остатков аминокислот в дистальном илеуме растущих свиней. Кажущаяся илеальная переваримость повышалась незначительно, и это облегчало регрессионный метод подсчѐта эндогенных остатков аминокислот.
16 помесных боровков, от 4 гнѐзд (по 4 от каждого), с начальной живой массой примерно 35 кг были снабжены простой Т-образной канюлей в дистальной части илеума. Четыре уровня сырого протеина скармливали свиньям различных гнѐзд методом групп-периодов. Средняя начальная живая масса свиней каждого групп-периода была 37,8; 37,2; 38,3; 35,6 кг для периодов 1- 4, соответственно. Некоторое количество корма (сухого вещества) было скормлено в течение каждого экспериментального периода и имело свой эффект на эндогенные остатки аминокислот. Свиньям скармливали 1,35 кг в день в три приѐма, начиная с 7 час, далее в 15 час и в 23 часа. Четыре диеты содержали 13, 16, 19 и 22 % сырого протеина на однотипной кормовой основе. Воздушно-сухой казеин был использован как единственный источник сырого протеина. Другие ингредиенты рациона включали соевое масло (6 %), целлюлозу (4 %), сахарозу (10 %) и витаминно-минеральный премикс. Каждая диета была доведена до 100% с помощью пшеничного крахмала. Окись хрома (0,2 %) была использована как непереваримый маркер. Каждый экспериментальный период составлял 12 дней, 5 дней адаптационного периода для каждой из экспериментальных диет, и 5 дней для сбора образцов кала и урины, последующие 2 дня – для сбора илеального содержимого. Остатки от не съеденного корма отбирались постоянно на 11 и 12 день в 7, 15 часов ежедневно. Эти образцы были заморожены и переданы на анализ.
Разные уровни казеина повлияли на кажущуюся переваримость. Кажущаяся илеальная переваримость сырого протеина четырѐх диет (13, 16, 19 и 22 % сырого протеина) составила 90,6 93,3 93,7 и 93,1 %, соответственно, а истинная илеальная переваримость лизина составила 96,6 97,4 97,3 и 97,7 %. Потребление с кормом сырого протеина составило от 193 до 314 г в сутки.
Таким образом, илеальную переваримость сырого протеина или аминокислот можно оценить по законам линейной регрессии и еѐ можно считать истинной (Furuya, Kaji, 19861989). Иной точки зрения придерживаются некоторые авторы (Fan et.al., 1995). Различия эндогенов в илеальном содержимом в зависимости от корма всѐ же есть. Выход муцинов сопровождает выделение треонина в эндогенах (до 30 % всех эндогенов). И Gabert et.al. (1996-2002) аналитическим путѐм установил высокое изобилие лейцина в порционном панкреатическом соке. Всѐ таки мы можем допустить, что повышение уровня сырого протеина за счѐт казеина вне нормальных физиологических условий в полуискусственной диете не особо влияет на илеальную переваримость. Однако эндогенные аминокислотные остатки могут не сильно влиять на ввод сырого протеина или аминокислот в диете. Таким образом, регрессионный метод можно использовать для оценки илеальных эндогенных остатков сырого протеина и аминокислот.
Эндогенные аминокислоты можно определить количественно регрессионным методом, предложенным H.H. Mitchell и дополненным M.R. Taverner (1981), S. Furuya, (1989) и др. [415, 565, 710, 711]. Суть метода заключается в определении количества изучаемой аминокислоты (например, лизина), имеющей эндогенное происхождение, путѐм экстраполяции изменяющейся величины еѐ в содержимом кишечника до отметки нулевого потребления сырого протеина в рационе.
При гипотетическом нулевом потреблении белка (его можно найти на графике линейной регрессии) количество аминокислоты и будет искомой величиной эндогенной потери лизина желудочно-кишечным трактом после переваривания корма. Результат легко находится графически или по эмпирической формуле регрессии. Недостаток метода заключается в некотором завышении эндогенных потерь аминокислот и большом количестве групп-периодов экспериментальных животных.
Известны изотопные методы изучения метаболизма отдельных аминокислот, однако они узкоспецефичны и не
всегда доступны для исследователя [431]. Например, при изучении скорости обновления белков мышц и печени был разработан метод непрерывной инфузии [137]. Меченую изотопами аминокислоту вводили животным непрерывно с постоянной скоростью. В этом случае метка пула свободных аминокислот плазмы и тканей достигала относительно постоянного уровня. Свободные аминокислоты количественно измерены и установлено, что потребление белков рациона обеспечивает суммарный поток аминокислот, значительно превышающий количество их в сыром протеине корма. Так, поступление аминокислот с кормом составило всего лишь 1/5 от их общего потока повторного использования. Отношение эндогенной экскреции азота (ЭЭА) к суммарному потоку (СП) -
ЭЭА
принято за фундаментальный физиологический СП показатель, характеризующий основной путь окисления аминокислот [435].
Vincent Hess, Jean Noel Thibault и Bernard Sève (19981999), Pascal Leterme, Bernard Sève and André Théwis (1998) изучали эндогенные потери аминокислот для оценки истинной илеальной их доступности низкофоновым изотопным методом непрерывной инфузии (15 N). Трѐм растущим свиньям с илеоректальным анастомозом и катетерами портальной вены, яремной вены и сонной артерии вводили раствор15 N-лейцина в течение 24 дней поочерѐдно в яремную вену и сонную артерию. Образцы крови брали из катетера портальной вены печени. Свиньям скармливали безазотистую диету, с изолятом белка гороха, и гидролизатом белка гороха в опыте по схеме латинского квадрата.15 N трансформировался из лейцина в изолейцин, валин, аланин, глицин и пролин. Свободный15 N- аланин, глицин и валин количественно обогатили соответствующие секреторные аминокислоты портальной вены по сравнению с системной кровью (0.114 vs. 0.077 atom % excess). Обогащение общим азотом было выше во фракции плазмы, растворимой в трихлоруксусной кислоте чем в илеальном содержимом свиней, которым скармливали безбелковую диету. Обогащение лизином было значительным во
