Основы питания и кормления сельскохозяйственных животных

Определение переваримости белка in vitro

Метод применяется для определения переваримости белка концентратов. Навеску 1г обезжиренной тонкомолотой муки зерна помещают в склянку емкостью 50-100 мл и добавляют солянокислый раствор пепсина (1,5 мг кристаллического пепсина растворяют в 15 мл 0,1н HCl, рH=1,2), что приблизительно моделирует условия ферментативного гидролиза в желудочно-кишечном тракте моногастричных животных. В склянку также добавляют 1 мл толуола в качестве антисептика. Инкубацию проводят в течении 3ч при +37°С при постоянном перемешивании и диализе против 0,1н HCl через целлофановую мембрану. После пепсинового гидролиза в емкость добавляют 7,5 мл 0,2н NaOH, чтобы довести рH до 8. Далее добавляют 7,5 мл раствора панкреатина в фосфатном буфере ( 4 мг панкреатина растворяют в 7,5 мл фосфатного буфера). Содержимое инкубируют в течение 24 часов при +37°С также при постоянном перемешивании и диализе против фосфатного буфера через целлофановую мембрану. Непереваренные белки осаждают 10% сульфосалициловой кислотой (50 мл) смесь центрифугируют, выпаривают.

Переваримость минеральных веществ

Эндогенные потери многих минералов, в частности, Ca, P, Mg, Fe с фекалиями весьма значительны. Они появляются в результате секреции в пищеварительный тракт, из которого не реабсорбируются. Например, у жвачных количество фосфора, секретируемое через слюну, бывает выше, чем количество фосфора, присутствующее в корме. Фекалии могут вытягивать минералы из организма,которые всосались в избыточном количестве и поэтому должны быть экскретированы.

По этой причине определение кажущейся переваримости минералов не представляет какого-либо значения. Для минералов важно определить истинную переваримость. Для этого необходимо уметь определить в фекалии ту часть минералов, которая поступила из тела (эндогенная). Такое разделение возможно с помощью радиоактивно меченых изотопов минеральных веществ. В практической деятельности о доступности минеральных веществ и оптимальном их уровне в рационе судят по их концентрации в сыворотке крови.

3.3. Истинная и кажущаяся переваримость

Определение количества переваренных веществ по разнице – потребленные вещества минус выделенные в кале – не дает представления об истинной переваримости корма. Во-первых, вопрос состоит в том, что метан, образованный у жвачных животных в рубце в результате ферментации углеводов, отрыгивается во внешнюю среду и не используется. Эти потери приводят к завышенным показателям переваримости углеводов и количества переваримой энергии. Академик А. П. Калаш-

ников и профессор В. В. Щеглов рекомендовали энергию газов вместе с энергией кала минусовать из валовой энергии для определения переваримой энергии.

Во-вторых, и это более весомо, не весь кал представляет действительно непереваренные остатки корма. Значительную часть фекалия составляют остатки пищеварительных соков, отслоений клеток слизистой желудочно-кишечного тракта, альбуминов и глобулинов плазмы крови, микробы, т.е. материалы, относящиеся не к потребленному корму (т.е. экзогенным), а телу животных (эндогенным веществам).

Эти материалы, в основном, состоят из азотсодержащих веществ (белков, нуклеиновых кислот), их называют фекальным метаболическим или эндогенным азотом.

Эндогенные вещества составляют большой удельный вес общего белка в содержимом желудочно-кишечного тракта. Независимо от условий питания, белки клеток слизистой пищеварительного тракта постоянно деградируются, поступают в просвет кишечника и выводятся с калом. Даже при полном голодании скорость обновления белков тонкой кишки составляет 57-73% в сутки. Есть данные о беспрерывной утечке белков плазмы крови в просвет кишечника и что 10-20% альбуминов плазмы деградируются в кишечнике.

Результаты исследований о количестве метаболического азота весьма противоречивы, что связанно с особенностями рационов в разных исследованиях. На фистулированных поросятах установлено, что на долю метаболического азота приходится 15% от потребленного. Помимо азота, в фекалиях содержится много минеральных веществ, в частности, кальция, фосфора, магния и железа эндогенного происхождения. В других опытах установлено, что количество обменного азота в кале свиней, крыс, собак и человека колеблются в пределах 0,20-0,25 г, у жвачных животных в пределах 0,5-0,6 г в расчете на 100г сухого вещества рациона. Последнее значение составляет 4% белка рациона.

Таким образом, определение переваримости с учетом эндогенного азота приводит к определению истинной переваримости белка корма, без учета эндогенного азота-определению кажущийся переваримости.

3.3.1. Методы определения истинной и кажущейся переваримости белка

Для определения истинной переваримости азота (белка) необходимо из азота кала исключить эндогенный азот. Его количество определяют в опытах, где животным дают безбелковый рацион, состоящий из кукурузного крахмала, растительного масла, сахара, всех необходимых витаминов, макро- и микроэлементов. Долго на таком рационе животных держать нельзя (не более 5-7 дней), так как без белка они могут по-

гибнуть. Поэтому в экспериментальной практике стали использовать рацион с минимальной (5-7%) добавкой хорошо переваримого белка (сублимированное мясо), гидролизатов казеина или смеси кристаллических аминокислот.

Кажущуюся переваримость азота рассчитывают по уравнению:

Nк – Nкл
N каж., %= × 100
Nк

Истинную переваримость по уравнению:

Nк – Nкл – N бб
Nист., % = × 100
Nк

где, Nбб – азот, выделенный с калом на безбелковом рационе.

В наших опытах на свиньях установлено, что количество эндогенного (метаболического) азота зависит от уровня кормления и аминокислотной сбалансированности (табл. 3.5). На рационах с высоколизиновой (ВЛ) кукурузой количество эндогенного азота от потребленного составляло 5,4-7,1%, с обычной (ОБ) существенно больше – 10,0-10,8%, его доля в кале- соответственно 26,0-40,0% и 37,9-45,0%. Коэффициенты истинной переваримости, как правило, выше кажущийся, при этом разница в показателях истинной переваримости между ВЛ и ОБ кукурузами сокращается.

Таблица 3.5 – Кажущаяся и истинная переваримость азота у свиней при ограниченном и кормлении вволю высоколизиновой и обычной кукурузой

3.4. Факторы, влияющие на переваримость

Химический состав корма. Переваримость корма зависит от химического состава. Разные зерновые корма, которые не сильно различаются по составу, имеют близкую переваримость питательных веществ. Состав и переваримость грубых кормов может существенно из-