Воспроизводство крупного рогатого скота

• История абортов в стаде (спорадический / рецидивирующий / новый, сколько за последнюю неделю / месяц / год, какой триместр затронут, поражает коров старшего / младшего возраста / всех коров, любое/ конкретное время года), проблемы с доношенными телятами (врожденные дефекты).

• Проводятся ли послеродовые обследования регулярно?

• Режим кормления, виды фуража, концентратов, минералы, селен.

• Есть ли изменения в управлении, содержании, пастбище?

• Какое качество корма?

• Источник воды / качество?

Окружающая среда

• Доступ стада к другому скоту, животным, хищникам.

• Состав и качество пастбищ.

• Есть ли ядовитые растения на пастбище?

• Недостаток питательных веществ в пастбищах.

Обследование коровы

В некоторых случаях состояние здоровья коровы может быть на прямую связано с прерыванием беременности (план кормления, респираторные/кишечные заболевания, заражение Anaplasma sp.). Любые выделения из влагалища или цервикальная слизь должны быть собраны и отправлены в диагностическую лабораторию для микробиологического анализа. Образцы крови для серологии должны быть взяты от коровы-матки, а также от незатронутых коров и тех, которые недавно абортировали. Сыворотка должна быть получена с интервалом в 2–3 недели, чтобы получить парные образцы. Сбор сыворотки от 10 других коров стада (или 10% от стада) сделает серологическую оценку более достоверной.⁶ Цельная кровь с ЭДТА полезна при анализе мазка крови и химического анализа сыворотки стельной коровы. Во время всех исследований следует одевать перчатки, так как могут присутствовать зоонозные агенты.

Обследование тканей

Вскрытие - это исследование с целью получения максимального количества информации. Таким образом, жизненно важно быть методичным, чтобы во время каждого обследования отбирать полный комплект тканей. Оптимально следует отправить весь плод и оболочки в диагностическую лабораторию для оценки. Это имеет первостепенное значение для плодных оболочек, поскольку они могут быть диагностически значимыми. Если это затруднительно, то следует использовать стандартный подход, описанный здесь.

Исследования должны быть направлены на предполагаемую этиологию, но имейте в виду, что может присутствовать более одного патогена. Типичные находки у абортированных телят, которые умерли в утробе матери, включают отечные красные ткани, которые не имеют нормального тинкториального (окрашивание) различия, прозрачная красная жидкость в полостях тела, бледная мягкая печень и рыхлые аутолитически измененные почки. Цифровые фотографии являются отличным способом документировать поражения и могут быть полезны для связи с диагностическими лабораториями.

Обследование плода

Важно проверить приблизительное время смерти, что можно сделать на основании грубых признаков. При смерти плода в предродовой срок ткани подвергаются аутолизу или мумификации и характеризуются признаками, описанными выше. При смерти во время родов наблюдаются признаки жизни (локализованный отек головы или конечностей, частичная аэрация легких, переломы конечностей/ребер, подкожное кровоизлияние в области плечевых бугров, разрывы печени с кровоизлиянием) в дополнение к надлежащей степени созревания/формирования плода. Неонатальная смерть характеризуется аэрацией легких, тромбозом пупочной артерии (опухшие пурпурные/красные узелки вдоль артерий, которые проходят латерально к мочевому пузырю), потерей эпонихия (мягкий кератин копытцев плода) и молока в желудке.⁴¹ Метод вскрытия для абортированных плодов в основном такой же, как и для любого животного. Отмечают степень аутолиза и массу плода и плаценты. Даже при сильном автолизе ткани плода могут быть использованы для ПЦР-скрининга (полимеразной цепной реакции) на наличие патогенов. Определить гестационный возраст можно по следующей формуле: x = 2,5 (y + 21), где y - копчико-теменной размер в сантиметрах, а x - срок стельности в днях.⁷ Теменная точка - это точка пересечения линии, проходящей между глазными орбитами и линии, пересекающей фронтальное возвышение; копчиковая точка - основание хвоста или первого хвостового позвонка.⁴² У эмбрионов наибольшая общая длина может быть использована вместо копчико-теменного размера. В случае мертворождений вес плода полезен для диагностики дистоции вследствие диспропорции плода и матери. Кроме того, может быть полезным соотношение веса теленка к весу щитовидной железы в случаях подозрения на гипертиреоз (зоб). По сообщениям нормальная масса щитовидной железы у телят варьирует от 6,5 до 18 г.⁴³ Дальнейшее обсуждение этого вопроса можно найти в разделе, посвященном неинфекционным причинам абортов.

У большинства абортированных телят нет грубых повреждений. Могут присутствовать небольшие бело-коричневые очаги в легких, печени и почках, указывающие на некроз или воспаление. Присутствие фибрина на поверхности органов помогает подтвердить воспаление. Меконий на промежности или в дыхательных путях/желудке указывает на стресс и аноксию (отсутствие снабжения тканей и органов кислородом) у плода, как правило, связанные с плацентитом или дистоцией (рис. 54.12). Кровотечение и переломы плечевого и тазобедренного суставов чаще всего наблюдаются в результате дистоции.

Слегка вздутые белые бляшки на коже, которые плотно прилегают, особенно вокруг глаз и морды, указывают на грибковую инфекцию. Иногда у телят на волосах рассеивается белый минерал, который легко удаляется; эта находка не имеет существенного значения, но ее следует отличать от прилегающих грибковых бляшек (рис. 54.13).

У телят, рожденных мертвыми, легкие не наполнены; они равномерного тусклого красно-сливового оттенка, тяжелые и тонут в формалине (см. рис. 54.4). В случаях дистоции, когда у плода может быть частичное дыхание, легкие могут быть не полностью расправлены; необходимо оценить аэрацию легких в срезах краниальных и каудальных долей по степени флотации в фиксаторующей жидкости. Отметьте присутствие любого молока в желудке, так как это указывает на потребление молозива, что повлияет на бактериологические и серологические результаты.⁷

Метод вскрытия

Лучше всего подготовить комплект для исследования аборта заранее; в таблице 54.4 перечислены материалы, которые должны быть в комплекте. Могут присутствовать зоонозные патогены, поэтому всегда надевайте перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз/лица и используйте осторожную технику при исследовании матки и тканей плода. Кроме того, необходимы материалы, используемые при стандартных аутопсиях: чистая вода, ведро, щетка и дезинфицирующее средство.

Таблица 54.4 Содержимое комплекта для обследования аборта.

Обязательно дезинфицируйте загрязненные участки и оборудование. Если есть вопросы относительно того, какие образцы лучше всего взять, свяжитесь с диагностической лабораторией, в которую образцы будут переданы для консультации. Фотографирование повреждений - это относительно простая и превосходная практика, которая поможет в диагностике.

1. Измерьте длину от темени до хвоста (копчико-теменной размер) вдоль позвоночного столба (см. Выше) и взвесьте плод и плаценту отдельно. Осмотрите кожу вокруг глаз и морды на предмет экссудата и патологий, в частности, на наличие признаков грибковой инфекции.

2. Осмотрите тело на предмет врожденных аномалий, пупочных грыж, волчьей пасти, лицевых аномалий.

3. Вымойте поверхность плода водой, чтобы удалить грубые загрязнения.

4. Разместив плод левой стороной вниз, надрежьте правые конечности ножом, отодвиньте их и продолжите разрез от краниальной до каудальной, препарируя кожу до дорсальной и вентральной средних линий. Соберите любую смешанную кровь между рассеченными тканевыми плоскостями с помощью шприца, если таковой имеется (для серологии).

5. Вскройте брюшную полость в самой высокой точке вдоль каудальной линии ребер, следя за тем, чтобы не загрязнить брюшную жидкость или ткани. Аспирируйте любые жидкости в брюшной полости с помощью стерильного шприца, поместите в стерильную пробирку, наклейте этикетку и поставьте в холодильник. Продолжайте разрез вдоль каудальной стороны ребер, вдоль поясничной области и краниальной части таза, чтобы обнажить брюшную полость. Обратите внимание на любые повреждения, а также объем, характер и цвет жидкостей. Разрежьте диафрагму (отмечая наличие отрицательного давления) и разрезжьте ребра по реберным углам и вдоль грудины; удалите стенку грудной клетки. Аспирируйте любые жидкости в грудной полости с помощью стерильного шприца, поместите в стерильную пробирку, наклейте этикетку, охладите. Обратите внимание на любые повреждения, а также объем, характер и цвет жидкости. Плевральная поверхность удаленной стенки грудной клетки может использоваться как временная разделочная доска/стерильное поле для рассечения.

6. Аспирируйте жидкости из не вскрытого сычуга стерильным шприцем, поместите в стерильную пробирку, наклейте этикетку, охладите. Обратите внимание на характер жидкости в брюшной полости. Возьмите образцы любых других подозрительных жидкостей.

7. Исследуйте полости тела и органы на месте, отмечая фибрин, кровоизлияния или неправильно расположенные органы.

8. Удалите грудные органы от языка к легкому (оторвите). Осмотрите рот; можно разделить нижнечелюстной симфиз ножом. Разрежьте пищевод по всей длине; надрежьте дорсальную трахеальную мембрану от гортани до бронхов. Осмотрите грудную клетку на наличие переломов. Сделайте несколько срезов долей легких, осматривая срезы на наличие изменений в долях и дыхательных путях.

9. Осмотрите щитовидную железу. Соберите ткани, особенно в местах поражения (см. Номера 16 и 17).

10. Осмотрите сердце, проверив все четыре основных клапана и четыре камеры. Ищите дефекты межжелудочковой перегородки или другие аномалии.

11. Соберите внутренние органы, осматривая желудочно-кишечный тракт последним. Идентиицируйте почки, мочеточники и мочевой пузырь. Удалите желудочно-кишечный тракт, разрезав корень брыжейки, и продолжайте резать диафрагму вдоль спины, избегая мочевыводящих путей. Затем тракт можно вытащить из брюшной полости, оставив толстую кишку прикрепленной и невскрытой. Соберите ткани, особенно в местах поражений (см. Номера 16 и 17).

1. Удалите надпочечники.

2. Удалите мочевыводящие пути, сделав несколько срезов почек. Идентифицируйте половые органы.

3. Поочередно разрежьте печень и селезенку.

4. Вскройте преджелудки и сычуг, осмотрите на предмет содержимого. Перейдите к кишечнику, делая несколько разрезов вдоль каждого основного раздела (двенадцатиперстной кишки, тощей кишки, подвздошной кишки, слепой кишки, ободочной кишки). Изучите содержимое и слизистую оболочку.

5. Соберите органы (почки, печень, легкие, селезенку, тимус, надпочечники) в стерильные пакеты (плацента хранится в отдельной сумке), охладите.

6. Соберите в формалин для гистопатологии 5-ти миллиметровые срезы: легких, печени, почек, селезенки, сердца, надпочечников, скелетных мышц (три-четыре отдела, включая язык, диафрагму), щитовидной железы, подвздошной кишки, кожи (включая веко), тимуса и брыжеечного лимфатического узла.

7. Отделите голову от тела в области атланто-затылочного сустава. Соберите весь мозг, даже если он сильно автолизирован, и поместите весь в формалин. Если плод сильно аутолизирован, перед фиксацией возьмите мазок из ткани головного мозга. Череп является относительно мягким и может быть легко открыт с помощью пилы посредством двух разрезов вдоль внутренних сторон затылочных мыщелков, краниально (и несколько латерально по изгибу свода черепа) к внутренним сторонам орбитальных ободков (края глазницы) . Сделайте третий разрез поперек орбитального гребня, соединяя первые два разреза. Отделите вырезанный кусок черепа от головы. Поместите мозг в ладонь и с помощью скальпеля аккуратно разрежьте нервные отростки основания мозга, позволяя мозгу попасть в вашу руку.

8. Соберите глазную жидкость с помощью иглы / шприца для определения уровня нитратов / нитритов, если необходимо, заморозьте.

9. Откройте несколько суставов, ищите гнойный экссудат, фибрин и кровоизлияния.

10. Изучите плодные оболочки на наличие экссудата, поражения, аномалии.(см. следующий раздел для получения подробных инструкций). Удалите грязь / мусор с мембран до отбора проб.

11. Поместите два-три среза с котиледонами в стерильный пакет, охладите; произведите отбор мазков с любых пораженных участков.

12. Возьмите образцы плаценты для гистопатологии (не менее трехчетырех срезов, включая котиледоны и межкотиледонные области).

13. Возьмите образцы околоплодных вод, если они есть, охладите.

14. Возьмите образцы крови абортировавшей коровы в пробирку с красным верхом (также могут быть собраны образцы крови от других коров стада; рекомендуется 10 коров или 10% стада).

Исследование плодных оболочек

Соберите как можно больше мембран и тщательно осмотрите хориоаллантоис и амнион, так как поражения могут быть трудноразличимыми, очаговыми и их можно легко пропустить. Во многих случаях оболочек мало или их вообще невозможно исследовать. Важно попытаться проверить, все ли мембраны были удалены. Из-за прикрепления амниона к хориону, а также из-за короткой пуповины у плода, оболочки разрываются и плод выходит из амниона и хориоаллантоиса при родах. Обычно мембраны обнаруживаются с наружней стороны котиледонов.

Плодные оболочки можно разложить в длину, чтобы идентифицировать пупок и вместе с ним внутреннюю часть амниона. В это же время лучше всего проводить исследование амниотических оболочек и жидкостей. Пупок состоит из четырех мышечных тургидных (тургор - набухший, наполненный) сосудов (артерий и вен), свободно скользящих внутри оболочек.

Гравидный (беременный) рог легко идентифицировать как бо'льшую половину ткани с бо'льшими плацентомами. Аваскулярные (бессосудистые) кончики хориона следует находить и тщательно осматривать, так как истинные поражения плаценты могут присутствовать в гравидном роге рядом с кончиком.¹⁶ Пуповина непрерывна с пупочными артериями и венами, которые образуют продольную ось, по которой можно ориентироваться в плаценте. От нее можно исследовать внутреннюю часть аллантоисной полости, уделяя внимание природе присутствующих жидкостей, толщине и цвету мембран и специфическим запахам. Обычно во время такого исследования встречаются аллантоисные кальцинаты.

После размещения пупочных сосудов с одной стороны ткани можно сделать продольный разрез вдоль противоположной стороны плаценты, который позволит открыть плаценту и разложить ее на плоскости, при этом пупочные сосуды образуют центральную ось (Рисунок 54.14). Рога имеют неодинаковый размер, а гравидный рог намного больше. Таким образом, сосуды и ряды котиледонов (обычно четыре) могут быть тщательно исследованы. Свежие котиледоны имеют красную бархатистую текстуру со слегка неровной поверхностью. Следует отметить изменение размера, формы, цвета, консистенции и степени пятнистости котиледонов, а также степень аутолиза. Иногда могут быть видны небольшие лоскуты прикрепленной карункулярной ткани. Края котиледонов, как правило, четко очерчены, а межкотиледонные участки хориона белые, полупрозрачные и гладкие. Адвентициальная плацентация - это частая находка, которая проявляется в виде небольших котиледонов или ворсинчатых пучковидных образований, прилегающих к плацентомам, которые могут покрывать всю плаценту.

Сбор образцов

В каждом случае аборта следует собирать полный набор тканей.⁴⁴ Биологические образцы должны надлежащим образом отбираться, подготавливаться, храниться и транспортироваться, в противном случае будет нарушена точность диагностики. Важно поддерживать асептические условия, несмотря на очевидное загрязнение тканей; это необходимо для увеличения шансов на достоверную диагностику и последующую профилактику зоонозной инфекции. Микробиологические образцы должны храниться в охлажденном виде и их следует как можно скорее отправить в диагностическую лабораторию в пенополистирольном холодильнике с пакетами со льдом ночной курьерской доставкой. Если образцы свежей ткани не могут быть отправлены в течение 2–3 дней, то идеальным вариантом будет замораживание при –70°C и доставка на сухом льду.⁴⁴ При необходимости образцы можно временно поместить при –20 °C до получения сухого льда. Традиционно замороженные ткани (-20 °C) часто приемлемы для ПЦР-тестирования многих патогенов.