Воспроизводство крупного рогатого скота

Липиды в цитоплазме

Хотя липиды являются необходимым компонентом клеточных мембран и должны присутствовать в жизнеспособных эмбрионах, у некоторых эмбрионов наблюдается аномальное накопление липидных капель (также называемых вакуолями) в цитоплазме отдельных клеток. Большинство специалистов снижают категорию качества эмбриона, если в нём имеется более нескольких мелких вакуолей. Высокое содержание липидов в цитоплазме может быть одной из причин снижения частоты наступления беременности после переноса замороженных и оттаянных эмбрионов, особенно эмбрионов молочного скота джерсейской породы.²² На рисунках 79.13 и 79.14 показаны вакуоли в отдельных клетках эмбрионов крупного рогатого скота.

Трещина в блестящей оболочке

Обычно трещина в блестящей оболочке обнаруживается только у эмбрионов на стадии вылупляющейся бластоцисты (код стадии 8). Однако у некоторых эмбрионов она может появиться и на более ранних

(a) (b)

Рисунок 79.11 Оба эмбриона, (a) и (b), относятся к категории IETS 6-1. У эмбрионов на стадиях 6 и 7 экструдированные клетки часто прижаты к блестящей оболочке и могут быть незаметны, если эмбрион не спался. (a) Не повернув этот эмбрион и не получив хорошего обзора полости бластоцеля, которая скрыта расположенными сверху экструдированными клетками, трудно определить, что это бластоциста. Его легко принять за дегенерирующую неоплодотворённую яйцеклетку.

стадиях развития, предположительно из-за гидростатического давления, воздействующего на эмбрион при его извлечении (рисунки 79.15, 79.16 и 79.17). Хотя трещина в блестящей оболочке не приводит автоматически к снижению категории качества эмбриона, надлежащим образом промыть можно только эмбрионы с неповреждённой блестящей оболочкой; только они¹⁹ сохраняют право на экспорт. Однако эмбрион с трещиной всё же можно заморозить для использования внутри страны.

Неправильная форма клеточной массы эмбриона

Неправильная форма клеточной массы эмбриона наблюдается часто, особенно у эмбрионов на стадии бластоцисты, когда формируется полость бластоцеля.

Спадение полости бластоцеля считается нормальным физиологическим процессом и само по себе не приводит к снижению категории качества, за исключением случаев, когда блестящая оболочка также деформирована. На рисунке 79.18 показана группа эмбрионов нормальной и неправильной формы.

Материал, прилипший к блестящей оболочке

При извлечении эмбрионов нередко обнаруживается, что к наружной поверхности блестящей оболочки некоторых из них прилип материал. Это могут быть слизь, отдельные клетки или комочек ткани. Прилипший к блестящей оболочке материал может указывать на эндометрит у донорской коровы; это также могут быть клетки кумулюса, не отделившиеся при обычном перемещении гамет, или клетки эндометрия донорской коровы. На рисунках 79.19 и 79.20 показаны эмбрионы крупного рогатого скота с прилипшим материалом. Прилипшие

остатки часто можно смыть с блестящей оболочки при промывании эмбрионов по процедуре, одобренной IETS.¹⁹ В некоторых случаях может потребоваться промывание в растворе трипсина 0.25%. Промывание эмбрионов с неповреждённой блестящей оболочкой в соответствии с рекомендациями IETS должно удалять прилипшие остатки, а также многие патогены.

Наличие остатков, прилипших к наружной поверхности блестящей оболочки, не обязательно влияет на присвоение эмбриону категории качества. Однако любой эмбрион с прилипшим материалом не допускается к коммерческой торговле ни внутри страны, ни на международном рынке.

Трудности точной оценки качества и классификации эмбрионов

Одна из самых сложных задач для специалистов, обучающихся оценивать качество и классифицировать эмбрионы, — правильно отличать компактную морулу от неоплодотворённой яйцеклетки (UFO): эти два объекта могут быть очень похожи по размеру, форме и цвету. На рисунке 79.21 рядом показаны компактные морулы и неоплодотворённые яйцеклетки, и нетрудно представить, как неопытный специалист может по ошибке описать все эти объекты либо как компактные морулы, либо как неоплодотворённые яйцеклетки. Особенно вероятна такая ошибка при изучении образцов с меньшим увеличением или с помощью стереомикроскопа с низким качеством оптики. Компактная морула отличного качества и UFO при большем увеличении показаны на рисунках 79.22 и 79.23. Эти изображения хорошо показывают, насколько трудно иногда различить такие две стадии развития. Как отмечалось ранее, исключительно важно уметь отличать компактную морулу от UFO, чтобы не допустить переноса (или криоконсервации) неоплодотворённой яйцеклетки и/или выбраковки компактной морулы. По мере накопления опыта оценки эмбрионов различать эти две стадии становится легче.

Другая распространённая ошибка классификации возникает, когда часть неоплодотворённой яйцеклетки дегенерирует и светлеет, становясь похожей на полость бластоцеля у эмбриона на стадии бластоцисты (рисунок 79.24). Опытные специалисты могут различить эти объекты по слою трофобласта, который «окружает» полость бластоцеля у эмбриона на стадии бластоцисты, а также по клеткам внутренней клеточной массы (ICM), которые присутствуют только в бластоцисте.