Исследования с применением изотопного метода показали, что при кормлении свиней живой массой 35 кг различными рационами больше эндогенного азота выделялось на ячменносоевом рационе по сравнению с казеином [444, 710, 711]. При высоком уровне сырого протеина в рационе эндогенные поступления протеина незначительны [445].
При изучении авторами влияния времени взятия образцов содержимого терминального илеума показало, что самые высокие эндогенные поступления при одном и том же рационе были через 3 часа после кормления (Donkoh A., et. al., 1995).
Таким образом, активность ферментативных процессов пищеварительного тракта свиней зависит от состава рациона, а эндогенный «бассейн» азота тем полнее, чем удалѐннее аминокислотный профиль кормового белка от идеального белка. Поэтому, несмотря на отсутствие единого мнения о степени постоянства и соответствия метаболических потерь аминокислотному составу рациона, не правомерно утверждать, что метаболические потери имеют статус физиологической константы. Авторы указывают на наличие значительных эндогенных потерь азота в дистальном отделе илеума свиней [597-598].
К основным методам, как заключают авторы, относятся три общепринятых типичных метода: кормления безбелковыми диетами, кормления диетами, содержащими пониженное в 3-4 раза, по сравнению с потребностью, количество белка со 100 % доступностью аминокислот и регрессионный метод. Альтернативными традиционным являются более современные методы: изотопный, гомоаргинина техника, метод (EHC) – с применением энзиматически гидролизованного казеина с ультрафильтрацией. Причѐм, метод с гомоаргинином применим для широкого спектра кормов и основан на возможности кормового лизина превращаться в гомоаргинин. Альтернативные методы в последнее время всѐ шире используются в исследованиях авторов при изучении ENL. Авторы [494] изучали илеальную переваримость полуискусственной диеты, содержащей казеин в различных уровнях и применили метод регрессии при оценке эндогенных
остатков аминокислот в дистальном илеуме растущих свиней. Кажущаяся илеальная переваримость повышалась незначительно, и это облегчало регрессионный метод подсчѐта эндогенных остатков аминокислот.
16 помесных боровков, от 4 гнѐзд (по 4 от каждого), с начальной живой массой примерно 35 кг были снабжены простой Т-образной канюлей в дистальной части илеума. Четыре уровня сырого протеина скармливали свиньям различных гнѐзд методом групп-периодов. Средняя начальная живая масса свиней каждого групп-периода была 37,8; 37,2; 38,3; 35,6 кг для периодов 1- 4, соответственно. Некоторое количество корма (сухого вещества) было скормлено в течение каждого экспериментального периода и имело свой эффект на эндогенные остатки аминокислот. Свиньям скармливали 1,35 кг в день в три приѐма, начиная с 7 час, далее в 15 час и в 23 часа. Четыре диеты содержали 13, 16, 19 и 22 % сырого протеина на однотипной кормовой основе. Воздушно-сухой казеин был использован как единственный источник сырого протеина. Другие ингредиенты рациона включали соевое масло (6 %), целлюлозу (4 %), сахарозу (10 %) и витаминно-минеральный премикс. Каждая диета была доведена до 100% с помощью пшеничного крахмала. Окись хрома (0,2 %) была использована как непереваримый маркер. Каждый экспериментальный период составлял 12 дней, 5 дней адаптационного периода для каждой из экспериментальных диет, и 5 дней для сбора образцов кала и урины, последующие 2 дня – для сбора илеального содержимого. Остатки от не съеденного корма отбирались постоянно на 11 и 12 день в 7, 15 часов ежедневно. Эти образцы были заморожены и переданы на анализ.
Разные уровни казеина повлияли на кажущуюся переваримость. Кажущаяся илеальная переваримость сырого протеина четырѐх диет (13, 16, 19 и 22 % сырого протеина) составила 90,6 93,3 93,7 и 93,1 %, соответственно, а истинная илеальная переваримость лизина составила 96,6 97,4 97,3 и 97,7 %. Потребление с кормом сырого протеина составило от 193 до 314 г в сутки.
Таким образом, илеальную переваримость сырого протеина или аминокислот можно оценить по законам линейной регрессии и еѐ можно считать истинной (Furuya, Kaji, 19861989). Иной точки зрения придерживаются некоторые авторы (Fan et.al., 1995). Различия эндогенов в илеальном содержимом в зависимости от корма всѐ же есть. Выход муцинов сопровождает выделение треонина в эндогенах (до 30 % всех эндогенов). И Gabert et.al. (1996-2002) аналитическим путѐм установил высокое изобилие лейцина в порционном панкреатическом соке. Всѐ таки мы можем допустить, что повышение уровня сырого протеина за счѐт казеина вне нормальных физиологических условий в полуискусственной диете не особо влияет на илеальную переваримость. Однако эндогенные аминокислотные остатки могут не сильно влиять на ввод сырого протеина или аминокислот в диете. Таким образом, регрессионный метод можно использовать для оценки илеальных эндогенных остатков сырого протеина и аминокислот.
Эндогенные аминокислоты можно определить количественно регрессионным методом, предложенным H.H. Mitchell и дополненным M.R. Taverner (1981), S. Furuya, (1989) и др. [415, 565, 710, 711]. Суть метода заключается в определении количества изучаемой аминокислоты (например, лизина), имеющей эндогенное происхождение, путѐм экстраполяции изменяющейся величины еѐ в содержимом кишечника до отметки нулевого потребления сырого протеина в рационе.
При гипотетическом нулевом потреблении белка (его можно найти на графике линейной регрессии) количество аминокислоты и будет искомой величиной эндогенной потери лизина желудочно-кишечным трактом после переваривания корма. Результат легко находится графически или по эмпирической формуле регрессии. Недостаток метода заключается в некотором завышении эндогенных потерь аминокислот и большом количестве групп-периодов экспериментальных животных.
Известны изотопные методы изучения метаболизма отдельных аминокислот, однако они узкоспецефичны и не
