имеет эндогенное происхождение и является остатками от синтеза тканевых белков не только из свободных аминокислот, но и из пептидов, находящихся в крови портальной вены.
Среди новых, но не нашедших широкое распространение, методов изучения переваримости сырого протеина и всасывания аминокислот известен метод нейлоновых мешочков [337].
Cherian, Sauer; Thacker (1988) изучали кажущуюся переваримость белка соевой, рапсовой и мясокостной муки у свиней йоркшир*лакомб с живой массой 45,0 кг и дуоденальной канюлей, установленной в 10 см от пилорического сфинктера. Мешочки с изучаемым кормом (по типу метода in situ у КРС) после обработки пепсином помещали в фистулу дуоденума и вылавливали или в илеуме или в конце пищеварительного тракта. Этот метод довольно трудоѐмкий, его преимущество только в том, что большее количество образцов можно пропустить через кишечник. Однако невозможно установить истинную доступность аминокислот этим методом.
В исследованиях по биохимии и физиологии питания животных с однокамерным желудком установлено, что переваривание кормового белка и продуктивное всасывание аминокислот завершается в конце тонкого кишечника (ileum) – подвздошной кишке, в участке, граничащем со слепой кишкой ( cecum ). Поэтому авторы считают целесообразным определять доступность аминокислот по содержимому подвздошной кишки, тем более, что остатки корма, следуя из подвздошной в слепую кишку и далее, в толстый кишечник ( colon ), подвергаются длительному воздействию микрофлоры. По мнению многих исследователей, этот метод исключает возможное искажение результатов оценки доступности влиянием микрофлоры толстого кишечника и является более надѐжным. В настоящее время во многих странах (Польша, Франция, Канада, Австралия, Япония, и др.) вышеуказанному методу уделяется особое внимание при изучении доступности аминокислот для свиней.
Метод оценки доступности по содержимому нижнего участка подвздошной кишки (И) (находящегося на расстоянии 1- 10 см от границы со слепой кишкой, легко определяемой по сфинктеру – «баугиновой заслонке») осуществляется на
фистулированных животных. Содержимое ПК отбирается через фистульное отверстие, оформленное одиночной простой Т – образной канюлей или внешним анастомозом.
Авторы [351] изучали муку канолы и муку ячменя в терминальном илеуме на 4-х илеостомированных боровках йоркширах с живой массой 33,6 кг. Базовая диета включала 16 % сырого протеина.
Nyachoti e.a. (1997) использовали окись хрома в количестве 0,5 % от сухого вещества рациона в качестве непереваримого инертного маркера для базовой диеты при определении кажущейся переваримости или окись титана (0,5 %) для определения истинной переваримости [597]. Образцы илеального содержимого отбирали 16 раз за 24 часа. Возврат сухого вещества составил для ячменя и канолы– 74,2 % (n=7, SD= 4,2).
Все существующие оперативные способы фистулирования и оформления фистул мы делим на два вида: простые фистулы и анастомозы [30, 34-36]. Сбор содержимого подвздошной кишки в этом случае производится через Т-образную металлическую, тефлоновую или пластиковую канюлю диаметром 10-25 мм и длиной тубуса 60-120 мм (в зависимости от размера животного). Аликвоты содержимого подвздошной кишки отбирают через равные промежутки времени. Суточный объѐм содержимого подвздошной кишки находится расчѐтным путѐм, методом « индекса маркера». Авторы Mroz e.a. (1994) разработали способ сбора содержимого илеума через большую простую Т-образную канюлю, установленную в цекуме (слепой кишке) непосредственно в районе илео-цекального клапана (баугиновой заслонки). Такой метод (SICV) более удобен ещѐ и тем, что имеют место самые незначительные последствия после хирургического вмешательства и при этом сохраняется целостность и «чистота» микрофлоры тонкого кишечника [574]. Способ простого Т-канюлирования был использован многими отечественными и зарубежными авторами [735], а в последние несколько лет - наиболее успешно в сельскохозяйственном институте Дании. Но повторяемость результатов зачастую была с большими отклонениями от среднего. Кроме того, способ
SICV был более удачным с точки зрения повторяемости результатов оценки доступности питательных веществ с использованием инертных маркеров. По одному поросѐнку (35 кг) от каждого из пяти помѐтов были подвергнуты хирургическому Т-канюлированию (канюля 16 мм в диаметре) или устанавливалась SICV-канюля. После 14-дневного восстановительного периода свиней кормили диетами в соответствии со схемой латинского квадрата 5*5 групппериодов. Экспериментальные диеты состояли из безазотистой смеси или соевой муки, подсолнечниковой муки, гороха или рапсового шрота, разбавленных до 16 % сырого протеина с помощью безазотистой смеси. Свиней кормили 3 раза в сутки с интервалами 8 часов. Каждый экспериментальный период продолжался 14 дней. Первые 4 дня свиней кормили стандартной диетой для растущих свиней, последующие 10 дней - экспериментальной диетой. Проводили два 8-часовых периода сбора илеального содержимого в течение одних суток. Воду подавали вместе с кормом (2,5 литра на 1 кг корма).
Образцы илеального содержимого собирали в стаканчики, прикрепляемые к канюле, а затем аликвоты, содержащие инертный маркер, помещали в пластиковые боксы.
Сравнивали два метода канюлирования по каждой диете и сходимость результатов. Надѐжность определений каждого из двух способов определена как «воспроизводимая» по среднеквадратическому отклонению. Воспроизводимость определяли по формуле: Xij=μi+εij, где Xij= jth - количество повторений определений ith образца, μi= среднее ith образца и εij-отклонение от средней величины. Парные простые фистулы подвздошной кишки можно использовать для сбора полного объѐма содержимого подвздошной кишки за интересующий исследователя промежуток времени без применения инертных маркеров.
А.Ч. Ли в 1985 году предложил применять для этих целей баллоно-закупоривающее устройство [92]. Обычно фистулы соединяют снаружи кишечным мостиком (анастомозом) из эластичных материалов. Анастомоз может быть установлен в подвздошной кишке, или между концом подвздошной и
