Воспроизводство крупного рогатого скота

Сопоставимо
SCL1 188 --- 38(20.2) 20(52.6) 1 0.05%
SCNT
SCL2 169 --- 48(28.4) 29(60.4) 13 7.6%
Клоны Дробление Бластоцисты Беременность Живорождённые Общая
или роды эффективность
Комплексы ооцит — кумулюс (COCs)
IVMFC
100 70 30(30) 15(50) 11 11%
Развитие

(a) (b)

(c)

(d) (e)

(f)
10 mm

Рисунок 82.6Сравнение развития нежизнеспособного (a–c) и жизнеспособного (d–f) плодов, полученных методом SCNT, с помощью трансректального ультразвукового исследования на 45-й (a, d), 55-й (b, e) и 65-й (c, f) дни. Нежизнеспособный плод был жив на 45-й день (регистрировалось сердцебиение) и мёртв на 55-й день (сердцебиение отсутствовало). На 65-й день по мере дегенерации плода стало заметно повышение эхогенности амниотической жидкости. Копчиково-теменная длина (cm) нежизнеспособного и жизнеспособного плодов на каждом из этих сроков составляла соответственно 3 и 2.8, 3.7 и 5.7, 3.7 и 7.5. Воспроизведено по работе Hill J, Burghardt R, Jones Kи др.Доказательства того, что аномалии плаценты являются основной причиной гибели клонированных методом переноса ядер соматических клеток плодов крупного рогатого скота в первом триместре.Biol Reprod2000;63:1787–1794, с разрешения Wiley-Blackwell. Изображение любезно предоставлено доктором Джонатаном Хиллом из Квинслендского университета.

(a) (b)
(c) (d)

Рисунок 82.7Каждую исследованную плаценту после SCNT можно было отнести к одной из групп: гипоплазированная (a, 40-й день), частично развитая, с уменьшенным числом рудиментарных котиледонов (b, 45-й день), или практически нормальная (c, 50-й день). Для сравнения показана контрольная плацента (d, плацента плода, полученного методом IVMFC, на 53-й день). Воспроизведено по работе Hill J, Burghardt R, Jones Kи др.Доказательства того, что аномалии плаценты являются основной причиной гибели клонированных методом переноса ядер соматических клеток плодов крупного рогатого скота в первом триместре.Biol Reprod2000;63:1787–1794, с разрешения Wiley-Blackwell. Изображение любезно предоставлено доктором Джонатаном Хиллом из Квинслендского университета.

от коров, гомозиготных по MHC¹⁹(см. таблицу 82.3). Напротив, клеточные линии, при использовании которых наблюдалась высокая частота гибели плодов, были получены от коров, гетерозиготных по MHC, что указывает на определённую степень несовместимости.

Во втором триместре беременности клонированным плодом частота самопроизвольных абортов возрастает. При полном макроскопическом и гистопатологическом исследовании абортированных плодов выявляется мало аномалий. Однако плаценты нередко имеют выраженные патологические изменения: число плодных котиледонов значительно снижено (иногда их менее 20 вместо ожидаемых 70–120)⁹(рисунок 82.8). Плодные оболочки обычно утолщены и отёчны.

Потери беременности в третьем триместре, особенно между 200 и 265 днями (нормальный срок родов — 280 дней), представляют собой более сложную проблему. Многие случаи гибели плодов в этот период связаны с повышенной частотой водянки аллантоиса (то есть водянки плодных оболочек) — чрезмерного накопления жидкости в различных отделах плаценты (например, g водянки аллантоиса или амниона)²⁰и у плода (водянка плода). При умеренной или тяжёлой водянке живот заметно увеличивается из-за чрезмерного накопления жидкости (рисунок 82.9). В быстро развивающихся случаях возникает риск разрыва матки и других опасных осложнений у суррогатной коровы-реципиента, что требует немедленной эвтаназии.²⁰Попытки «спасти»

(a) (b)
(c) (d)
(e)
203 дней

Рисунок 82.9(a) Суррогатная корова-реципиент с водянкой на 203-й день беременности. (b) После эвтаназии; яичник расположен на конце первого рога матки (на него указывает рука человека). (c) Более чёткое изображение матки с водянкой; плод находится в расположенном позади первом роге матки. (d) Аномальная плацента клонированного плода с плацентомами разного размера (от 50 g до 1 kg) и отёчными плодовыми оболочками. (e) Клонированный плод джерсейской породы массой 30 kg с увеличенной пуповиной. Изображение (d) воспроизведено по работе Edwards J, Schrick F, McCracken Mи др.Клонирование взрослых сельскохозяйственных животных: обзор возможностей и проблем, связанных с переносом ядер соматических клеток.Am J Reprod Immunol2003;50:113–123, с разрешения John Wiley & Sons.

плод путём экстренного кесарева сечения часто оказываются тщетными, поскольку плод к этому времени нередко уже мёртв. Даже если извлечь его достаточно рано, неонатальной помощи недостаточно, чтобы сохранить жизнь новорождённым, появившимся на свет на том сроке, когда диагностируется большинство случаев водянки. Для плацент клонированных плодов характерны значительно уменьшенное число плацентом разного размера и выраженная гипертрофия многих котиледонов. Нередко наблюдаются повышенная частота образования добавочных плацентом и сильный отёк межкотиледонарных участков плодных оболочек (см. рисунок 82.9).

Водянка плода часто наблюдается у клонов, развивавшихся при беременности, осложнённой водянкой. Большинство аномалий чрезмерно крупных клонированных плодов соответствуют последствиям водянки и плацентарной недостаточности. Обычно наблюдаются анасарка плода с генерализованным отёком и выраженный отёк пуповины (см. рисунок 82.9). В лёгких плодов на поздних сроках беременности обычно обнаруживаются чешуйки амниотического эпителия и меконий, что указывает на некоторую степень стрессавнутриутробноперед гибелью.

Хотя частота и тяжесть водянки при беременности клонированным плодом различаются, наблюдалась частота до 86%.⁹По нашему опыту, в 37% случаев из 58% всех беременностей, осложнившихся водянкой, её тяжесть требовала эвтаназии суррогатной коровы-реципиента во избежание дальнейшего вреда от осложнений. Некоторые производители, опрошенные FDA в рамках оценки рисков клонирования животных, начиная с 150-го дня беременности тщательно наблюдали за суррогатными коровами-реципиентами с помощью ультразвукового исследования на предмет появления признаков водянки. Учитывая неблагоприятный прогноз для плода и риск опасных осложнений у суррогатной коровы-реципиента, после постановки диагноза беременность следует прервать.

Хотя клоны могут погибнуть сразу после рождения или вскоре после него (в течение примерно 48 часов), выживаемость может достигать 50–70%. Выживаемость в некоторой степени связана с массой тела при рождении (рисунок 82.10). В выборке, представленной на рисунке 82.10, большинство выживших клонированных телят джерсейской породы (L, живые)