку донора. Двукратного внутримышечного введения на 10-й день (через 3 дня после промывания) будет достаточно для предотвращения стельности, если можно положиться на то, что владелец не забудет сделать инъекции.
Полезные советы
Проба с покачиванием
Даже когда катетер проходит через шейку матки нормально, иногда он закупоривается. После введения первой порции жидкости и до начала массажа концов рогов матки можно с помощью простого теста убедиться, что просвет катетера проходим. Пока жидкость находится в матке, до открытия выпускного зажима и пальпации концов рогов осторожно сожмите область раздвоения два-три раза. При каждом сжатии вы должны увидеть, как пузырьки воздуха проходят из катетера обратно в прозрачную трубку: это свидетельствует о проходимости. Если жидкость или пузырьки не движутся в каудальном направлении, значит, есть проблема с оттоком. Если её не удаётся устранить массажем кончика катетера, изменением степени раздувания манжеты или перемещением манжеты в теле матки, сейчас самое подходящее и безопасное время, чтобы извлечь катетер и ввести новый. Если вы ещё не массировали концы рогов матки, потеря эмбрионов крайне маловероятна.
Метод вымывания слизи
Когда провести катетер через шейку матки трудно, его боковые отверстия возле кончика нередко забиваются шеечной слизью. Избыток слизи в чашке для промывочной жидкости — враг специалиста. Слизь можно легко удалить вымыванием до того, как жидкость попадёт в рога матки. Раздув манжету катетера в теле матки, обхватите большим и указательным пальцами оба рога непосредственно перед телом матки (рисунок 76.16). Быстро введите через катетер 15–20 mL среды и сразу откройте выпускную трубку, дав жидкости стечь на пол. Повторите это два-три раза, пока в жидкости, вытекающей из выпускной трубки, не перестанет быть слизи. Помните: оба рога нужно держать пережатыми, чтобы жидкость поступала только в тело матки и вытекала только из него. Отсоедините трубку от катетера и тщательно промойте её, прежде чем снова присоединять к катетеру и чашке для сбора промывочной жидкости.
Сбор эмбрионов на открытом воздухе в холодную погоду
Чтобы среда не остывала, мы используем два пластиковых выдвижных ящика, которые можно поставить друг на друга (из Wal-Mart). На дне каждого лежит небольшой электрический коврик с подогревом. В верхнем ящике на коврике лежит пакет со средой. В нижнем ящике чашка с фильтром стоит на переднем краю коврика; там сделано отверстие, через которое жидкость из фильтровальной чашки стекает на пол.
Чтобы защитить трубку, идущую от коровы к чашке, мы используем отрезок вспененной теплоизоляции для водопроводных труб длиной 120–cm, разрезанный вдоль по всей длине. Мы помещаем трубку внутрь этого отрезка, чтобы жидкость во время промывания оставалась относительно тёплой. При сильном холоде внутри изоляции можно также проложить электрический нагревательный кабель.
Заключительные замечания о сборе эмбрионов
Сбор эмбрионов — сложная и увлекательная процедура для специалистов. Постоянно появляются новые идеи относительно методик, инструментов и материалов, которые затем испытываются на практике. Надеюсь, вы выработаете надёжную методику, в которой будете уверены, научитесь успешно работать со всеми нормально устроенными матками и достаточно хорошо ориентироваться во всех случаях сбора эмбрионов при аномальном строении матки. Даже спустя 35 лет меня по-прежнему удивляет, что всё это действительно работает и что мы можем с таким удовольствием зарабатывать на жизнь, помогая своим клиентам содействовать генетическому прогрессу в скотоводстве.
Теперь вы готовы передать чашку для поиска эмбрионов под микроскопом, их оценки и подготовки к пересадке в свежем виде или замораживанию. Поскольку эти вопросы рассматриваются в других главах, перейдём к методике нехирургической пересадки свежих и замороженных эмбрионов.
Пересадка эмбриона
Нехирургическая пересадка эмбрионов прекрасно иллюстрирует старую поговорку: «Цепь не прочнее своего самого слабого звена». Успех зависит от многих факторов, на некоторые из которых вы как специалист повлиять не можете. Сейчас я гораздо лучше, чем раньше, понимаю, насколько многочисленные внешние воздействия влияют на моих
