основные кинетические константы транспортируемых аминокислот. Они характеризуют скорость всасывания и сродство аминокислот к транспортным субстанциям. Имеет значение стерическая структура функциональных групп аминокислот, которая образует комплекс с переносчиком. Природные L-изомеры имеют функциональные группы вокруг α-углерода. Наличие α- аминогруппы способствует активному транспорту. При замене α-аминогруппы аланина на гидроксильную группу снижается всасываемость этой аминокислоты. Если группа переходит в β- положение (например, β-аланин), то также снижается скорость всасывания.
Hajjar J.J., e.al. (1970) заменил аминогруппу фенилаланина в первом варианте на водород, во втором – на гидроксильную группу. При этом всасываемость уменьшалась в два раза [447]. Свободная карбоксильная группа также участвует в активном транспорте. Например, метилирование группы у фенилаланина уменьшает всасывание. Наряду с этим есть мнение авторов, что конкуренция практически не обнаруживается при нормальном физиологическом процессе всасывания кормовых аминокислот, т.к. в химусе присутствует эндогенный пул, который поддерживает концентрацию аминокислот [212].
Ультраструктурный механизм всасывания аминокислот заключается в активном транспорте. У новорожденных поросят в тонком кишечнике наблюдается пиноцитоз – всасывание путѐм пассивной диффузии негидролизованных белков клетками энтероцитов [371]. У отъѐмышей и до зрелого возраста всасываются, в основном, аминокислоты, хотя пиноцитоз частично допускается авторами у взрослых моногастричных животных [343]. Белки или пептиды могут поглощаться кишечной клеткой путѐм пиноцитоза или инфузорно через эпителиальные клетки и все слои кишечной стенки.
Agar W.T., et al. (1953); Ugolev A.M. (1966) упоминают о присутствии оксипролиновых, β-аспарагиловых и β- глутамиловых, глицил-глициновых устойчивых к ферментам пептидов в моче [266, 722]. По мнению авторов повышение концентрации аминокислот в портальной крови не служит доказательством их всасывания в кишечнике [369]. Часть аминокислот
имеет эндогенное происхождение и является остатками от синтеза тканевых белков не только из свободных аминокислот, но и из пептидов, находящихся в крови портальной вены.
Среди новых, но не нашедших широкое распространение, методов изучения переваримости сырого протеина и всасывания аминокислот известен метод нейлоновых мешочков [337].
Cherian, Sauer; Thacker (1988) изучали кажущуюся переваримость белка соевой, рапсовой и мясокостной муки у свиней йоркшир*лакомб с живой массой 45,0 кг и дуоденальной канюлей, установленной в 10 см от пилорического сфинктера. Мешочки с изучаемым кормом (по типу метода in situ у КРС) после обработки пепсином помещали в фистулу дуоденума и вылавливали или в илеуме или в конце пищеварительного тракта. Этот метод довольно трудоѐмкий, его преимущество только в том, что большее количество образцов можно пропустить через кишечник. Однако невозможно установить истинную доступность аминокислот этим методом.
В исследованиях по биохимии и физиологии питания животных с однокамерным желудком установлено, что переваривание кормового белка и продуктивное всасывание аминокислот завершается в конце тонкого кишечника (ileum) – подвздошной кишке, в участке, граничащем со слепой кишкой ( cecum ). Поэтому авторы считают целесообразным определять доступность аминокислот по содержимому подвздошной кишки, тем более, что остатки корма, следуя из подвздошной в слепую кишку и далее, в толстый кишечник ( colon ), подвергаются длительному воздействию микрофлоры. По мнению многих исследователей, этот метод исключает возможное искажение результатов оценки доступности влиянием микрофлоры толстого кишечника и является более надѐжным. В настоящее время во многих странах (Польша, Франция, Канада, Австралия, Япония, и др.) вышеуказанному методу уделяется особое внимание при изучении доступности аминокислот для свиней.
Метод оценки доступности по содержимому нижнего участка подвздошной кишки (И) (находящегося на расстоянии 1- 10 см от границы со слепой кишкой, легко определяемой по сфинктеру – «баугиновой заслонке») осуществляется на
фистулированных животных. Содержимое ПК отбирается через фистульное отверстие, оформленное одиночной простой Т – образной канюлей или внешним анастомозом.
Авторы [351] изучали муку канолы и муку ячменя в терминальном илеуме на 4-х илеостомированных боровках йоркширах с живой массой 33,6 кг. Базовая диета включала 16 % сырого протеина.
Nyachoti e.a. (1997) использовали окись хрома в количестве 0,5 % от сухого вещества рациона в качестве непереваримого инертного маркера для базовой диеты при определении кажущейся переваримости или окись титана (0,5 %) для определения истинной переваримости [597]. Образцы илеального содержимого отбирали 16 раз за 24 часа. Возврат сухого вещества составил для ячменя и канолы– 74,2 % (n=7, SD= 4,2).
Все существующие оперативные способы фистулирования и оформления фистул мы делим на два вида: простые фистулы и анастомозы [30, 34-36]. Сбор содержимого подвздошной кишки в этом случае производится через Т-образную металлическую, тефлоновую или пластиковую канюлю диаметром 10-25 мм и длиной тубуса 60-120 мм (в зависимости от размера животного). Аликвоты содержимого подвздошной кишки отбирают через равные промежутки времени. Суточный объѐм содержимого подвздошной кишки находится расчѐтным путѐм, методом « индекса маркера». Авторы Mroz e.a. (1994) разработали способ сбора содержимого илеума через большую простую Т-образную канюлю, установленную в цекуме (слепой кишке) непосредственно в районе илео-цекального клапана (баугиновой заслонки). Такой метод (SICV) более удобен ещѐ и тем, что имеют место самые незначительные последствия после хирургического вмешательства и при этом сохраняется целостность и «чистота» микрофлоры тонкого кишечника [574]. Способ простого Т-канюлирования был использован многими отечественными и зарубежными авторами [735], а в последние несколько лет - наиболее успешно в сельскохозяйственном институте Дании. Но повторяемость результатов зачастую была с большими отклонениями от среднего. Кроме того, способ
