Воспроизводство крупного рогатого скота

эффективности, как при очистке эмбрионов, полученных in vivo. Однако показано, что эти процедуры существенно снижают степень контаминации эмбрионов, полученных методом ЭКО, после их искусственного воздействия такими возбудителями, как BHV-1 и BVDV.^86,87,93 Таким образом, как и в случае с эмбрионами, полученными in vivo, для завершения оценки риска необходимы дальнейшие исследования. В частности, требуется всесторонне оценить, достаточно ли количества BVDV, связанного с эмбрионами, для заражения реципиентов и/или их плодов после переноса эмбрионов в матку. Очевидно, что штамм вируса оказывает огромное влияние на его сродство к эмбрионам, поэтому при оценке фактического риска его необходимо учитывать.⁶⁵

Третье поколение эмбриональных технологий

К третьему поколению эмбриональных технологий относятся клонирование, в частности перенос ядра соматической клетки, и трансгенные технологии. Эти технологии включают созревание и удаление ядер из ооцитов, введение ядер соматических клеток, активацию, культивирование in vitro, при необходимости криоконсервацию и нехирургический перенос. Для третьего поколения эмбриональных технологий характерны те же риски, что и для второго, с несколькими дополнительными оговорками. Они связаны с тем, что прозрачную оболочку разрушают либо удаляют, а донорские ядра получают из дополнительных клеточных линий. Используемые клеточные линии часто культивируют в течение 8–12 недель для увеличения числа клеток. Кроме того, процедуры размножения клеток могут способствовать репликации нецитопатогенного BVDV и заражению им этих клеточных линий вследствие использования материалов животного происхождения, таких как ооциты, полученные на бойнях, и сыворотка крови плодов крупного рогатого скота, при получении и культивировании эмбрионов.

Присутствие нецитопатогенного BVDV может проявляться низкой эффективностью клонирования и нарушениями развития, низкой частотой наступления беременности, ранней гибелью эмбрионов, потерей плодов и аномалиями у новорождённых. Пример проблем, которые могут быть связаны с контаминацией BVDV в системах клонирования, подробно описан в работе Shin и соавт.⁹⁴ В этой работе сообщается о высокой частоте нарушений развития плодов крупного рогатого скота, полученных путём клонирования с использованием клеток, инфицированных BVDV. В частности, линия фибробластов плода была непреднамеренно инфицирована нецитопатогенным штаммом BVDV. В результате при использовании этой клеточной линии наблюдались чрезвычайно высокая гибель эмбрионов и резорбция плодов.⁹⁴ В другом исследовании Stringfellow и соавт. ,⁹⁵ при анализе образцов, направленных в ветеринарные диагностические лаборатории, установили, что 15 из 39 линий фибробластов плода, использовавшихся в исследованиях по клонированию, дали положительный результат на BVDV по данным различных анализов, включая полимеразную цепную реакцию с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР). Однако было установлено, что фактически BVDV были инфицированы только 5 из 39 клеточных линий. Кроме того, было установлено, что три из этих пяти линий не были инфицированы на самом раннем криоконсервированном пассаже. Это позволило заключить, что клеточные линии заразились после культивирования в средах, содержавших контаминированную сыворотку крови плодов крупного рогатого скота. Сравнение последовательностей амплифицированной кДНК из одной партии такой сыворотки подтвердило, что она была источником инфекции для одной из этих клеточных линий.⁹⁵ Поскольку BVDV был выделен из двух оставшихся клеточных линий уже на самом раннем доступном пассаже, нельзя было исключить, что источником вируса являлись плоды, из которых эти линии были

получены. Эти исследования подчёркивают дополнительные проблемы, связанные с клонированием и трансгенными технологиями, а также более высокий риск получения контаминированных эмбрионов при использовании этих методов. Поэтому исключительно важен строгий контроль качества для предотвращения заражения эмбрионов патогенами и передачи патогенов реципиентам при переносе эмбрионов. Это имеет большое значение для всех поколений эмбриональных технологий, причём с каждым последующим поколением потребность в таком контроле возрастает.

Применение эмбриональных технологий продолжает расширяться и у других видов, включая свиней, коз, овец, лошадей, а также диких животных. Как и у крупного рогатого скота, существуют различные возбудители, вызывающие опасения и способные приводить к гибели эмбрионов и плодов. В обзоре Givens и Marley⁹⁶ обобщены сведения о бактериальных, грибковых, протозойных и вирусных причинах нарушений репродуктивного развития у крупного рогатого скота, овец, коз, свиней, лошадей, собак и кошек. Эта работа показывает, насколько важно при применении эмбриональных технологий разумно использовать вакцинацию и меры биобезопасности, чтобы свести к минимуму репродуктивные потери.

Экспериментальные методы обработки

Добавление антибиотиков и противогрибковых препаратов в среды значительно уменьшает проблемы, связанные с бактериями и грибами при культивировании. Однако вирусная контаминация представляет собой более сложную угрозу. В ряде недавних исследований изучалось добавление противовирусных веществ, таких как интерферон-тау, который, согласно опубликованным данным, снижает количество BVDV в культуре, но не BHV-1.⁹⁷ Кроме того, показано, что другие противовирусные соединения, такие как 2-(4-[2-имидазолинил]фенил)-5-(4-метоксифенил)фуран (DB606), подавляют репликацию BVDV в эпителиальных клетках маточных труб крупного рогатого скота, клетках почки крупного рогатого скота линии Madin Darby и фибробластах плода, не оказывая отрицательного влияния ни на развитие эмбрионов, ни на последующую плодовитость тёлок, полученных из эмбрионов после ЭКО, обработанных DB606.^98,99 В более позднем исследовании Newcomer и соавт.¹⁰⁰оценили спектр противовирусной активности другого сходного соединения — дигидрохлорида 2-(2-бензимидазолил)-5-[4-(2-имидазолино)фенил]фурана (DB772) — в отношении различных пестивирусов. Изоляты BVDV 2, вируса пограничной болезни, вируса HoBi, вируса вилорогой антилопы и вируса Bungowannah проверяли на чувствительность in vitro к DB772, инкубируя инфицированные клетки в среде с различными концентрациями DB772. Было установлено, что DB772 эффективно подавляет все изученные пестивирусы при концентрациях выше 0.20 мкmol/L, при этом признаков цитотоксичности не наблюдалось.¹⁰⁰Эти соединения, DB606 и DB772, наряду с интерфероном-тау потенциально способны снижать присутствие вирусных патогенов, в частности пестивирусов, в культуре. Это может позволить использовать их при культивировании эмбрионов и размножении линий фибробластов для клонирования и получения трансгенных животных.^99–101

Заключение

Необходимо продолжать оценку этих новых подходов и их внедрение в системы культивирования для предотвращения заражения эмбрионов патогенами. Вполне возможно, что в будущем эти соединения станут основой надёжного метода ограничения распространения инфекционных вирусов, связанных с эмбрионами. Однако

надлежащая биобезопасность и контроль качества всегда играют первостепенную роль в предотвращении заражения эмбрионов патогенами и должны быть в центре внимания стандартных операционных процедур при использовании технологий работы с эмбрионами любого поколения.

Список литературы

1. Smith RD. Определения. В кн.: Smith RD (ред.) Клиническая эпидемиология в ветеринарии, 3-е изд. Бока-Ратон, Флорида: CRC Press, 2005, с. 10–12.

2. Thibier M, Stringfellow D. Консультативный комитет по здоровью и безопасности (HASAC) Международного общества трансплантации эмбрионов (IETS) на протяжении двух десятилетий успешно решал важнейшие задачи. Theriogenology 2003;59:1067–1078.

3. Stroud B. Ежегодный отчёт Комитета IETS по сбору данных. Embryo Transfer Newsletter, декабрь 2012, с. 16–26. http:// www.iets.org/pdf/Newsletter/Dec12_IETS_Newsletter.pdf

4. Thibier M. Ежегодный отчёт Комитета IETS по сбору данных. Embryo Transfer Newsletter, декабрь 2010, с. 11–21. http:// www.iets.org (доступ к архиву бюллетеня ограничен членами IETS).

5. Betteridge K. Размышления по случаю пятидесятой годовщины первой трансплантации эмбриона, в результате которой родился телёнок. Theriogenology 2000;53:3–10.

6. Mapletoft R. Трансплантация эмбрионов крупного рогатого скота. В кн.: Morrow DA (ред.) Современные методы лечения в териогенологии, 2-е изд. Филадельфия: Saunders, 1986, с. 54.

7. Guerin B, Nibart M, Marquant-Le Guienne B, Humblot P. Санитарные риски, связанные с трансплантацией эмбрионов. Theriogenology 1997;47:33–42.

8. Wrathall A, Brown K, Sayers A и др. Исследования трансплантации эмбрионов от крупного рогатого скота с клиническими признаками губкообразной энцефалопатии крупного рогатого скота (BSE). Vet Rec 2000;150:365–378.

9. Stringfellow D, Givens M. Эпидемиологические вопросы, связанные с получением эмбрионов сельскохозяйственных животных in vivo и in vitro. Anim Reprod Sci 2000;60–61:629–642.

10. Bielanski A, Hare W. Методы планирования и анализа исследований передачи инфекционных болезней при трансплантации эмбрионов. В кн.: Stringfellow DA, Seidel SM (ред.) Руководство Международного общества трансплантации эмбрионов, 3-е изд. Савой, Иллинойс: Международное общество трансплантации эмбрионов, 1998, с. 143–149.

11. Backx A, Heutink R, Van Rooij E, Van Rijn P. Трансплацентарная и пероральная передача вируса блютанга дикого типа серотипа 8 у крупного рогатого скота после экспериментального заражения. Vet Microbiol 2009;138:235–243.

12. Jimmeénze-Clavero M, Aguero M, san Miguel E и др. Высокопроизводительное выявление вируса блютанга с помощью новой флуорогенной полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в реальном времени: применение к клиническим образцам из районов текущих вспышек в Средиземноморье. J Vet Diagn Invest 2006;18:7–17.

13. Wrathall A, Simmons H, Van Soom A. Оценка рисков передачи вирусов реципиентам эмбрионов крупного рогатого скота при оплодотворении спермой, заражённой вирусами. Theriogenology 2006; 65:247–274.

14. Kirschvink N, Raes M, Saegerman C. Влияние естественного заражения вирусом блютанга серотипа 8 на качество спермы бельгийских баранов в 2007 году. Vet J 2009;182:244–251.

15. DeClercq K, De Leeuw I, Verheyden B и др. Трансплацентарное заражение и, по-видимому, развитие иммунологической толерантности вследствие естественного заражения вирусом блютанга дикого типа серотипа 8. Transbound Emerg Dis 2008;55:352–359.

16. Maclachalan M, Drew C, Darpei K, Worwa G. Патология и патогенез блютанга. J Comp Pathol 2009;141:1–16.

17. Menzies F, McCullough S, McKeown I и др. Доказательства трансплацентарной и контактной передачи блютанга у крупного рогатого скота. Vet Rec 2008;163:203–209.

18. Mintiens K, Meroc E, Mellor P и др. Возможные пути заноса вируса блютанга серотипа 8 в эпицентр эпидемии 2008 года в Северо-Западной Европе. Prev Vet Med 2008;87:131–144.

19. Hare W. Состояние исследований передачи болезней и их значение для международного перемещения эмбрионов крупного рогатого скота. Can Vet J 1985;27:37–45.

20. Singh E. Возможности использования эмбрионов для борьбы с болезнями. Theriogenology 1987;27:9–20.

21. Stringfellow D. Рекомендации по санитарной обработке эмбрионов, полученных in vivo. В кн.: Stringfellow DA, Seidel SM (ред.) Руководство Международного общества трансплантации эмбрионов , 3-е изд. Савой, Иллинойс: Международное общество трансплантации эмбрионов, 1998, с. 79–84.

22. Аноним. Кодекс здоровья наземных животных 4.7.14. Всемирная организация здравоохранения животных (OIE), Париж, 2013. http://www. oie.int/index.php?id=169&L=0&htmfile=chapitre_1.4.7.htm.

23. Thibier M. Трансплантация эмбрионов: сравнительное преимущество в обеспечении биобезопасности при международном перемещении генетического материала. Rev Sci Tech 2011;30:177–188.

24. Продовольственная и сельскохозяйственная организация Объединённых Наций (FAO). Учебное руководство по трансплантации эмбрионов у крупного рогатого скота . http: //www.fao.org/docrep/004/T0117E/T0117E14.htm.

25. Mapletoft R. Трансплантация эмбрионов у крупного рогатого скота. В кн.: Morrow DA (ред.) Современные методы лечения в териогенологии , 2-е изд. Филадельфия: Saunders, 1986, с. 59, 60.

26. Brock K, Grooms D, Ridpath J, Bolin S. Изменения уровня виремии у крупного рогатого скота, персистентно инфицированного вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота. J Vet Diagn Invest 1998;10:22–26.

27. Stringfellow D. Использование материалов животного происхождения в программах получения эмбрионов: по-прежнему рекомендуется соблюдать осторожность. Embryo Transfer Newsletter 2002;20:11.

28. Gard J, Givens M, Stringfellow D. Вирус вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV): эпидемиологические вопросы, связанные со спермой и эмбрионами. Theriogenology 2007;68:434–442.

29. Cohn E, Strong L, Hughes W мл. и др. Препараты и свойства белков сыворотки и плазмы. IV. Система разделения белковых и липопротеиновых компонентов биологических тканей и жидкостей на фракции. J Am Chem Soc 1946;68:459–475.

30. Schiewe M. Общие правила гигиены и контроля качества в лаборатории по получению эмбрионов. В кн.: Stringfellow DA, Seidel SM (ред.) Руководство Международного общества трансплантации эмбрионов , 3-е изд. Савой, Иллинойс: Международное общество трансплантации эмбрионов, 1998, с. 93–102.

31. Rossi C, Bridgman R, Kiesel G. Вирусная контаминация культур клеток лёгких плодов крупного рогатого скота и фетальной сыворотки крупного рогатого скота. Am J Vet Res 1980;41:1680–1681.

32. Bolin S, Ridpath J. Распространённость генотипов вируса вирусной диареи крупного рогатого скота и антител к ним в фетальной сыворотке крупного рогатого скота. J Vet Diagn Invest 1998;10:135–139.

33. Nettleton P, Vilcek S. Обнаружение пестивирусов в сыворотке крупного рогатого скота. В сб.: Материалы международного семинара, организованного EDQM, Париж , 2001, с. 69–75.

34. Sweeney R, Whitlock R, Rosenberger A. Mycobacterium paratuberculosis выделена из плодов инфицированных коров без признаков заболевания. Am J Vet Res 1992;53:477–480.

35. Whittington R, Windsor P. Внутриутробное инфицирование крупного рогатого скота Mycobacterium avium подвида paratuberculosis : критический обзор и метаанализ. Vet J 2009;179:60–69.

36. Fray M, Prenctice H, Clarke M, Charleston B. Иммуногистохимические доказательства локализации вируса вирусной диареи крупного рогатого скота — одноцепочечного РНК-вируса — в ооцитах яичников коровы. Vet Pathol 1998;35:253–259.

37. Аноним. Глава 4.7.5 Кодекса здоровья наземных животных, раздел «Управление рисками». www.oie.int.

38. Stringfellow D. Возможности трансплантации эмбрионов крупного рогатого скота для борьбы с инфекционными заболеваниями. Rev Sci Tech Off Int Epiz 1985; 4:859–866.

39. Stringfellow D, Riddell K, Zurovac O. Возможности трансплантации эмбрионов для борьбы с инфекционными заболеваниями сельскохозяйственных животных. NZ Vet J 1991;39:8–17.

40. Baker J. Вирус вирусной диареи крупного рогатого скота: обзор. J Am Vet Med Assoc 1987;190:1449–1458.

1. Houe H. Эпидемиологические особенности и экономическое значение инфекций, вызываемых вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV). Vet Microbiol 1999;64:135–144.

2. Hessman B, Fulton R, Sjeklocha D. Оценка экономических последствий, состояния здоровья и продуктивности общей популяции крупного рогатого скота после контакта с животными, персистентно инфицированными вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота, на площадке начального откорма. Am J Vet Res 2009;70:73–85.

3. Kirkland P, Mackintosh S, Moyle A. Последствия широкого использования спермы быка, персистентно инфицированного пестивирусом. Vet Rec 1994;135:527–529.

4. McClurkin A, Coria M, Cutlip R. Воспроизводительная способность внешне здорового крупного рогатого скота, персистентно инфицированного вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота. J Am Vet Med Assoc 1979;174:1116–1119.

5. Grooms D. Последствия заражения вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота для воспроизводства. Vet Clin North Am Food Anim Pract 2004: 20:5–19.

6. Gregg K, Chen S, Guerra Tи др.Чувствительный и эффективный метод выявления вируса вирусной диареи крупного рогатого скота (BVD) в отдельных эмбрионах крупного рогатого скота перед реимплантацией.Theriogenology 2009;71:966–974.

7. Houe H. Экономические последствия инфекции BVDV в молочном скотоводстве.Biologicals 2003;31:137–143.

8. Lindberg A, Alenius S. Принципы искоренения инфекции, вызываемой вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV), в популяциях крупного рогатого скота.Vet Microbiol 1999;64:197–222.

9. Houe H, Lindberg A, Moennig V. Стратегии тестирования в рамках европейских кампаний по борьбе с вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота и его искоренению.J Vet Diagn Invest 2006;18:427–436.

10. Grom J, Barlic-Maganja D. Вирусная диарея крупного рогатого скота (BVD): программа борьбы и искоренения инфекции в племенных стадах Словении.Vet Microbiol 1999;64:259–264.

11. Ferrari G, Scicluna M, Bonvicini Dи др.Программа борьбы с вирусной диареей крупного рогатого скота (BVD) в одном из районов провинции Рим (Италия).Vet Microbiol 1999;64:237–245.

12. Synge B, Clark A, Moar J, Nicolson J, Nettleton P, Herring J. Борьба с вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота на Шетландских островах.Vet Microbiol 1999;64:223–229.

13. Walz P, Givens M, Cochran A, Navarre C. Влияние введения дексаметазона быкам с локализованной инфекцией семенников, вызванной вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота.Can J Vet Res 2008;72:56–62.

14. Passler T, Walz P, Ditchkoff Sи др.Совместное содержание беременных белохвостых олених и крупного рогатого скота с персистентной инфекцией, вызванной вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота, приводит к рождению оленят с персистентной инфекцией.Vet Microbiol 2009;134:362–367.

15. Singh E. Возможности использования эмбрионов для борьбы с болезнями.Theriogenology 1987;27:9–20.

16. Singh E, Eaglesome M, Thomas F, Papp-Vid G, Hare W. Перенос эмбрионов как способ предотвращения передачи вирусных инфекций. Воздействие in vitro вирусов Акабане, катаральной лихорадки овец и вирусной диареи крупного рогатого скота на эмбрионы крупного рогатого скота до имплантации.Theriogenology 1982;17:437–444.

17. Wentink G, Aarts T, Mirck M, Van Exsel A. Телёнок от тёлки с персистентной инфекцией, родившийся после переноса эмбриона и обладающий нормальным иммунитетом к BVDV.Vet Rec 1991;129:449–450.

18. Bak A, Callesen, Meyling A, Greve T. Телята, родившиеся после переноса эмбрионов от доноров с персистентной инфекцией, вызванной вирусом BVD.Vet Rec 1992;131:37.

19. Brock K, Lapin D, Skrade D. Перенос эмбрионов от крупного рогатого скота — доноров с персистентной инфекцией, вызванной вирусом вирусной диареи крупного рогатого скота.Theriogenology 1997;47:837–844.

20. Smith A, Grimmer S. Рождение телёнка, свободного от BVDV, от донора эмбриона с персистентной инфекцией.Vet Rec 2000;146:49–50.

21. Guerin B. Гарантированный ветеринарный статус при производстве эмбрионов крупного рогатого скота, полученных in vitro, и торговле ими.Livestock Prod Sci 2000;62:271–285.

22. Lindberg A, Ortman K, Alenius S. Сероконверсия к вирусу вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) у молочных тёлок после переноса эмбрионов. В: Материалы 14-го ICAR, 2–6 июля, 2000;1:250 (аннотация).

23. Drew T, Sandvik T, Wakeley P, Jones T, Howard P. Вирус BVD генотипа 2 выявлен у крупного рогатого скота в Великобритании.Vet Rec 2002;51:551.

24. Waldrop J, Stringfellow D, Galik Pи др.Инфекционность вируса вирусной диареи крупного рогатого скота, связанного с эмбрионами крупного рогатого скота, полученными in vivo.Theriogenology 2004;62:387–397.

25. Waldrop J, Stringfellow D, Riddell Kи др.Различные штаммы нецитопатогенного вируса вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) различаются по сродству к эмбрионам крупного рогатого скота, полученным in vivo.Theriogenology 2004;62:45–55.

26. Waldrop J, Stringfellow D, Galik Pи др.Сероконверсия у телят после внутривенного введения эмбрионов, подвергнутых воздействию вируса вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) in vitro.Theriogenology 2005;65:594–605.

27. Gard J, Givens M, Marley Mи др.Наличие вируса вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) в отдельных эмбрионах крупного рогатого скота до имплантации, полученных in vivo и in vitro, после искусственного воздействия вируса.Theriogenology 2009;71:1238–1244.

28. Gard J, Givens M, Marley Mи др.Внутриматочное введение вируса вирусной диареи крупного рогатого скота серонегативным тёлкам одновременно с переносом эмбрионов крупного рогатого скота, полученных in vivo.Theriogenology 2010;73:1009–1017.

29. Bielanski A, Sapp T, Lutze-Wallace C. Связь эмбрионов крупного рогатого скота, полученных путём оплодотворения in vitro, с нецитопатогенным штаммом BVDV типа II. Theriogenology 1998;49:1231–1238.

30. Meyers G, Ege A, Fetzer C и др. Вирус вирусной диареи крупного рогатого скота: предотвращение персистирующей инфекции плода сочетанием двух мутаций, затрагивающих РНКазу Erns и протеазу Npro. Virology 2007;81:3327–3338.

31. Galik P, Givens M, Stringfellow D, Crichton E, Bishop M, Eilertsen K. Вирус вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) и антитела к BVDV в объединённых образцах фолликулярной жидкости. Theriogenology 2002;57:1219–1227.

32. Gordon I. Эмбрионы, полученные в лабораторных условиях. В кн.: Gordon I (ред.) Лабораторное получение эмбрионов крупного рогатого скота , 2-е изд. Уоллингфорд, Великобритания: CAB International, 1994, с. 15–20.

33. Bielanski A, Loewen K, Del Campo M, Sirard M, Willadsen S. Выделение герпесвируса крупного рогатого скота-1 (BVH-1) и вируса вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) при получении эмбрионов крупного рогатого скота in vitro. Theriogenology 1993;40:531–538.

34. Bielanski A, Stewart B. Повсеместно распространённые микроорганизмы, выделенные из системы оплодотворения in vitro (IVF). Theriogenology 1996;45:269 (аннотация).

35. Bielanski A, Algire J, Lalonde A, Nadin-Davis S. Передача вируса вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) реципиентам через эмбрионы, полученные путём оплодотворения in vitro, но не их потомству. Theriogenology 2009;71:499–508.

36. Marquant-Le Guienne B, Remond M, Cosquer R и др. Воздействие вируса ящура на эмбрионы, полученные in vitro. Theriogenology 1998;50:109–116.

37. Stringfellow D, Givens M. Предотвращение передачи болезней при переносе эмбрионов крупного рогатого скота, полученных in vivo. Livestock Prod Sci 2000;62:237–251.

38. Stringfellow D, Givens M, Waldrop J. Вопросы биобезопасности, связанные с применяемыми и новыми эмбриональными технологиями. Reprod Fertil Dev 2004;16:93–102.

39. Engles M, Ackermann M. Патогенез герпесвирусных инфекций жвачных животных. Vet Microbiol 1996;53:3–15.

40. Nettleton P, Vilcek S. Выявление пестивирусов в сыворотке крови крупного рогатого скота. В кн.: Материалы международного семинара, организованного EDQM, Париж , 2001, с. 69–75.

41. Vanroose G, Nauwynek H, Van Soom H и др. Структурные особенности блестящей оболочки эмбрионов, полученных in vitro: исследование методами сканирующей электронной и конфокальной лазерной сканирующей микроскопии. Biol Reprod 2000;62:463–469.

42. Bielanski A, Dubuc B. Оплодотворение in vitro яйцеклеток коров, экспериментально инфицированных нецитопатогенным штаммом вируса вирусной диареи крупного рогатого скота. Anim Reprod Sci 1995;38:215–221.

43. Booth P, Collins M, Jenner L и др. Нецитопатогенный вирус вирусной диареи крупного рогатого скота (BVDV) снижает частоту дробления, но повышает выход бластоцист