всегда доступны для исследователя [431]. Например, при изучении скорости обновления белков мышц и печени был разработан метод непрерывной инфузии [137]. Меченую изотопами аминокислоту вводили животным непрерывно с постоянной скоростью. В этом случае метка пула свободных аминокислот плазмы и тканей достигала относительно постоянного уровня. Свободные аминокислоты количественно измерены и установлено, что потребление белков рациона обеспечивает суммарный поток аминокислот, значительно превышающий количество их в сыром протеине корма. Так, поступление аминокислот с кормом составило всего лишь 1/5 от их общего потока повторного использования. Отношение эндогенной экскреции азота (ЭЭА) к суммарному потоку (СП) -
ЭЭА
принято за фундаментальный физиологический СП показатель, характеризующий основной путь окисления аминокислот [435].
Vincent Hess, Jean Noel Thibault и Bernard Sève (19981999), Pascal Leterme, Bernard Sève and André Théwis (1998) изучали эндогенные потери аминокислот для оценки истинной илеальной их доступности низкофоновым изотопным методом непрерывной инфузии (15 N). Трѐм растущим свиньям с илеоректальным анастомозом и катетерами портальной вены, яремной вены и сонной артерии вводили раствор15 N-лейцина в течение 24 дней поочерѐдно в яремную вену и сонную артерию. Образцы крови брали из катетера портальной вены печени. Свиньям скармливали безазотистую диету, с изолятом белка гороха, и гидролизатом белка гороха в опыте по схеме латинского квадрата.15 N трансформировался из лейцина в изолейцин, валин, аланин, глицин и пролин. Свободный15 N- аланин, глицин и валин количественно обогатили соответствующие секреторные аминокислоты портальной вены по сравнению с системной кровью (0.114 vs. 0.077 atom % excess). Обогащение общим азотом было выше во фракции плазмы, растворимой в трихлоруксусной кислоте чем в илеальном содержимом свиней, которым скармливали безбелковую диету. Обогащение лизином было значительным во
всех тканях, за исключением мышечной, незаменимые аминокислоты были синтезированы микрофлорой и использованы в основном для синтеза белка[468, 469, 526].
Можно сделать вывод, что обмен общего азота не показателен при изучении эндогенных потерь аминокислот изотопным методом. Так, метки эндогенных аминокислот (аланина, глицина, изолейцина, лейцина и валина) в илеальном содержимом количественно составили от 23 % (лейцина) до 74 % (аланина) при общем азоте 70 % (Leterme, et. al., 1998). Кроме того метод непрерывной инфузии аминокислот был выполнен с параллельным изучением образцов крови из портальной вены. Основной недостаток этого метода в том, что определены остатки не всех незаменимых аминокислот.
Уровень эндогенных аминокислот обычно измеряют количественно на безбелковой диете. Многие авторы считают, что наименьший уровень потерь эндогенного протеина у растущих свиней на безбелковой диете имеет место в том периоде, в течение которого экскреция азотсодержащих веществ остаѐтся относительно постоянной [164, 242, 471]. Продолжительность этого периода, по данным В.Г. Рядчикова, составляет от 4 до 7 суток после перевода животных с белкового на безбелковый рацион и в какой-то мере отражает состояние обмена веществ, сложившееся в период протеинового кормления [157].
J.P. Peret, J.P. Lacgout считают, что период относительного равновесия и выделения эндогенного азота в кал свиней на безбелковой диете наступает через 3 суток после предварительного резкого повышения фекального азота в первые 24-48 часов и последующего снижения его до 20-30 % от начального [Цит. по 157].
Свиньи, содержащиеся на безбелковой диете непродолжительное время, обычно сохраняют живую массу, а экскреция азота в моче относительно постоянна, так как диета обеспечивает необходимые питательные вещества и энергию, а потребность в белке удовлетворяется в первое время за счѐт расхода лабильных аминокислот и их подвижных комплексов.
Известно, что при голодании и дефиците аминокислот печень является главным местом их потерь. Так, при голодании в течение 7 суток крысы теряют 40 % белка тела [157].
До настоящего времени не установлено, насколько адекватны метаболические потери аминокислот у свиней на белковом и безбелковом рационе. По данным K.F. Horszczaruk, безазотистый рацион влечѐт за собой повышение содержания азота в переваренных остатках рациона за счѐт увеличенного уровня пищеварительных соков, выделяющихся в просвет кишечника, с чем не согласны ряд исследователей [473].
Практика кормления экспериментальных моногастричных животных показывает, что при переводе с нормальной диеты на низкобелковую экскреция азота остаѐтся некоторое время на том же уровне [164]. На этом положении основано использование диет с низким содержанием высокопереваримого протеина при определении метаболических потерь аминокислот у свиней. В этих целях применяются рационы с 3-5 % яичного белка [288, 289], 3 % казеина [471, 565, 766].
Donkoh A., Moughan P.J., Morel P.C.H.(1995) сравнили три метода оценки эндогенных потерь у моногастричных: безбелковую диету, регрессионный метод и диету с энзиматически гидролизованным казеином (EHC) [374]. Оказалось, что при скармливании EHC эндогенные потери составили 1,9 грамм на 1 грамм лиофилизированного сухого вещества скормленной диеты или 100 %, при безбелковой – 60 %, а при регрессионном методе – лишь 55 % от эндогенных потерь при использовании EHC – диеты. Можно сделать вывод, что самой удачной при изучении эндогенных потерь в терминальном илеуме служит высокодоступная низкобелковая диета, где источником белка является продукт типа энзиматически гидролизованного казеина, белкового энпита и т.д [374].
Furuya S. и Y. Kaji (1989) установили в эксперименте на растущих свиньях, что уровень сырого протеина в рационе влияет на эндогенные потери аминокислот, но истинная их доступность остаѐтся практически постоянной [415]. Так, при скармливании диет с разным количеством сырого протеина (80
