экспериментатору. Кроме того, этот метод позволяет изучить всасывательную функцию рубца в хронических и вместе с тем идентичных опытах, в естественных условиях жизнедеятельности слизистой оболочки рубца. И, что не менее важно, это возможность использовать оперированных по предлагаемой методике животных в эксперименте длительное время, то есть изучение всасывательной функции рубца может производиться в динамике, сравнительном, возрастном аспекте.

2.10. Методика определения площади слизистой оболочки рубца, сетки, книжки и сычуга

Одной из важных сторон сложного процесса пищеварения является всасывание в кровь и лимфу воды, солей, продуктов гидролиза белков, жиров, углеводов через эпителий желудка и кишечника.

Всасывание как физиологическая функция присуще всем слизистым оболочкам организма, но пищевые вещества, вода всасываются в различные участки пищеварительной системы неодинаково. Всасывание зависит от многих факторов: строения эпителия, рН среды, вида и физико-химических свойств кормов, силы и частоты сокращений мускулатуры желудка и кишечника и связанной с этим скоростью движения пищи и т.д., в частности, от площади всасывающей поверхности слизистой оболочки того или иного отдела желудочно-кишечного тракта.

Так, слизистая оболочка тонкого кишечника, основного места всасывания продуктов гидролиза белков, жиров и углеводов, образует множество складок, что значительно увеличивает её поверхность, а следовательно, площадь соприкосновения с химусом. Кроме того, увеличению всасывающей поверхности кишечника способствует наличие ворсинок и микроворсинок. Складчатость слизистой оболочки толстого кишечника содействует активному всасыванию в этом отделе воды.

Возникает вопрос, чем обусловлено существующее различие не только в строении рубца, сетки, книжки и сычуга, но и в размерах площади их слизистых оболочек? Как можно определить площадь слизистых оболочек?

Для определения площади слизистых оболочек проводят убой животных, желудок извлекают, каждую камеру вскрывают, освобождают от содержимого, после чего стенки той или иной камеры разрезают на отдельные участки, удобные для фиксации на чертёжном листе бумаги при помощи булавок. Каждый отдельный участок стенки расправляют, фиксируют, плотно примыкая его к соседним участкам. Границы суммарной площади очерчивают на чертёжной бумаге и затем измеряют планиметром ПП-М, предназначенным для определения площади плоских поверхностей в см² с точностью измерения + 0,2%. При измерении необходимо учитывать все складчатые образования слизистой оболочки. Двухсторонние листочки книжки и складки сычуга очерчивают дважды. Учитывают также перегородки ячеек сетки. После трёхкратного измерения площади каждой камеры желудка выводят её средний показатель.

2.11. Методика изучения переваривания клетчатки симбионтной микрофлорой

В перфорированную полиэтиленовую трубку (диаметр 0,5-0,8 см, длина 5-6 см) вставляют источники целлюлозы (высушенные до постоянного веса бумажный фильтр или гигроскопическую вату). Капсулу (трубку) вставляют в сшитый капроновый (лавсановый) мешочек и помещают мешочек на капроновой нитке (шнурке) в полость рубца на 24 ч.

После 24-часовой инкубации капсулу за шнурок извлекают, бумажный фильтр или вату промывают в дистиллированной воде, высушивают до постоянного веса и устанавливают в граммах и процентах уменьшение массы источника целлюлозы за период инкубации.

2.12. Методика изучения переваривания растительного белка симбионтной микрофлорой

Методика разработана А.Я.Рябиковым и А.Н.Симикиным (авторское свидетельство № 1687257).

Изучение переваривания растительного белка в рубце проводится аналогично изучению переваривания целлюлозы. Только

вместо клетчатки используют высушенную клейковину, полученную из пшеничной муки (в виде лепёшки размером с 1-рублёвую монету), помещают в капроновый (лавсановый) мешочек.

2.13. Методика подсчёта инфузорий

В смеситель для подсчёта лейкоцитов насасывают процеженную через ситечко или отжатую через два слоя марли жидкость рубца, сетки, книжки и сычуга до метки 1,0. Затем разбавляют 4% раствором формалина до метки 11,0, смешивают содержимое в ампулообразном расширении в течение трёх минут. Удалив первую каплю из смесителя вносят исследуемую жидкость в счётную камеру Горяева. Число инфузорий подсчитывают в 100 больших неразграфлённых квадратах. Микроскоп МБИ-3, окуляр – 7, объектив – 40. Расчёт проводят по формуле для подсчёта лейкоцитов. Но затем пересчитывают на 1 см:

где:

Х – число инфузорий в 1 см³;

К – число инфузорий, подсчитанных в 100 больших квадра-

тах;

4000 – число объёмов, необходимое для получения 1 мм³; 10 – степень разведения; 1600 - число маленьких квадратов; 1000 – число мм³ в 1 см³.

Проведя необходимые сокращения, можно определить число инфузорий в 1 см³ рубцовой жидкости по формуле:

Х = К · 25000.

Одновременно с подсчётом количества инфузорий можно при помощи клавиш машинки для выведения лейкоцитарной формулы, определить видовой состав инфузорий, предварительно изучив морфологические признаки отдельных видов инфузорий.